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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
细胞系
- ATCC Number:
-
- 细胞类型:
-
- 肿瘤类型:
肺癌
- 生长状态:
贴壁培养
- 年限:
长期
- 运输方式:
冻存/复苏
- 器官来源:
肺
- 是否是肿瘤细胞:
-
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 免疫类型:
否
- 物种来源:
组织
- 相关疾病:
肺癌
- 组织来源:
肺
- 英文名:
A549
- 库存:
100
- 供应商:
镜像绮点
- 规格:
T25
A549人肺癌细胞/ATCC细胞株/免费配带STR鉴定报告
细胞介绍
该细胞系由D.J.Griad通过肺癌组织移植培养建系,患者为58岁白人男性。A549能通过胞苷二磷酸胆碱途径合成含有高含量不饱和脂肪酸的卵磷脂。
细胞特性
1) 来源:肺癌
2) 形态:上皮细胞样,多角形;贴壁生长
3) 含量:>1x10^6 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5)用途:仅供科研使用。
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备F-12K(推荐iCell-0007)培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二、细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
| 人胶质母细胞瘤细胞 | A172 | DMEM+10%FBS+1%P/S | 贴壁生长 |
| 人横纹肌肉瘤细胞 | A-204 | McCoy’s 5A+10%FBS+1%P/S | 贴壁生长 |
| 人黑色素瘤细胞 | A2058 | DMEM+10%FBS+1%P/S | 贴壁生长 |
| 人卵巢癌细胞 | A2780 | 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S | 贴壁生长 |
| 人卵巢癌细胞+GFP | A2780+GFP | 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S | 贴壁生长 |
| 人T淋巴细胞白血病细胞 | A3 | 1640+10%FBS+1%P/S | 悬浮生长 |
| 人恶性黑色素瘤细胞 | A375 | DMEM+10%FBS+1%丙TONG酸钠+1%L-谷氨酰胺+1%P/S | 贴壁生长 |
| 人恶性黑色素瘤细胞+EGFP | A375+EGFP | DMEM+10%FBS+1%丙TONG酸钠+1%L-谷氨酰胺+1%P/S | 贴壁生长 |
| 人表皮癌细胞 | A431(A-431) | DMEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙TONG酸钠+1%P/S | 贴壁生长 |
| 人肾癌细胞 | A498 | MEM+10%FBS+1%P/S | 贴壁生长 |
| 人肺癌细胞 | A549 | F12K+10%FBS+1%P/S | 贴壁生长 |


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- 内容
- 询问日期
文献和实验【1】Chen Q, Luo L, Xue Y, et al. Cisplatin-loaded polymeric complex micelles with a modulated drug/copolymer ratio for improved in vivo performance[J]. Acta biomaterialia, 2019, 92: 205-218.
【2】Liu Y L, Chen B Y, Nie J, et al. Polydatin prevents bleomycininduced pulmonary fibrosis by inhibiting the TGFβ/Smad/ERK signaling pathway[J]. Experimental and Therapeutic Medicine, 2020, 20(5): 1-1.
【3】Wang Z, Zhang J, Lu B, et al. Novel bio-renewable matrinium-based ionic liquids derived from Chinese herb medicine: Synthesis, physicochemical properties and biological activity[J]. Journal of Molecular Liquids, 2019, 296: 111822.
问: A549细胞到底是如何形态?我见过三角形,近乎MDCK细胞形态的,还有的呈长梭形。我感觉自己的细胞好像混进了MDCK细胞。大家帮忙诊断一下,谢谢。 我培养的A549细胞 答1:
我也在养A549细胞,也来讲讲自己的经验,希望大家共同学习。我们主要是看细胞的密度,大概有80-90%铺满培养瓶底就可以传代了,时间长短不一,大概有5-7天吧,一瓶一般传3-4瓶,中间一般会有一次换液的。培养基用的是1640+10%的小牛血清+200u/ml庆大霉素。传代时先倒掉就培养基,然后用PBS洗一两次,然后再用0.25%胰酶消化(100ml培养瓶盖住表面大概要两滴管左右),可镜经下观察细胞间已出现细胞胞质回缩变圆,缝隙变大(我的细胞大概要2min左右),即可倒去消化液,加入培养基,吹打细胞
真爱满行囊 我最近在体外细胞做的关于gsk3-beta功能问题,发现药物处理以后,gsk-3-beta的总表达量下调,如果是这样的话 1、我是否能够得出gsk-3-beta的活性下调的结论? 2、是否还有必要做非活性形式的表达量?我的理解是,基础状态下,gsk-3beta维持的是低活性状态,如果总量都下调了,那应该能够得出活性降低的结论了吧? 3、另外,在这种情况下我是否有必要去做gsk-3-beta的216位点的活性形式的表达
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