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冷藏
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长期
- 英文名:
Long Taq DNA Polymerase
- 库存:
365
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖长片段DNA聚合酶批发在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:长片段DNA聚合酶批发
品牌:百奥莱博
规格:125U
产地:国产|进口
编号:SY0030
Long Taq DNA Polymerase是Taq DNA Polymerase与一种含有3"→5’外切酶活性 (校对活性)的蛋白组成的混合酶,专门用于扩增长片段。其保真性是Taq DNA Polymerase的6倍,配合独特的缓冲体系,Long Taq DNA Polymerase可从人基因组模板中扩增长达15 kb的片段。PCR扩增产物的3’端带A,可克隆至T载体,其中的PCR Enhancer可有助于扩增高GC含量模板。
产品组分:
10×Long Taq Buffer (Mg2+ free):500μl
25 mM MgCl2:1ml
dNTP Mix(10mM each):100 μl
Long Taq DNA Polymerase(5U/μl):25μl
5×PCR Enhancer:125μl
10×Loading buffer:1.25ml
活性定义:用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,74℃ 30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。
质量控制
核酸外切酶残留检测:10 U本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测:10 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中,加入2U本品,以ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
功能检测:PCR体系中加入1.25U本品,以100 ng人基因组DNA为模板扩增dystrophin基因。30个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,观察到单一的15 Kb条带。
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文献和实验vol 687 Chapter 2 采用DNA聚合酶融合技术进行长片段PCR扩增 (精华)
Methods in Molecular Biology vol.687 Park D.J. (ed.) PCR Protocols Chapter 2 PART II :Cloning and Sequencing Long-Range PCR with a DNA Polymerase Fusion Holly H. Hogrefe and Michael C. Borns Abstract Proofreading DNA
5. 不受粘末端或平末端的限制6. 超简洁反应体系配制:只需将克隆片段与线性化的载体按一定比例加入Lightening Assembly Master Mix即可7. 超快速:克隆连接反应只需10-15分钟较传统克隆方法,操作步骤更少,所需试剂更少,所需时间大大缩短。8. PCR产物可直接与表达载体连接,无需酶切或连入克隆载体。应用范围:1. 平末端和粘末端DNA片段克隆。 2. 1到多个DNA片段克隆。3. 点突变。 4. 长片段克隆。5. DNA片段上有和载体相同的酶切
PCR技术自1983Mullis发明以来,给生命科学带来了历史性的变化,现已成为分子遗传学、基因组测序和作图、法医学、系统动物学等各领域内不可缺少的工具。但是,普通的PCR最长只能扩展2-3kb左右的短片段基因,对于5kb以上的长片段基因很难有效的扩增,这使PCR受到了很大限制。故人们一直以来都在尝试利用PCR扩展出更长片段的PCR。“LongPCR”这个名词和技术最早由美国华盛顿大学医学院的Barnes WM提出。其设想来自于他1992年一次实验错误。最初他想用常规PCR方法扩增
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