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- 2025年07月12日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
冰袋运输。-20℃保存
- 保质期：
1年
- 英文名：
Lentivirus AR Luciferase Reporter
- 库存：
大量
- 供应商：
上海沪震实业有限公司
- 规格：
μg/盒
AR 报告基因慢病毒是沪震生物自主研发的用于检测 AR 转录活性水平为目的的报告基因慢病毒颗粒。Androgen Receptor(AR)属于核受体超家族中的类固醇受体，通过介导雄激素的作用调控多种基因的表达。
AR 报告基因慢病毒主要用于检测细胞中Androgen信号通路、药物研究以及基因过表达和 RNAi 的表型研究等。
pGMLV-AR-Lu 是在 pGMLV -Lu 慢病毒载体的多克隆位点插入了多个AR结合位点，可以高灵敏度地检测 AR 的激活水平。采用慢病毒作为报告基因的优点在于它能够感染多种难感染的细胞，比如原代细胞、干细胞、神经元细胞等。而且慢病毒能够将外源基因插入细胞基因组内，实现稳定转染。
质粒图谱
产品组分
AR-Luc报告基因慢病毒颗粒运输与保存方法
干冰（wet ice）运输。收到产品后-80ºC保存（如保存时间过长，使用前请重新检测病毒滴度）。
注意事项
1. 病毒操作时最好使用生物安全柜，如使用普通超净工作台操作病毒，请不要打开风机。
2. 病毒操作时请穿实验服，带口罩和乳胶手套。
3. 操作病毒时必须特别小心，不要产生气雾或飞溅。如操作时超净台有病毒污染，立即用10%次氯酸钠溶液搽拭干净。接触过病毒的枪头、离心管和培养板等需用10%次氯酸钠溶液浸泡1h以上后弃去。
4. 用显微镜观察细胞感染情况时应遵从以下步骤：拧紧培养瓶或盖紧培养板。用70%乙醇清理培养瓶外壁后到显微镜出观察拍照。离开显微镜试验台前，用70%乙醇清理实验台。
5. 病毒操作完成后，用肥皂清洗双手。
AR-Luc报告基因慢病毒颗粒使用说明
AR报告基因慢病毒颗粒采用慢病毒转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。Androgen Receptor的激活剂，可作为AR报告基因的阳性对照。
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文献和实验鲎试剂法 低内毒素，批次以官方为准 慢病毒包装的常见应用 自己实验室没有包装条件，委托服务商代包装。 需要特定启动子（如 SFFV 用于悬浮细胞、CMV/CAG 广谱）或报告基因（EGFP/mCherry/Luc）的定制病毒。 做大基因、难出毒基因的专用载体包装（GV747）。 做悬浮细胞专用慢病毒：骨架换 PRRL、启动子换悬浮适用型，配套悬浮专用试剂。 把方案落地前，再过一遍这张清单 目标细胞是否易转导，是否需要稳定表达 完整表达盒长度是否会明显影响包装/滴度 功能滴度与目标MOI
为什么你的慢病毒总是不出毒？｜从载体设计到包装全流程拆解失败诱因
严格来说，“不出毒”不等于完全没有病毒颗粒生成，实操中多表现为病毒总产量极低、功能滴度严重不足、靶细胞感染效率差、病毒基因组无法正常组装包装四类情形。发现感染效果不理想时，需要分步甄别：是病毒生成量匮乏、滴度不达标，还是病毒本身存在功能性缺陷。只有明确问题所在，才能进行针对性优化。 原因一：转移载体设计存在问题 在慢病毒包装失败案例中，载体本身的问题往往最容易被忽视。例如，插入片段过大会明显影响包装效率，慢病毒包装容量通常不超过8–10 kb，当载体
自己测滴度吗? 答：我们是在HT1080细胞株中对纯化的慢病毒进行滴度测定的。常用有4种方法进行慢病毒滴度测定，分别是： (1)通过ELISA对病毒颗粒中的p24蛋白进行检测; (2)通过定量PCR对病毒颗粒的RNA进行检查; (3)通过定量PCR对整合到基因组DNA中的病毒序列进行检测; (4)通过FACS对荧光蛋白的表达水平进行检测。 我们用基因组DNA定量PCR的方法进行慢病毒滴度的检测。前两种方法并不能区分病毒颗粒是否有活性
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