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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃避光
- 保质期:
一年
- 英文名:
Western Blotting Mouse IgG DAB Chromogenic Reagent Kit
- 库存:
607
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京现货DAB法显色试剂盒(小鼠IgG)优惠价的品牌:百奥莱博,是优质的蛋白质研究产品,用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多DAB法显色试剂盒(小鼠IgG)等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京现货DAB法显色试剂盒(小鼠IgG)优惠价,产品信息:
类别:蛋白质研究
英文名:Western Blotting Mouse IgG DAB Chromogenic Reagent Kit
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| DAB法显色试剂盒(小鼠IgG) | QN1162 | 1盒 |
规格:1盒
英文名:Western Blotting Mouse IgG DAB Chromogenic Reagent Kit
品牌:百奥莱博
编号:QN1162
产地:国产|进口
本试剂盒主要用于western blotting的DAB显色,含有抗小鼠IgG酶标二抗。
SDS-PAGE电泳后,蛋白质按照分子量大小分离,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)后,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶标记的第二抗体起反应,经过底物显色以检测电泳分离的特异性的蛋白。
试剂盒组分:
封闭试剂————————————30g
10倍浓缩抗体稀释液———————50ml
酶标二抗————————————0.5ml,效价1:500~3000
20倍DAB浓缩显色液-———————5mlA+5mlB。
常规电泳转膜后:
1) 清洗转印膜:将膜剥离下后,作好标记,一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T 漂洗3 次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS,防止影响后面的抗体结合。
2) 按5g 封闭试剂加100ml 双蒸水计,配制膜封闭液,配好的膜封闭液为乳白色悬液,将漂洗过的转印膜,封闭液内,摇床震动,室温封闭30min。用TBS-T ,PH7.6 洗液,室温漂洗3 次每次5min。
3) 将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml 10×抗体稀释液加入90ml 双蒸水,混匀,可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4) 用1×的抗体稀释液稀释抗体。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中,加入一抗工作液,封口,4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。注:如果所加一抗不同,可在此步将膜沿电泳方向剪成条,分别作好标记,分开孵育。
5) 用TBS-T ,PH7.6 洗液,室温漂洗3 次每次5min。
6) 用稀释好的抗体稀释液稀释抗体。根据用量,按10ml 抗体稀释液加入10ul HRP 标记二抗的比例,配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中,加入二抗工作液,封口, 37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7) 用TBS-T ,PH7.6 洗液,室温漂洗3 次每次10min。
8) 配制DAB 显色:根据用量,取TBS-T 4ml,加入DAB 显色液A、DAB 显色液B 各200ul,混匀,加在膜正面,室温下显色。在目标条带显出后,而且背景未出时,放入水中终止显色。
注意事项:
1. 请根据一抗来源选择试剂盒。
2. western blotting DAB显色法操作简单,但其敏感性与ECL发光发有一定的差距,一般只适用于丰度较高的蛋白。
3. 可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深,可延长膜封闭时间,加长最终漂洗次数与时间。如果条带过弱,可延长抗体孵育时间。
4. 如果完全没有条带,请检查前期蛋白处理及实验过程, 如果确认无误,反复两次依旧无结果,请换用ECL发光法显色。
5. TBS-T(0.01M)配制方法:称取NaCl 8.5g ,Tris 1.21g ,用800ml 的双蒸水溶解,用盐*(代"酸")调PH 到7.6,再加入0.5ml Tween-20,用双蒸水加至1000ml,混匀即可。(也可按照自己的配制习惯来配制)
储存条件:-20℃避光,有效期一年。
北京现货DAB法显色试剂盒(小鼠IgG)优惠价专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:Western Blotting Mouse IgG DAB Chromogenic Reagent,小鼠IgG,DAB法显色试剂盒,DAB法显色试剂盒(小鼠IgG),QN1162
DAB法显色试剂盒(小鼠IgG)为高校实验室,各大科研单位专用试剂,不得用于生产或者其它用途,本公司提供各种品牌的进口的试剂来满足不同客户的需求,欢迎前来订购!
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| 编号 | 类别 | 名称 |
| QN0023 | 抗生素类 | 潮霉素B |
| QN0762 | 其他生化试剂 | 顺铂 |
| QN0440 | 抑制剂激活剂 | PMSF(100mM) |
| QN0463 | 酶和辅酶 | 超氧化物岐化酶 |
| QN0865 | 其他生化试剂 | β-葡聚糖 80%(酵母,水溶) |
| QN1050 | 克隆与表达 | X-gal(β-半乳糖苷酶发色底物) |
| QN0060 | 抗生素类 | 地塞米松 |
| QN1299 | 细胞凋亡与增殖 | Hoechst 33258染色液 |
| QN0817 | 其他生化试剂 | 甘油三丁酸酯 |
| QN1178 | 蛋白质研究 | 两性电解质(pH6~9) |
| QN0275 | 蛋白类 | 重组金黄色葡萄球菌蛋白A |
| QN1110 | 蛋白质研究 | 4×蛋白上样缓冲液(含β-巯基乙醇) |
| QN1318 | 细胞凋亡与增殖 | PI溶液(1mg/ml) |
| QN0469 | 酶和辅酶 | 蛋白酶K |
| QN0962 | 核酸扩增(PCR) | 通用引物 T3 |
| QN0458 | 酶和辅酶 | 酪*酸酶 |
| QN1112 | 蛋白质研究 | 二硫苏糖醇 |
| QN0618 | 其他生化试剂 | 透明质酸* |
| QN0953 | 核酸扩增(PCR) | 通用引物 ITS5 |
| QN0306 | *基酸类 | 水解乳蛋白(进口) |
| QN0300 | *基酸类 | γ-*基丁酸 |
| QN0713 | 其他生化试剂 | 聚乙二醇 PEG 3350 |
| QN0949 | 核酸扩增(PCR) | 2×SYBR Green PCR Mastermix |
| QN0553 | 其他分子生物学试剂 | 次黄嘌呤 |
| QN1082 | 蛋白质研究 | 高效RIPA裂解液(组织/细胞) |
| QN0207 | 植物激素类 | 肾上腺酮 |
| QN0586 | 其他生化试剂 | 二乙三胺五乙酸 |
| QN0221 | 植物激素类 | 玉米素 |
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文献和实验试剂 公司),二甲基亚砜(DMSO),苏木精染液,伊红染液;TGF-β1免疫组织化学染色试剂盒,DAB显色试剂盒。B5060EX二氧化碳培养箱(德国Heraeus公司产品),37XAZ倒置生物显微镜(上海光学仪器厂),Olympus光学显微镜,DG-3022型酶联免疫检测仪(南京华东电子管厂),YS-875A净化工作台。 方法 1 MTT法检测不同浓度的苦参素对NIH3T3细胞增殖的影响 用0.25%胰蛋白酶消化单层培养NIH3T3细胞,用含10
-Clone公司;青霉素钠、硫酸链霉素购自华北制药厂;鼠抗兔平滑肌α肌动蛋白单克隆抗体,购自Zymed公司;SP免疫组化试剂盒,DAB显色试剂盒购自北京中山生物技术公司。 1.2 细胞培养 断颈处死小鼠,75%乙醇浸泡消毒2min,分离取出胸主动脉,D-Hanks液清洗去除血污,获干净光滑的血管段,用眼科镊固定血管段端,刀片轻刮去外膜结缔组织,再用眼科剪小心剖开血管,刮去内膜层细胞,将血管段剪成1mm×1mm大小的组织块,均匀贴放于25ml培养瓶底面,组织块间隙约2~3mm,加入含10%胎牛
片加生物素化抗小鼠IgG(1:100)30min室温。 (6)PBS彻底冲洗。 (7)应用ABC复合物与等量的1%牛血清白蛋白-PBS液混合孵育1h,室温。 (8)PBS彻底冲洗。 (9)将切片覆以新鲜配制的0.025%DAB溶液,0.02%H2 O2 ,孵育3~15min。 (10)水洗,复染,脱水,透明和以甘油/PBS或DPX封固。如需要可用银染,多层ABC或PAP法加强染色效果。 三、地高辛标记cRNA探针的应用
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