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- CM-H057
- 2026年01月02日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量库存
- 细胞类型：
正常细胞/癌细胞
- 组织来源：
详见说明书
- 相关疾病：
详询
- 物种来源：
人源
- 器官来源：
详询客服人员
- 运输方式：
快递运输
- 年限：
长期保持
- 生长状态：
良好
组织来源：乳腺
培养条件：RPMI-1640 +10% FBS +0.023IU/mL胰岛素
形 态：贴壁；上皮细胞样
背 景：来源组织是一个乳头状侵入性导管瘤，7个局部淋巴结中3个已有转移。建立的细胞是多态性的，包括上皮细胞样组分和多核巨细胞。向培养基中分泌粘液素样物质。
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通交流。
贴壁细胞常规培养传代流程（请严格遵照无菌操作）
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5-6ml完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
悬浮细胞常规培养传代流程（请严格遵照无菌操作）
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数细胞培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验问： A549细胞到底是如何形态？我见过三角形，近乎MDCK细胞形态的，还有的呈长梭形。我感觉自己的细胞好像混进了MDCK细胞。大家帮忙诊断一下，谢谢。 我培养的A549细胞 答1：
我也在养A549细胞，也来讲讲自己的经验，希望大家共同学习。我们主要是看细胞的密度，大概有80-90%铺满培养瓶底就可以传代了，时间长短不一，大概有5-7天吧，一瓶一般传3-4瓶，中间一般会有一次换液的。培养基用的是1640+10%的小牛血清+200u/ml庆大霉素。传代时先倒掉就培养基，然后用PBS洗一两次，然后再用0.25%胰酶消化（100ml培养瓶盖住表面大概要两滴管左右），可镜经下观察细胞间已出现细胞胞质回缩变圆，缝隙变大（我的细胞大概要2min左右），即可倒去消化液，加入培养基，吹打细胞
我养了三种贴壁的细胞，用同样的消化方法，都很好。这三种细胞是A549，ECV304，2BS。1、0.25%胰酶新鲜解冻,不需要预热。2、倒掉培养瓶中的培养基,并用预冷的D-Hank‘s洗两次（要冷，用前4度中取出）。3、加入约1-2ml的胰酶,晃动瓶子,使液体浸润瓶底。4、超净台上放置约1-2分钟（2BS需要的时间更短，约1分钟）5、镜下观察（我一般都省略了，因为每次的效果都很好）,见细胞变圆或细胞间隙变大,即可加入含血清的培养基终止消化。（我们的胰酶都不去掉）6、从瓶口到瓶底吹打，可见细胞
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