北京细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒哪里卖

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北京细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒哪里卖的品牌：百奥莱博，是优质的蛋白质研究产品，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。

名称：北京细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒哪里卖
编号：XH063
规格：50T/200T
品牌：百奥莱博
在研究细胞时经常要研究细胞的不同组份，而研究得最多的两个细胞组份就是细胞核和细胞浆。分离细胞核蛋白和细胞浆蛋白，不仅可以用于研究蛋白在细胞内的定位，而且很多时候分离出来的核蛋白可以用于转录调控方面的研究，例如EMSA(也称gelshift)，footprinting等。
细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒(Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit)提供了一种比较简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提细胞核蛋白与细胞浆蛋白的方法。约90分钟就可以完成培养细胞的细胞核蛋白与细胞浆蛋白的分离。抽提得到的蛋白可以用于Western，EMSA，footprinting，报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。
本试剂盒是通过细胞浆蛋白抽提试剂A和B，在低渗透压条件下，使细胞充分膨胀，然后破坏细胞膜，释放出细胞浆蛋白，然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过高盐的细胞核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。
本试剂盒可以抽提50个样品，如果每个样品的数量为约二百万细胞或约60毫克组织。
包装清单：

储存条件：-20℃，有效期一年。
注意事项：
PMSF一定要在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。
抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
本试剂盒对于组织样品，仅适合于新鲜组织，对冻存过的组织抽提效果很差。可以抽提的组织样品数通常不足100个。
使用本试剂盒抽提到的细胞核蛋白与细胞浆蛋白均可直接用我们生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。但不适合用Bradford法测定蛋白浓度。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1. 准备溶液：温融解试剂盒中的三种试剂，溶解后立即放置在冰上，混匀。取适当量的细胞浆蛋白抽提试剂A备用，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。取适当量的细胞核蛋白抽提试剂备用，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2. 对于贴壁细胞：用PBS洗一遍，用细胞刮子刮下细胞，或用EDTA溶液处理细胞使细胞不再贴壁很紧，并用移液器吹打下细胞。离心收集细胞，尽最大努力吸尽上清，留下细胞沉淀备用。尽量避免用胰酶消化细胞，以免胰酶降解需抽提的目的蛋白。
3. 对于悬浮细胞：用PBS洗一遍，离心收集细胞，尽最大努力吸尽上清，留下细胞沉淀备用。
4. 每20微升细胞沉淀加入200微升添加了PMSF的细胞浆蛋白抽提试剂A。(对于二百万Hela细胞，其细胞沉淀的体积大约为20微升或40毫克。)
5. 最高速剧烈Vortex 5秒，把细胞沉淀完全悬浮并分散开。(如果细胞沉淀没有完全悬浮并分散开，可以适当延长vortex时间。)
6. 冰浴10-15分钟。
7. 加入细胞浆蛋白抽提试剂B 10微升。最高速剧烈Vortex 5秒，冰浴1分钟。
8. 最高速剧烈Vortex 5秒，4℃ 12,000-16,000g离心5分钟。
9. 立即吸取上清至一预冷的塑料管中，即为抽提得到的细胞浆蛋白。可以立即使用，也可以冻存。(千万不要触及沉淀，可以在沉淀上方保留极小体积的上清，以免触及沉淀。)
10. 对于沉淀，完全吸尽残余的上清，加入50微升添加了PMSF的细胞核蛋白抽提试剂。(不吸尽上清会带来细胞浆蛋白的污染。)
11. 最高速剧烈Vortex 15-30秒，把细胞沉淀完全悬浮并分散开。然后放回冰浴中，每隔1-2分钟再高速剧烈Vortex 15-30秒，共30分钟。
12. 4℃ 12,000-16,000g离心10分钟。
13. 立即吸取上清至一预冷的塑料管中，即为抽提得到的细胞核蛋白。可以立即使用，也可以-70℃冻存。
14. 对于新鲜组织：
A. 把组织尽可能切成非常细小的碎片。按照20:1的比例混合适当量的细胞浆蛋白抽提试剂A和B(例如200微升细胞浆蛋白抽提试剂A中加入10微升抽提试剂B)。并加入PMSF至最终浓度为1mM配制成组织匀浆液。按照每60mg组织加入200微升组织匀浆液的比例混合组织和组织匀浆液，并在玻璃匀浆器内充分匀浆。匀浆需在冰浴或4℃进行。
B. 匀浆后把匀浆液转移到塑料离心管内，冰浴放置15分钟。
C. 4℃ 1,500g离心5分钟。把上清转移至一预冷的塑料管中，为抽提得到的部分细胞浆蛋白。(吸上清时千万不要触及沉淀。)
D. 对于沉淀，到了这一步已经充分匀浆，但很多细胞还没有破碎。接下去按照使用说明的步骤4开始操作，即把沉淀当做已经离心收集好的细胞沉淀操作，按照步骤4至步骤13抽提得到细胞浆蛋白和细胞核蛋白。抽提得到的细胞浆蛋白可以和步骤14C中抽提得到的细胞浆蛋白合并。

更多有关北京细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒哪里卖的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·土壤基因组DNA提取试剂盒
编号：XH018
规格：50T/200T
储存条件：15～25℃，有效期一年。
产品简介：
本试剂盒采用独特的缓冲液，尽可能的去除腐殖酸。提取的基因组DNA片段大，纯度高，质量稳定可靠。
使用本试剂盒提取的基因组DNA可用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
操作步骤：
1，称取土壤样本0.1-0.3g于离心管（强烈建议2ml圆底离心管），加入450ul溶液Ⅰ剧烈震荡混匀1-2min至看不到较大固体块。
2，加入50ul溶液Ⅱ颠倒混匀，65℃水浴5min，每2min混匀一次。
3，加入100ul溶液Ⅲ颠倒混匀，室温12000rpm离心10min。
4，取上清，在上清中加入5ul核酸助沉剂，再加入三倍体积无水乙醇，充分混匀。
4、12000rpm离心5min，弃上清，沉淀加入1ml 70%乙醇，轻轻混匀，再次12000rpm离心5min，弃上清，将离心管在离心机中再次离心30S左右，吸去底部少量液体。
5、 室温放置2min左右，等沉淀边缘微微发白，加入50－100ulTE缓冲液溶解，如很难溶解，可55℃水浴5分钟。
6、电泳或者其他方法检测，进入下游实验。
因为土质千差万别，得到的DNA含量也是相差很大，如果电泳无法检测，可用PCR检测。

·去内毒素质粒DNA提取试剂盒
编号：XH012
规格：50T/200T
原理简介
本试剂盒在常规质粒提取试剂盒的基础上改进而来，增加内毒素清步骤，提取的质粒可用于一些要求更高的实验，如转染。
本试剂盒（以200T为例）可以用200小次或者10大次提取。
注意事项
1．溶液Ⅱ低温时可能出现析出和沉淀，可以37度水浴几分钟即可恢复澄清透明。用完请及时盖紧盖子。
2．溶液Ⅰ中加入RNase 后请放2-8度保存，如果长久不用（如一个月），可-20度冻存，或者按照比较分次加入。
3．可根据实验情况中量或者大量提取，加入的试剂等比放大。
4．内毒素清除剂在常温下出现面混浊现象，为正常，在2-8℃放置一段时间混浊会消失。
5．本试剂盒在去除内毒素的过程中会损失少量质粒，因而相对于常规提取，本试剂盒得率偏低。
操作步骤(以小量提取为例,中提或者大提可等比例加入)
在溶液Ⅰ中加入RNaseA，混匀，2－8度保存。
1．取过夜菌1-5毫升，5000g离心1分钟收集细菌沉淀，弃上清（可重复多次收集于一管中，收集量可考虑菌液浓度与质粒拷贝数），如为阳性细菌，可加入100mg/ml的溶菌酶悬浮菌液，37度处理30分钟，离心，收集沉淀。
2．在收集的菌液中，加入200ul溶液I，重悬细菌沉淀。确保沉淀完全散开，无可见细菌团块(可vortex 5-10秒或更长时间)。室温放置2-3分钟。
3．每管加入200ul溶液Ⅱ（如有沉淀，可37度水浴），轻轻颠倒离心管4-6次，使细菌完全裂解，溶液透明。放置2-3分钟，不过超过5分钟。但也不要混匀后立刻加入溶液Ⅲ。
4．放置2-3分钟后，每管加入200ul溶液III，随即颠倒离心管4-6次混匀，可见白色絮状物产生。
5．最高速(13,000rpm左右)室温离心5分钟。
6．将上清转移到新的离心管中，如有沉淀，可再次离心。
7．加入上清1/5体积冰预冷的内毒素清除剂，振荡混匀，溶液变浑浊，冰浴2min至溶液变清亮。
8．37℃水浴2min，不时振荡，溶液又变浑浊。12000rpm室温离心2min，溶液应分为两相，上层水相含质粒DNA，下层油状相含内毒素。
9．将含质粒DNA的上层水相转移至新管，弃下层油状相，注意不要吸入油状相。重复抽提三次，即重复步骤7-9三次。
10．在得到的上清中加入等体积的结合液，再加入等体积的无水乙醇，混匀（上清：结合液：无水乙醇＝1：1：1）
11．玻璃奶摇匀。取20ul混匀的玻璃奶加入上面的混合液中，混匀。室温放置5分钟，期间颠倒2次。
12．10000转/分钟离心1分钟，倒掉上清；沉淀加入1ml 70%乙醇，振荡混匀，10000转/分钟离心1分钟，去上清，70%乙醇重复洗一次，再用无水乙醇洗一次。去上清，再次离心2分钟，用小吸头吸去上清。
13．室温放置10分钟（如果为大提，请延长放置时间到30分钟，此步为去除残余酒精，以免影响下游实验），加入30－50ulTE缓冲液混匀溶解，55℃水浴5分钟。离心，取上清转移到一新的离心管中。此为所提质粒。
14．电泳或者其他方法检测，进入下游实验。


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·TOP10受体菌
编号：XH045
规格：1ml
基因型：F-，supE44，hsdS20(rB－mB－)，recA13，ara-14，proA2，lacY1，galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-1
细胞种类
高效常用宿主菌E.coli HB101
E.coli HB101在基因重组实验起始时便十分常用。遗传性能稳定，使用十分方便，适合于各种基因重组实验。
保存：所有受体菌均为甘油保存，-70℃可长期保存，-20℃可保存一年。

·FITC－羊抗鸡IgG
编号：XH089
规格：0.5ml/5ml
荧光素标记抗体，是目前广泛用于免疫病理、细胞化学、流氏细胞学、病毒学及自身抗体的临床免疫诊断之中的特异、灵敏、定性和定位相结合的免疫化学试剂。
我们生产的荧光素标记羊抗鸡IgG是将异硫*酸荧光素（FITC，来源于SIGMA），经过常规方法标记在抗体羊抗鸡IgG（来源于我公司自己纯化的抗体）分子上，经过过柱，透析，定量，加入稳定剂等，制成FITC－羊抗鸡IgG。
储存条件：-20℃冻存。
浓度：抗体2mg/ml。
应用范围：FITC－羊抗鸡IgG主要用于一抗来源于人多抗（单抗也行）的后续实验。如免疫组化。

主要性能：
FITC为Sigma异构体I，最大吸收峰为495nm，最大发射峰为525nm。
工作液用0.01mol/L pH7.4PBS作1：5～1:20稀释使用，稀释过的抗体尽快用完，不要冻融。


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BL0903 FITC标记羊抗牛IgG抗体
ARB11575 人基质金属蛋白酶9(MMP-9)检测服务 Human matrix metalloproteinase,mmp-9 ELISA KIT
F050305 猪IgG抗体 Pig IgG
S-腺苷高半胱*酸水解酶 SP Sepharose Fast Flow 9025-54-1
BL1059 大豆蛋白胨
ARB11551 人凋亡蛋白酶激活因子1(ApAf-1)elisa检测说明书 Human apoptosis protease activating factor-1,apaf-1 ELISA KIT
海藻糖无水物 Trilaurin 99-20-7
BL1239 SOC固体培养基(干粉)
F040104 鸡卵清蛋白偶联三聚"青"胺 OVA-MEL
ARB12700 大鼠糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA检测服务 Rat glucocorticoid receptor-α,gr-α ELISA KIT
ARB12751 小鼠c-fos 定量分析 Mouse c-fos ELISA KIT
*基琼脂糖凝胶CL-4B Water-DEPC treated
F030204 HRP标记小鼠抗猴IgG抗体 Monoclonal Mouse Anti-Monkey IgG*HRP
F030404 胶体金标记小鼠抗猴IgG抗体 Monoclonal Mouse Anti-Monkey IgG*GOLD
BL1302 PBR322
91079-40-2 Casein acids Hydrolysate  酸水解酪素
BTN130515 *基磁珠 Magnetic beads,Amino
DAB法显色试剂盒"
PY04-094  两性霉素B  0.2mg/支×10支  每支添加于100ml 改良CCDA琼脂培养基基础中，用于弯曲杆菌的选择性分离培养
001014 大牛血清
ARB13937 猪细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)含量测试 Porcine intercellular adhesion molecule 2,icam-2 ELISA KIT

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