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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
42
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
10×100μL
操作流程：
1.LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL说明书根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（如100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中；
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNAwait完全渗入到组织中），然后转移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况）；或者在4℃冰箱过夜后，从RNAwait中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
详细介绍：
以下是LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL说明书的相关产品：
S100A13 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
CXCL2 / MIP-2 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
31.2-2000 pg/mL B组轮状病毒(HRV-B)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I
0.312-20 ug/mL 人免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒
0.78-50 ng/mL 人无翅型MMTV整合位点家族成员5B(WNT5B)ELISA试剂盒
CD59 抗體, 兔單抗 ELISA FCM 50 µg
1.56-100 ng/mL 人核糖-5-磷酸异构酶(RPIA)ELISA试剂盒
78-5000 pg/mL 牛免疫缺陷病毒(BIV)核酸检测试剂盒(RT-PCR法)
CD136 / MST1R 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
0.156-10 ng/mL 人孕酮-绒毛膜雌激素受体(LH/CG-R)ELISA试剂盒
LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL说明书盐酸普拉格雷 Prasugrel Hydrochloride 389574-19-0 质量规格：美国进口
鞘磷脂 CAS 规格： 25mg/支 订购|咨询
4-羟基可乐定-d4 4-Hydroxy Clonidine-d4 57101-48-1 (unlabeled) 质量规格：美国进口
连钱草 CAS 规格： 1g 订购|咨询
4-羟基可乐定 4-Hydroxy Clonidine 57101-48-1 质量规格：美国进口
旱莲苷A CAS 规格： 20mg 订购|咨询
5-去亚硫酰-5-硫基头孢哌酮 5-Desthiolyl-5-thioxo Cefoperazone 711598-76-4 质量规格：美国进口
醌式利福平 CAS 规格： 100mg 订购|咨询
Fmoc-N-苄基甘氨酸 Fmoc-N-benzylglycine 141743-13-7 质量规格：美国进口
班布特罗 CAS 81732-46-9 规格： 100mg 订购|咨询
N-苄基甘氨酸盐酸盐 N-Benzylglycine hydrochloride 7689-50-1 质量规格：美国进口
培哚普利叔盐 CAS 规格： 100mg 订购|咨询
实验要点 ：
1．LBA4404 农杆菌感受态细胞10×100μL说明书CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。非冻型组织RNA保存液 小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
储存事项:
A. 在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
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文献和实验相关专题 DNA连接与转化 农杆菌感受态细胞的制备 1.挑取少许农杆菌LBA4404，接种于5ml LB液体培养基 (含50mg/L STR)中，28℃、200r/mim培养过夜。 2.取2ml培养物于LB液体培养基 (含50mg/L STR) 中继续培养，直至OD800 为0.5左右。 3.将培养物置冰浴中30min，4℃、5000r/min、离心5min，弃去上清液。 4.用10ml冷
，轻轻悬浮细胞，冰上放置20min。4℃5000rpm离心5min，去上清。 1.1.6. 加入4ml预冷的含15%甘油的0.1M的CaCl2溶液，轻轻悬浮。 1.1.7. 农杆菌悬浮液分装于无菌Eppendorf管中，每管200μl冻存于-70℃。 1.2. 双元载体转化农杆菌EHA105 取1μg左右的质粒DNA加入到200ml EHA105感受态细胞中，混匀后，冰浴30min，-70℃放置10min 。再在37℃水浴5min或42℃水浴1min，接着冰浴2min，加入800mlYM
情况下用大约 20～30 单位的酶大约 3 小时可以酶切完全。酶切后我们建议用琼脂糖凝胶回收线性化载体。将回收后的线性化载体定量，通常线性化载体的工作浓度为 50～100ng/μl。连接用水将退火后双链寡核苷酸 (10 μM) 稀释 100 倍备用。连接反应体系：T4 DNA 连接酶 5UEcoRV 5U线性化载体 2 μl稀释 100 倍后双链寡核苷酸 1 μl10× 连接酶 Buffer 1 μl50% PEG4000 1 μl加水补足 10 μl反应条件： 22℃ 30 min， 37℃ 15
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