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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
PIG1
- 库存:
现货库存
- 供应商:
ATCC
- 肿瘤类型:
见细胞说明
- 细胞类型:
科研细胞
- 品系:
PIG1 原代正常人皮肤黑色素细胞
- 组织来源:
原代正常人皮肤黑色素细胞
- 相关疾病:
请联系我们发送详细说明书
- 物种来源:
人
- 免疫类型:
见细胞资料
- 细胞形态:
请联系我们发送详细资料
- 是否是肿瘤细胞:
见细胞类型说明
- 器官来源:
原代正常人皮肤黑色素细胞
- 运输方式:
常温或干冰冻存发货,空运快递
- 年限:
代数:三代内
- 生长状态:
贴壁
- 规格:
2X10^6 cells
| 细胞名称: | PIG1 原代正常人皮肤黑色素细胞 |
| 组织来源: | 皮肤,黑色素细胞,原代正常人皮肤黑色素细胞 |
| 培养基: | 89%1640+10%FBS+1%双抗 |
华拓生物科技有限公司(www.otwobiotech.com)技术咨询方式: 微信:13265824656 或 QQ:1245980541
PIG1 细胞产品介绍:
发货方式:
复苏后发货:我们复苏细胞后发货,货期一周左右,免运费。(气温较好建议复苏后发货)
冻存发货(干冰运输):需额外增加干冰运费,选择干冰运输的我们发两管细胞,为了保证客户接种可靠性多发一管。(气温低于0℃须冻存发货)
细胞发货采取专业的运输包装,并选择最快捷的运输方式(顺丰速运或其他空运快递)
本公司细胞引种来源:ATCC、DSMZ、ECACC、武大细胞库、上海生化细胞所、中国科学院典型培养物保藏委员会等
细胞处理方法:
一、贴壁细胞
1、 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞 100X,200X 各一张)。
2、用 75%的酒精消毒外包装,在超净工作台内打开外包装。
3、严格遵循无菌操作规范,打开细胞培养瓶。
4、37度平衡1-2小时。
5、用移液管吸取培养基,到50ml离心管中,剩下细胞密度达到80%至90%可以传代,如没有达到添加6ml新鲜培养基继续培养。
6、如果肉眼检查上清有细胞,对50ml上清进行离心收集细胞,如果细胞连片状态,弃掉上清对收集的细胞进行胰酶消化(1ml胰酶37度),接种培养。
二、悬浮细胞
1、接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞 100X,200X 各一张)。
2、用 75%的酒精消毒外包装,在超净工作台内打开外包装。
3、严格遵循无菌操作规范,打开细胞培养瓶。
4、细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒)。
5、1000rpm,5min 离心,用吸管小心吸出上清,加入培养基,重悬细胞。
6、将重悬好的细胞转入六孔板或者细胞培养瓶种,加入新鲜培养基,置于 37℃,5%CO2 培养(大部分细胞)。
PIG1 细胞培养操作:华拓细胞培养操作指南
细胞常见问题分析:细胞培养常见问题分析
细胞在发货前进行质检:
1、细胞存种的活性检测
2、细菌、真菌、霉菌污染物镜检
3、衣原体、支原体检测(荧光法、培养法等)
产品质量保证及售后:
1、 细胞为三代以内,活体。运输过程中细胞出现污染和状态不好,我们完全免费重新发货。
2、 实验过程中若确定是客户问题,客户仅需支付物流和耗材费用,我们可重新发货。其他根据情况灵活处理。
3、 产品使用过程中,华拓生物可提供技术上的指导。
PIG1 细胞培养常见注意事项:
1、收货时,如不能在收到细胞后及时操作处理细胞,T25及离心管发货的细胞可以消毒后在培养箱过夜,干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升华,需即刻复苏细胞;T25瓶及离心管发货的细胞收货后在37度培养箱平衡两小时以上,再开始处理细胞,平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境。
2、贴壁细胞在消化时,因为每个客户用的胰酶活力及消化步骤、试剂都是不一样,不能完全规定消化时间,以科研人员经验为准。 对于消化这步,如果对该细胞经验不多,无法准确掌控胰酶作用时间,建议可以按照下述操作:胰酶首先复温到室温后加入细胞,然后每隔30秒,即吹打下细胞,如果能够吹打散细胞,加入完全培养基终止消化,把细胞打散后,离心去除胰酶加新的培养基重悬细胞接种 ,如果30秒吹打不下,再等30秒重复操作。注意消化时间,不要过度,细胞变圆可以吹下来即可终止。
3、传代比例建议1:2-1:3,长得比较快的细胞可以1:3,比较慢的按1:2传代;传代后,建议不要使用传代前培养所使用的培养基,会有大量细胞碎片甚至导致细胞死亡的风险;细胞状态不好或者生长比较慢时,可以通过增加血清浓度调整细胞状态及生长速度;细胞碎片较多、背景较脏时,贴壁细胞用PBS漂洗两次、悬浮细胞打散后低速离心(900rpm,3min)能有效改善;建议不要随意更换培养基,因实验需要,可以逐步驯化,也可以联系咨询我们。
4、PIG1 细胞冻存时,部分长得比较慢的细胞,冻存的细胞密度要稍微大点,以防止复苏后生长困难;冻存液中含的DMSO请使用细胞级DMSO,同时浓度不要太高,部分细胞在10%DMSO条件下冻存会死亡,所以DMSO浓度5%-8%是比较推荐的浓度;冻存时建议设置冻存检测,即取0.2-0.3mL的冻存液重悬的细胞于一个冻存管中,与正常体积冻存的细胞共同冻存,至液氮后复苏检查冻存结果,冻检合格前,留一部分细胞继续培养,以防万一;细胞冻存及复苏遵循慢冻快融的原则,即冻存时温度不能急剧下降,应控制温度缓慢下降,复苏时应快速融化,融化后尽快加入培养基中。
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文献和实验PriCells: 正常人表皮黑色素细胞的培养实验材料:1. 临床活检获取的正常人皮肤材料或新生儿阴茎包皮;2. 不含Ca 2+ 和Mg 2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3. 黑素细胞培养液和培养基中各种添加剂的配制:包括以下种类:①胰岛素。贮存液为5mg/ml,即将0.5g的胰岛素溶于1ml 0.01mol/L的HCl液中,双蒸水加至100ml,过滤除菌、分装,-70℃下保存6个月后方可使用。使用时,在500ml培养
又是代谢的锅,不治之症银屑病终于有盼头了!上交王宏林教授团队Immunity重磅报道
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(4)黑色素(melanin):为大不、形状不一的棕褐色或深褐色颗粒色素。正常人皮肤、毛发、虹膜及脉胳膜等处均有黑色素存在。皮肤黑色素由黑色素细胞(melanocyte)产生:黑色素细胞中的酪氨酸在酪氨酶的作用下,氧化为二羟苯丙氨酸(dihydroxyphenylalanine,DOPA,多巴)。多巴被进一步氧化为吲哚醌,失去CO 2 后转变为二羟吲哚,后者聚后成一种不溶性的聚合物,即黑色素,再与蛋白质结合为黑色素蛋白。黑色素细胞内因含有酪氨酸酶,故当加上多巴时,则出现
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