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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冰袋运输。-20℃保存
- 保质期:
1年
- 英文名:
C/EBPβ GFP Reporter Plasmid
- 库存:
大量
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 规格:
μg/盒
C/EBPβ-GFP报告基因是沪震生物自主研发的用于检测C/EBPβ转录活性水平为目的的报告基因。C/EBPβ(CCAAT/enhancer-binding protein beta)是转录因子C/EBPs家族的重要成员,它主要通过对靶细胞基因转录的调节,参与细胞增殖与分化、肿瘤发生与凋亡、细胞周期调控等。
C/EBPβ-GFP报告基因主要用于检测细胞中C/EBP信号通路、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMC/EBPβ-GFP是沪震生物改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个C/EBPβ结合位点,可以高效地检测C/EBPβ的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得C/EBPβ-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱
pGM C/EBPβ-GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
C/EBPβ-GFP报告基因质粒运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存。
使用说明
pGMC/EBPβ-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经沪震生物允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
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文献和实验又是代谢的锅,不治之症银屑病终于有盼头了!上交王宏林教授团队Immunity重磅报道
PP6 的正常人表皮细胞中,C/EBP-β 信号激活 (图 E 和 F)。作者还发现 PP6 与 C/EBP-β 在细胞核内有直接或间接相互作用。图片来源:Immunity 而且,在 PP6-/-293FT 细胞系中,Thr-179、Ser-184 和 Thr-188 过度磷酸化。通过构建表达质粒,作者发现 PP6 与 WT C/EBP-β 在细胞核内相互作用。PP6-C/EBP-βS184A 和 PP6-C/EBP-βT188A 的相互作用以及具有 Ser-184 和 Thr-188 双突变
常见的报告基因 报告基因必须具备的特点:①由原核基因编码的基因产物必须与同转染前真核细胞内任何相似的产物相区别;②细胞内其他基因产物不会于扰报告基因产物的检测;③报告基因编码产物的检测应该快速、简便、灵敏度高,而且重现性好。到目前为止,报告基因通常是在报告基因载体质粒中与被检测基因序列相连,先让质粒在大肠杆菌中进行增殖,再提取质粒,转染人感兴趣的真核细胞中。与此同时还要将有真核启动子和增强子的另一种报告基因质粒共转染同一细胞,作为转染率的内对照。
在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时 ,通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因(比如CAT,β-Gal,GUS)不够便利。因为各自的测试化学,处理要求,检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术,结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因测试系统,结合pRL载体系统,表达第二个报告基因海洋腔肠荧光素酶,在单管中进行双荧光素酶报告基因测试,快速,灵敏,简便。系统还提供PLB裂解液,用来裂解在多孔板中培养的哺乳细胞,不需操作单个样品
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