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- 注册证号:
详见说明书
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一20度或-80度可长期保存
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL说明书
- 库存:
50
- 供应商:
上海谷研
- 规格:
10×100μL
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL说明书详细介绍:

LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL说明书试剂的取用规则:
(1)试剂不能与手接触。
(2)要用洁净的药勺,量筒或滴管取用试剂,绝对不准用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后,应将工具洗净(药勺要擦干)后,方可取用另一种试剂。
(3)试剂取用后一定要将瓶塞盖紧,不可放错瓶盖和滴管,绝不允许张冠李戴,用完后将瓶放回原处
(4)已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内。
LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL说明书操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
鸡层连蛋白/板层素(LN)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人异质核糖核蛋白Q(SYNCRIP/HNRPQ/NSAP1)免疫试剂盒 Human SYNCRIP/HNRPQ/NSAP1 ELISA kit
可溶性CD14(sCD14)ELISA试剂盒 ,英文名: sCD14 ELISA Kit
RatEpidermalgrowthfactor,EGFELISA试剂盒大鼠表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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HumanHelicobacterpyloricytotoxin-associatedgeneAproteinIgG,HP-CagA-IgGELISAKit人幽门螺杆菌细胞毒素相关基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人细胞周期素A2(Cyclin-A2)免疫试剂盒 Human Cyclin-A2 ELISA Kit
谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)测试盒 GR法 50管/48样
Ratneutrophilactivatingprotein-2,NAP-2ELISA试剂盒大鼠中性粒细胞趋化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISA试剂盒人超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanmacrophageinflammatoryprotein2,MIP-2ELISAKit人巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人白介素5(IL-5)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子神经特异性烯醇化酶(NSE)免疫试剂盒 Rabbit Neuron-specific enolase,NSE ELISA Kit
生长激素释放因子(GH-RF)ELISA试剂盒 ,英文名: GH-RF ELISA Kit
Porcinediamineoxidase,DAOELISA试剂盒猪二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Human5-hydroxyindolaceticacid,5-HIAAELISA试剂盒人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
humananti-neutrophilcytoplasmicantibody,cANCAELISAKit人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HA Protein H1N1 重组甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)
角蛋白5(KRT5)重组蛋白 Recombinant Keratin 5 (KRT5)
ACVR2B重组人 ACVR2B / ActivinR-IIB 蛋白 (Fc 标签) Protein
CD97 Protein Human 重组人 CD97 蛋白 (Fc 标签)
HEXB重组人 Hexosaminidase B / HEXB 蛋白 (His 标签) Protein
TNFSF8重组食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (His 标签) Protein
Mafa(avian 0.5mgMafa(avian)(V-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A) v-maf 肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A抗原
FCGR3A重组人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 标签) Protein
SRI Protein Human 重组人 SRI / Sorcin 蛋白
CSNK2A1 Protein Mouse 重组小鼠 CSNK2A1 / CK2A1 蛋白 (His & GST 标签)
LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL说明书Mafa(avian 0.5mgMafa(avian)(V-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A) v-maf 肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A抗原
SRI Protein Human 重组人 SRI / Sorcin 蛋白
TNFSF8重组食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (His 标签) Protein
CSNK2A1 Protein Mouse 重组小鼠 CSNK2A1 / CK2A1 蛋白 (His & GST 标签)
FCGR3A重组人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 标签) Protein
LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL说明书特点
1.离心柱法;
2.快速:30min内即可完成全部操作;
3.得率高:无需裂解红细胞,直接从全血中提取DNA,可从0.2 mL健康人类全血中提取得到不低于3μg DNA;
4.操作简便:无需水浴,全部提取操作可在室温下进行;
5.高质量:所提取的DNA纯度高、得率高,可直接用于PCR、酶切、杂交等下游实验。
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文献和实验相关专题 DNA连接与转化 农杆菌感受态细胞的制备 1.挑取少许农杆菌LBA4404,接种于5ml LB液体培养基 (含50mg/L STR)中,28℃、200r/mim培养过夜。 2.取2ml培养物于LB液体培养基 (含50mg/L STR) 中继续培养,直至OD800 为0.5左右。 3.将培养物置冰浴中30min,4℃、5000r/min、离心5min,弃去上清液。 4.用10ml冷
,轻轻悬浮细胞,冰上放置20min。4℃5000rpm离心5min,去上清。 1.1.6. 加入4ml预冷的含15%甘油的0.1M的CaCl2溶液,轻轻悬浮。 1.1.7. 农杆菌悬浮液分装于无菌Eppendorf管中,每管200μl冻存于-70℃。 1.2. 双元载体转化农杆菌EHA105 取1μg左右的质粒DNA加入到200ml EHA105感受态细胞中,混匀后,冰浴30min,-70℃放置10min 。再在37℃水浴5min或42℃水浴1min,接着冰浴2min,加入800mlYM
情况下用大约 20~30 单位的酶大约 3 小时可以酶切完全。酶切后我们建议用琼脂糖凝胶回收线性化载体。将回收后的线性化载体定量,通常线性化载体的工作浓度为 50~100ng/μl。连接用水将退火后双链寡核苷酸 (10 μM) 稀释 100 倍备用。连接反应体系:T4 DNA 连接酶 5UEcoRV 5U线性化载体 2 μl稀释 100 倍后双链寡核苷酸 1 μl10× 连接酶 Buffer 1 μl50% PEG4000 1 μl加水补足 10 μl反应条件: 22℃ 30 min, 37℃ 15
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