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抗补体I因子小鼠杂交瘤细胞;14D3操作步骤

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  • 上海谷研
  • GOY-ATCC-0744
  • 进口/国产
  • 2025年10月30日
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    • 供应商

      上海谷研

    • 肿瘤类型

      详见说明书

    • 细胞类型

      A类

    • ATCC Number

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    • 免疫类型

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    • 细胞形态

      淋巴母细胞样

    • 是否是肿瘤细胞

    • 器官来源

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    • 运输方式

      电询

    • 年限

      详见说明书

    • 生长状态

      半贴壁生长

    • 规格

    公司是最专业的ATCC细胞供应商,提供抗补体I因子小鼠杂交瘤细胞;14D3操作步骤的报价,咨询,称技术服务,欢迎来电咨询选购。
    细胞名称     抗补体I因子小鼠杂交瘤细胞;14D3操作步骤
    形态特性    淋巴母细胞样
    生长特性   半贴壁生长
    特征特性    可产生单克隆抗体,抗原为补体I因子。 
    培养条件     RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
    传代方法    保持细胞密度在1×105~1×106 cells/ml之间,每周换液2~3次 
    传代情况    不详
    冻存条件     基础培养基+8%DMSO+20%FBS
    支原体检测   阴性
    STR     -
    同工酶
    染色体
    使用权限 A类
    使用方法
    售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员,我们将尽快为您解决。
    抗补体I因子小鼠杂交瘤细胞;14D3操作步骤分裂图展示图:​
    产品细节图片1
    抗补体I因子小鼠杂交瘤细胞;14D3操作步骤收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
    1. 取出25cm2 培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中
    静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
    2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
    3. 细胞传代
    1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
    2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下
    观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化;
    3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全
    培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
    4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
    抗补体I因子小鼠杂交瘤细胞;14D3操作步骤操作步骤:
    1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
    2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
    MOLWTMARKER,DNA,HIGHRANGE*DRYICEDNA Marker生物技术级150 gFrozen
    (2-脱氧-D-葡萄糖)
    F6P6-嶙酸果糖二钠500U4种分开/套,100mM/种
    巴豆全;丁烯全(反式); β-基炳烯全 Crotoncldqhydq;trcns-2-Butqncl; Crotoni cldqhydq; β-Mqthylccrolqin; Propylqnq cldqhydq; 13-73-9
    ATP酶测试盒(测组织及细胞膜的可测Na+K+、Ca2+Mg2+-ATP酶,样本处理前不需高速离心)shēng huà shì jì容量:RT50支/包
    (3a,5b,12a)-N,N-双[3-(D-葡萄糖酰基)丙基]-3,12-二羟基胆甾烷-24-,英文名或英文缩写:Deoxy-Big CHAP,级别:标准溶液,规格:5克
    58-96-8尿苷;尿嘧啶核苷;二氢嘧啶核苷;尿核苷;1-β-D-呋喃核糖基尿嘧啶;NFDB2NFDB3-1-β-D-呋喃核苷Uridine;Uracil-3-riboside;1-β-D-Ribofuranosyluracil;Uracil-1-β-D-ribofuranoside;Uracil-3-D-ribofuranoside;Urd;
    2-羟基丙酸锌,英文名或英文缩写:Zinc lactate,级别:高纯,98%,规格:100毫克
    酸钴 Cobaltous naphthenate 61789-51-3 250G 通用试剂
    3-溴环己烯 3-Bromocyclohexene,90% 1521-51-3 10ML 通用试剂
    苯佐卡因/对基苯乙酯/4-基苯乙酯/Benzocaine BR,98% 25克 国产
    LM-137琼脂shēng huà shì jì容量:500克
    吡哆全言醋盐 PYRIDOXcL xy7noCHLORIDq 62--2
    总谷胱甘肽-氧化型谷胱甘肽测试盒/T-GSH/GSSG测试盒 微量酶标法 48T 国产
    三乙基硫双(三甲... Triethylsulfonium bis(trifluoromethyls... 321746-49-0 5G 通用试剂
    CD300A Others Mouse 小鼠 CD300A 人细胞裂解液 (阳性对照)
    615小鼠癌瘤株;Ca759
    M14 人黑色素瘤细胞
    MDA-MB-468人癌细胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-468 L-15+10%FBS
    FAM3B Protein Human 重组人 FAM3B 蛋白 (Fc 标签)
    人胚皮肤成纤维细胞;CCC-ESF-1 人肺微血管内皮细胞完全培养基 100mL
    Lewis 小鼠肺癌细胞
    SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌细胞系
    人小脑星形胶质细胞( Hac) (1×106 )
    人导管瘤细胞;UACC812 大鼠肾系膜细胞完全培养基 100mL
    小鼠肾足细胞;Mouse podocyte
    FLT4 Others Mouse 小鼠 FLT-4 / VEGFR3 人细胞裂解液 (阳性对照)
    抗补体I因子小鼠杂交瘤细胞;14D3操作步骤615小鼠癌瘤株;Ca759
    CD300A Others Mouse 小鼠 CD300A 人细胞裂解液 (阳性对照)
    M14 人黑色素瘤细胞
    MDA-MB-468人癌细胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-468 L-15+10%FBS
    FAM3B Protein Human 重组人 FAM3B 蛋白 (Fc 标签)
    人胚皮肤成纤维细胞;CCC-ESF-1 人肺微血管内皮细胞完全培养基 100mL

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    • 单克隆抗体的制备过程

      (1)体内诱生法 取Balb/c小鼠,首先腹腔注射0.5 ml液体石腊或降植烷进行预处理。1-2周后,腹腔内接种杂交瘤细胞杂交瘤细胞小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周,可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体。 (2)体外培养法 将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。近年来,各种新型培养技术和装置不断出现,大大提高了抗体的生产

    • 杂交瘤细胞株稳定性的检查

      在液氮中保存的细胞株及体外传代培养的细胞株,都需要定期检查染色体数和抗体产生能力,因有些杂交瘤细胞会逐渐丢失染色体,使产生抗体的能力丧失或减弱。此时需及时进行克隆化,保留稳定分泌抗体的细胞株。 一、杂交瘤细胞染色体检查 材料和试剂 1. 秋水仙素。 2. 甲醇,冰醋酸。 3. Giemsa染液,玻片。 操作步骤 1. 取传代培养24h的细胞,加0.1ml秋水仙素,放37℃水浴4h。 2. 收集细胞2000r/min×10min离心弃上清,沉淀

    • 嵌合基因的构建(RT-PCR方法扩增VL、VH基因)

      的另外一些附加元件包括增强子,以及带有剪接供体和剪接受体功能位点的内含子。 【操作步骤】 (1)设计数对简并PCR引物:VH和VL5’端引物与V区的前导序列互补,VH3’端引物与IgG(IgM)CH1 5’端及所有V区J段3’端互补,VL3’端引物与k(l)链CL5’端和V区的所有J段3’端互补,引物的简并性基本上不会造成PCR产物与原来基因序列上氨基酸的变异。下述引物可扩增出大多数单抗的基因。 1)小鼠VH5’端引物(引入SalⅠ酶切位点) VH5’1-GGGGTCGAC

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