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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
1x10^6
- 肿瘤类型:
见说明书
- 细胞类型:
见说明书
- ATCC Number:
见说明书编号
- 品系:
见说明书编号
- 组织来源:
肺
- 相关疾病:
见说明书
- 物种来源:
人
- 免疫类型:
见相关文献
- 细胞形态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
见产品名称
- 器官来源:
人
- 运输方式:
常温或干冰/联邦快递
- 年限:
永久
- 生长状态:
贴壁
- 规格:
T-25 Flask
人肺癌细胞;A549产品信息:
细胞名称: 人肺癌细胞;A549
缩写: A549
种属: Human
货号: HZ-1035
来源: ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC
背景资料: 该细胞系是1972年由GiardDJ通过肺癌组织移植培养建系的,源自一位58岁的白人男性。A549能通过胞苷二磷脂酰胆碱途径合成富含不饱和脂肪酸的卵磷脂;角蛋白阳性。
生长特性: 贴壁生长
培养条件: 89%DMEM+10%FBS+1%双抗
规格: T25
细胞数: 100万
细胞活力: 95%
细胞检测: 不含细菌、真菌、支原体污染。
传代方法: 1:2—1:4
冻存条件: 90%FBS+10%DMSO
人肺癌细胞;A549接收操作说明
(重要:请在收到细胞后第一时间阅读本说明再进行操作)
购买者应具备一定的细胞培养知识与经验,实验室具备基本细胞培养条件,并按照细胞说明书相关要求进行操作。
收到细胞后确保细胞的培养条件一致,若因培养条件不一致导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。细胞传代后请更换新的细胞培养瓶,不建议继续使用原提供的细胞培养瓶。
人肺癌细胞;A549接收操作:
1.由于细胞运输途中存在较多不可控因素(如温度变化,强烈振荡,时间较长,生长条件不适宜),可能出现漏液,污染,细胞漂浮及死亡等状况,因此请务必在收到细胞当天提供原始细胞图片。
图片拍摄步骤:收到细胞快递当日必须先着重对培养基拍第一组照片,观察是否有漏液和培养基是否颜色变浑浊,是否变异常,并显微镜下拍细胞100X,200X各两张,拍摄照片应清晰;第二组照片,未开瓶盖、未做任何处理把细胞培养瓶静置在培养箱2–4h后进行拍摄;第三组照片,细胞第一次传代后,如果细胞有问题,要每天都有照片记录下来提供给卖方。
根据提供的图片,本公司技术人员分析细胞确有问题,承诺免费提供一次;若未在规定时间限制内提供相关图片,默认收到细胞时细胞正常。
2.由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,这时请在拍照后将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基,培养3天,3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增殖而是继续脱落死亡,请提供细胞图片跟进解决。(这里是针对原来完全培养基FBS浓度是10%的情况,如果原来FBS浓度是20%,可以增加到25%FBS浓度)
3.收到细胞时若无以上两种异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,若为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中的培养液吸出,留5ml左右培养基(T25细胞培养瓶)继续培养;超过80%汇合度时,请按照细胞培养条件进行传代培养。
4.收到细胞,原瓶中的培养液若颜色正常,可以收集继续使用,在第一次消化传瓶时,建议留一瓶细胞继续使用我们的培养液,其他瓶的细胞可使用客户自己的培养液进行培养,这样可以减少由于细胞不适应培养液导致的问题,请按照细胞处理方法进行操作。
人肺癌细胞;A549注意事项:
玻璃吸管和玻璃培养瓶的消毒:1)高压蒸汽灭菌15分钟以上;2)干烤消毒140度2小时以上;
无菌工作台先清洗后用75%酒精擦拭干净,紫外线照射40分钟以上;各种培养板照射3小时以上;培养基(pH7.2)和血清配制好后要做无菌试验:将血清按10%加入培养基内,用无菌的玻璃离心管或玻璃瓶取完全培养基5-10ml置培养箱内培养2-3天,肉眼见无浑浊或沉淀等异物。分装后置4度保存;消化液(pH7.8)或其它加入液,应用高压蒸汽灭菌或一次性无菌滤器过滤除菌,分装成支置-20度保存;培养箱应先用清水清洗后用75%酒精擦拭一遍(如有紫外线的应照射1小时以上,如有高温灭菌的应按程序来菌)。至少每月一次。
进入操作时应注意先清洗双手及手腕,然后用75%酒精擦拭,操作时注意无菌台内空间层次。手及物品不要在暴露的瓶口上方来往,如果数量较多,培养瓶应放在与酒精灯平行地方便于操作,瓶与瓶之间应相隔一定的距离,开瓶(盖)时应先用75%酒精反复擦拭或用灯烧,打开后应用灯先烧口,然后烧盖。用完后同样操作。整个操作过程尽量在无菌台靠里面一点。
现货细胞系列表:Mahlavu【人肝癌细胞】 Mahlavu 人肝癌细胞 人 1640 贴壁
95C【人肺巨细胞癌细胞(低转移)】 95C 人肺巨细胞癌细胞(低转移) 人 1640 贴壁
RS4;11【急性B淋巴细胞白血病细胞】 RS4;11 急性B淋巴细胞白血病细胞 人 1640 悬浮
697【人前B细胞白血病细胞】 697 人前B细胞白血病细胞 人 IMDM 悬浮
ML-2【人急性髓单核细胞白血病细胞】 ML-2 人急性髓单核细胞白血病细胞 人 1640 悬浮
WiDr【人结直肠癌细胞】 WiDr 人结直肠癌细胞 人 EMEM 贴壁
HCC-1395【人乳腺癌细胞】 HCC-1395 人乳腺癌细胞 人 1640 贴壁
MCF-12A【人乳腺癌细胞】 MCF-12A 人乳腺癌细胞 人 EMEM 贴壁
EVSA-T【人乳腺癌细胞】 EVSA-T 人乳腺癌细胞 人 DMEM 贴壁
BT-483【人乳腺导管癌细胞】 BT-483 人乳腺导管癌细胞 人 DMEM 贴壁
MDA-MB-435【人乳腺癌细胞】 MDA-MB-435 人乳腺癌细胞 人 L15 贴壁
MDA-MB-157【人乳腺癌细胞】 MDA-MB-157 人乳腺癌细胞 人 L15 贴壁
ZR-75-1【人乳腺癌细胞】 ZR-75-1 人乳腺癌细胞 人 DMEM 贴壁
MH-S【小鼠肺泡巨噬细胞】 MH-S 小鼠肺泡巨噬细胞 小鼠 1640 悬浮
L2【大鼠肺泡上皮细胞】 L2 大鼠肺泡上皮细胞 大鼠 DMEM 贴壁
KBM7【人慢性髓白血病细胞细胞】 KBM7 人慢性髓白血病细胞细胞 人 IMDM 悬浮
SUM149PT【人乳腺癌细胞】 SUM149PT 人乳腺癌细胞 人 DMEM 贴壁
FL83B【小鼠正常肝细胞】 FL83B 小鼠正常肝细胞 小鼠 DMEM 贴壁
PL45【人胰腺导管癌细胞】 PL45 人胰腺导管癌细胞 人 DMEM 贴壁
MPC5【小鼠肾足细胞】 MPC5 小鼠肾足细胞 小鼠 DMEM 贴壁
HUVSMC【人脐静脉平滑肌细胞】 HUVSMC 人脐静脉平滑肌细胞 人 DMEM 贴壁
HT-ori3【人正常甲状腺细胞】 HT-ori3 人正常甲状腺细胞 人 F12K 贴壁
TPC1【人甲状腺癌细胞】 TPC1 人甲状腺癌细胞 人 L15 贴壁
C28/I2【人正常软骨细胞】 C28/I2 人正常软骨细胞 人 1640 贴壁
hADSCs【人脂肪间充质干细胞】 hADSCs 人脂肪间充质干细胞 人 DMEM 贴壁
M059K【人胶质瘤细胞】 M059K 人胶质瘤细胞 人 EMEM 贴壁
C1498【小鼠急性淋巴瘤细胞】 C1498 小鼠急性淋巴瘤细胞 小鼠 DMEM 悬浮
SNU878【人肝癌细胞】 SNU878 人肝癌细胞 人 1640 贴壁
SNU886【人肝癌细胞】 SNU886 人肝癌细胞 人 1640 贴壁
NCI-H1417【人小细胞肺癌细胞】 NCI-H1417 人小细胞肺癌细胞 人 1640 贴壁
HNSC【人神经干细胞】 HNSC 人神经干细胞 人 DMEM 贴壁
2BS【人胚肺成纤维细胞】 2BS 人胚肺成纤维细胞 人 EMEM 贴壁
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文献和实验littleyan0418 我现在的任务是要构建人肺癌细胞的cDNA文库,但我不是这个方面科班出身,好多地方还不是很明白,想请教师兄师姐的经验,应该注意些什么。现在对总RNA的提取我有点找不出头绪。麻烦师兄师姐们可以给我分享些这方面的资料和网址吗?非常感谢!! neuronboy http://www.takara.com.cn/ 价格、试剂盒和说明书都有。呵呵 littleyan0418
问: A549细胞到底是如何形态?我见过三角形,近乎MDCK细胞形态的,还有的呈长梭形。我感觉自己的细胞好像混进了MDCK细胞。大家帮忙诊断一下,谢谢。 我培养的A549细胞 答1:
我也在养A549细胞,也来讲讲自己的经验,希望大家共同学习。我们主要是看细胞的密度,大概有80-90%铺满培养瓶底就可以传代了,时间长短不一,大概有5-7天吧,一瓶一般传3-4瓶,中间一般会有一次换液的。培养基用的是1640+10%的小牛血清+200u/ml庆大霉素。传代时先倒掉就培养基,然后用PBS洗一两次,然后再用0.25%胰酶消化(100ml培养瓶盖住表面大概要两滴管左右),可镜经下观察细胞间已出现细胞胞质回缩变圆,缝隙变大(我的细胞大概要2min左右),即可倒去消化液,加入培养基,吹打
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