植物核蛋白/胞质蛋白提取试剂盒-非酶法北京厂家

特别提示：包括植物核蛋白/胞质蛋白提取试剂盒-非酶法在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：植物核蛋白/胞质蛋白提取试剂盒-非酶法
英文名称：Plant nucleoprotein / Cytoplasmic Protein Extraction Kit - non enzymatic method
产品货号：HR0137
产品规格：50T|100T

植物核蛋白和细胞质蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种植物细胞和各种实体植物组织，如叶片、根、种子等植物组织中提取核蛋白和其它细胞质蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的核蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。

储存条件：蛋白提取液2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品特点：
1．使用方便。
2．将蛋白提取的时间缩短至 30分钟-1小时。
3．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒
使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

使用方法：
1．提取液制备：每500μl 预冷的蛋白提取液A中加入2μl蛋白酶抑制剂；每200μl蛋白提取液B中分别加入2μl蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2．取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的200mg 植物组织样本剪碎，采用以下一种方法处理：
A、加入 500μl 提取液A 后用匀浆机/匀浆器匀浆。
B、置于研钵中用液氮研磨，研磨后加入 500μl冷的提取液A。
C、加入 500μl 提取液A 直接置冰上研磨。
3．高速涡旋振荡 5秒，然后在4℃，100×g 力条件下离心1分钟。
4．收集上清，弃沉淀。
5．将上清在 4℃，600×g 力条件下离心1分钟。
6．收集沉淀，将上清移入另一干净的离心管。
7.在沉淀中加入 100-200μl冷的提取液B，高速涡旋振荡15秒。
8．置冰上 40分钟，每隔10分钟高速涡旋振荡15秒。
9.在 4℃，16000×g条件下离心10分钟。
10．快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即得到核蛋白。
11.在步骤 6中的上清中加入50μl 胞质提取液C，高速涡旋振荡15秒，充分混匀。
12．置冰上 40分钟，每隔10分钟高速涡旋振荡15秒。
13.在 4℃，16000×g条件下离心10分钟。
14．将上清吸入另一预冷的干净离心管，即得到细胞质蛋白。
15．将上述蛋白提取物定量①后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验②。
注：① 建议用BCA 法进行蛋白定量。
②蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。

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