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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 注册证号:
详见说明书
- 保存条件:
在-20℃或-80℃可长期保存
- 保质期:
DH5α 化学感受态细胞0.1mL×10售后服务
- 库存:
20
- 供应商:
上海一研
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
DH5α 化学感受态细胞0.1mL×10售后服务特点
1.离心柱法;
2.快速:30min内即可完成全部操作;
3.得率高:无需裂解红细胞,直接从全血中提取DNA,可从0.2 mL健康人类全血中提取得到不低于3μg DNA;
4.操作简便:无需水浴,全部提取操作可在室温下进行;
5.高质量:所提取的DNA纯度高、得率高,可直接用于PCR、酶切、杂交等下游实验。
DH5α 化学感受态细胞0.1mL×10售后服务客户提供
●新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
●4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
●详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供
基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证
高纯度RNA/DNA、完整货期
3-5个工作日
DH5α 化学感受态细胞0.1mL×10售后服务注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
DH5α 化学感受态细胞0.1mL×10售后服务实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5):氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的氯仿:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提两次,氯仿:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
4-Chloro-N-(2-{[5-(trifluoromethyl)-2-pyridyl]sulfonyl}ethyl)benzamide GSK-3787
2-(Phosphonomethyl)pentane-1,5-dioi NAALDase Inhibitor, PMPA
5-(4-Chlorophenyl)-N-(3,5-dimethoxyphenyl)furan-2-carboxamide A-803467
4-[4-(Trifluoromethyl)phenyl]-N-(6-Fluoro-1H-indazol-5-yl)-2-methyl-6-oxo-1,4,5,6-tetrahydro-3-pyridinecarboxamide; GSK429286 EZSolution GSK429286A
N-[4-[(2-Amino-6-methyl-4-pyrimidinyl)amino]phenyl]-4-(4-quinolinylamino)benzamide SGI-1027
HeLa Nuclear Extract HeLa Nuclear Extract
Bovine Serum Albumin – Cohn Fraction V, Fatty Acid Free, pH – 7.0 Bovine Serum Albumin – Cohn Fraction V, Fatty Acid Free, pH – 7.0
Curcumin (technical grade) (5 g) 1,7-bis(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-1E,6E-heptadiene-3,5-dione; Indian Saffron|Turmeric yellow; Curcumin (technical grade)
Ac-Leu-Leu-Met-H - ALLM Ac-Leu-Leu-Met-H - ALLM
DiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 3.5 kDa DiaEasy Dialyzer (800 ul) MWCO 3.5 kDa
9-Z),11-E),13-E)-Octadecatrienoic Acid methyl ester (50 mg) Methyl α-eleostearate|α-ESA methyl ester, 9-Z),11-E),13-E)-Octadecatrienoic Acid methyl ester, 9Z,11E,13E-octadecatrienoic acid, methyl ester
15-deoxy-Δ12,14-Prostaglandin A2 (10 mg) 15-deoxy-Δ12,14-PGA2, 15-deoxy-Δ12,14-Prostaglandin A2, 9-oxo-prosta-5Z,1,12Z,14E-tetraen-1-oic acid
Abacavir -hydrochloride) (5 g) Abacavir -hydrochloride), 4R-[2-amino-6-(cyclopropylamino)-9H-purin-9-yl]-2-cyclopentene-1S-methanol, monohydrochloride
PtdIns-(3,4)-P2 (1,2-dipalmitoyl) (sodium salt) (5 mg) Phosphatidylinositol-3,4-diphosphate C-16|DPPI-3,4-P2, PtdIns-(3,4)-P2, 1-(1,2R-dihexadecanoylphosphatidyl)inositol-3,4-bisphosphate, trisodium salt
5(S),14(R)-Lipoxin B4 (500 ug) 5(S),14(R)-LXB4, 5(S),14(R)-Lipoxin B4, 5S,14R,15S-trihydroxy-6E,8Z,1E,12E-eicosatetraenoic acid酸球菌 Lactococcus lactis地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis
苜蓿中华根瘤菌三叶草根瘤菌 Rhizobium trifolii
SF763(人脑瘤细胞)SW 780(人膀胱移行细胞)
戊糖杆菌 Lactobacillus pentosus植物杆菌 Lactobacillus plantarum
毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipes尖顶羊肚菌 Morchella conica
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum人小梁网细胞完全培养基
5637(人膀胱细胞)QGY-7701, 人肝细胞
泡盛曲霉 Aspergillus awamori地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis
百脉根根瘤菌 Rhizobium loti大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
DH5α 化学感受态细胞0.1mL×10售后服务P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤细胞)CaES-17(人食管细胞)gersion
正灰绿正青霉 Eupenicillium euglaucum爪哇根霉 Rhizopus javanicus
双孢蘑菇假单胞杆菌 Pseudomonas sp.
伊红染色液CW-2(人结肠细胞)100ml
小鼠甲状腺上皮细胞完全培养基戊糖杆菌 Lactobacillus pentosus
副干酪杆菌 Lactobacillus paracasei嗜热假诺卡氏菌 Pseudonocardia thermophila
费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium frediiWestern Blot封闭液Ⅱ(奶粉,pH7.5)/Blocking Buffer(milk)
KM3, 人多发性骨髓瘤细胞暂无 Microbacterium ammoniaphilum
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae漏斗状侧耳 Pleurotus sajor-caju
马杜拉放线菌 Actinomadura sp.神经母细胞瘤
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文献和实验woowe97417 要转一个带氯霉素抗性的质粒到DH5α保存,但是发现用的DH5α对氯霉素不敏感,氯霉素是用无水乙醇配的,有做过类似实验的站友帮忙解答一下,谢谢啦! gingivalis 严谨型质粒 25 ug/ml 松弛性质粒 170 ug/ml 《现代分子生物学实验技术》--P753 (卢圣栋) DH5α应该对氯霉素敏感,如果在上述两个浓度条件下,DH5α能生长
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法、 CaCl2、 RuCl等化学试剂法感受态细胞:处理后,细胞膜的通透性发生变化,成为能容许外源 DNA 分子通过时细胞的状态。转化细胞(转化子):带有异源 DNA 分子的受体细胞( Transformant )。本实验以 E.coli DH5α 菌株为受体细胞,用 CaCl2 处理受体菌使其处于为感受态,然后与 pUC18质粒共保温,实现转化。 pUC18质粒携带有抗氨苄青霉素的基因,因而使接受了该质粒的受体菌具有抗氨苄青霉的特性,用 Apr符号表示。将经过转化后的全部受体细胞经过适应稀释,在含氨
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