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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
室温(15~30℃)
- 保质期:
长期
- 英文名:
Soil Genomic DNA Extraction Kit
- 库存:
719
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
土壤基因组提取试剂盒批发的品牌:百奥莱博,是优质的DNA纯化产品,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多土壤基因组提取试剂盒等DNA纯化产品请联系我司咨询订购。
名称:土壤基因组提取试剂盒批发
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:WE0187
规格:50次
英文名:Soil Genomic DNA Extraction Kit
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的干燥土壤、湿泥、淤泥及海河沉淀物中提取总DNA。本产品使用安全方便,单个样品操作一般可在40分钟内完成。使用本品每克土壤可获得5μg以上的DNA,片段长度主要在20-30 kb之间。本试剂盒采用独特的溶液能够有效去除杂质和腐殖酸,通过优化的缓冲系统使裂解液中的DNA高效结合到吸附柱上,土壤中残留的杂质、PCR和酶反应的抑制剂可通过两步洗涤步骤有效去除,最后使用低盐缓冲液或水洗脱,即可获得高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer SW | 60ml |
| Buffer SL | 30ml |
| Buffer GLS | 30ml |
| Buffer PR(浓缩液) | 13ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 |
自备试剂:无水乙醇,70%乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer PR、GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
3、使用前请检查Buffer SL和Buffer GLS是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer SL和Buffer GLS于56℃水浴重新溶解。
操作步骤:
1、取0.1 g-0.3 g土壤样本,置于离心管(自备)中,加入1ml Buffer SW,涡旋振荡1-3分钟(须将管底的土壤震起来)。12000rpm(~13400×g)离心1分钟,倒掉上清。
2、加入750μl的70%乙醇,涡旋振荡1分钟(须将管底的土壤震起来),12000rpm离心1分钟,倒掉上清,用移液器将余液吸尽。
3、向沉淀中加入500μl Buffer SL,涡旋振荡1-3分钟(须将管底的土壤震起来),65℃水浴20分钟(可每隔5分钟涡旋振荡5秒),12000rpm离心3分钟,将上清移至新的离心管(自备)中。
4、向上清液中加等体积Buffer GLS,颠倒混匀15-25次,冰上放置5分钟。12000rpm离心5分钟。
注意:冰上放置后液体可能会凝结,属正常现象。
5、将步骤4中所得上清加入到已装入收集管的吸附柱DM中,12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:若一次不能加完溶液,可分多次转入。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer PR(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤8。
9、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
10、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附柱的中间部位悬空加入50-100μlBuffer GE或灭菌水,室温放置 2-5分钟, 12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-100μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,重复步骤10;若洗脱体积小于100μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg,推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
6)基因组DNA模板中微量的残余腐殖酸可能对PCR反应产生不良影响。此时将DNA稀释5-100倍问题通常即可解决。如经稀释后的DNA仍不能有效应用于PCR反应, 请使用腐殖酸清除剂,以获得更高效的清除效果。
储存条件:室温(15~30℃)。
关于土壤基因组提取试剂盒批发的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)(低含量ROX校正染料)
编号:WE0152
英文名称:Fast TaqMan Mixture(Low ROX)
规格:5ml
本品是专用于探针法(TaqMan,Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系,浓度为2×,包含Fast Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、Mg2+等,操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列检测。本品含有的Fast Taq DNA Polymerase,能有效减少在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活仅需在95℃孵育30s。整个PCR反应过程比普通反应可节省约40分钟,大大缩短了PCR的反应时间。独特的PCR缓冲体系与快速热启动酶的组合,有效抑制了非特异产物的产生,并显著提高了PCR的扩增效率,荧光信号更强,灵敏度更高,线性范围更宽。该产品适用范围广,可用于普通和快速定量PCR程序。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0151):
Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-rad iCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0152):
ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System,QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system,Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0153):
ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
试剂盒组成:
| 组份 | WE0151-5ml | WE0152-5ml | WE0153-5ml |
| 2×Fast TaqMan Mixture | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
| 50×Low ROX | - | 200μl | - |
| 50×High ROX | - | - | 200μl |
| ddH2O | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
注意事项:
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2、避免反复冻融本品,反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃,避光。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×Fast TaqMan Mixture(With ROX) | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Reverse Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Probe,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Template DNA | 2μl | |
| 50×Low ROX or High ROX(可选) | 1μl | 1× |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果,可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)所用探针的终浓度,与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关,实际使用时请参照仪器说明书,或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同,根据使用荧光定量的仪器选择加入50× Low ROX or 50×High ROX。
2、PCR反应程序:
建议采用两步法PCR反应程序,本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定。
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 30 s | |
| 变性 | 95℃ | 5 s | 35-40 个循环 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 30 s |
注意:
1)本产品所采用的酶须在预变性95℃、30s条件下实现酶的活化。在此条件下,大多数模板可良好的进行解链。对GC含量高、二级结构复杂的模板,可将预变性时间延长至1-4分钟,以使起始模板充分解链。
2)建议采用两步法PCR反应程序,若因使用Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
储存条件:-20℃,避免反复冻融
土壤基因组提取试剂盒批发关键词:土壤基因组提取试剂盒,WE0187,Soil Genomic DNA Extraction Kit
1397-89-3 可溶性两性霉素B Amphotericin B solubilized
9007-43-6 细胞色素C(马心) Cytochromes C
ARB10783 人抗天然脱氧核糖核酸抗体(n-DNA-Ab)ELISA代测服务 Human natural deoxyribonucleic acid antibody,n-dna-ab ELISA KIT
ARB12340 大鼠补体5A(C5A)检测服务 Rat complement fragment 5a,c5a ELISA KIT
HC0067 PCR八连排管(鼓)
ARB13456 鸡主要组织相容性复合体(MHC/B)酶标法分析 Chicken major Histocomp*(代"a")tibility complex,mhc/b ELISA KIT
538-75-0 N,N"-二环己基碳二亚胺(DCC)NN"Dicyclohexylcarbodie
ARB11626 人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)酶联免疫定量检测 Human granulocyte-macrophage colony stimulating factor,gm-csf ELISA KIT
ARB11911 人癌蛋白诱导转录物3(OIT3)ELISA代测服务 Human oncoprotein induced transcript 3,oit3 ELISA KIT
ARB10059 人B细胞分化因子(BCDF)检测服务 Human b cell differetiation factor,bcdf ELISA KIT
凝血酶 SMZ 9002-04-4
BTN130829 细胞蛋白质-RNA双提取试剂盒 Protein & RNA Extraction Kit
辛酸* (-)-Lobeline hydrochloride 1984-06-1
ARB12242 大鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)免费代测 Rat vascuolar cell adhesion molecule 1,vcam-1 ELISA KIT
*化血红素 BOP Reagent 16009-13-5
ARB13644 兔子基质金属蛋白酶9(MMP-9)Elisa方法检测 Rabbit matrix metalloproteinase 9,mmp-9 ELISA KIT
ARB11153 人肿瘤特异性移植抗原(TSTA)elisa检测 Human tumor specific transPlantation antigen,tsta ELISA KIT
PY02-359-1 沙氏琼脂培养基(SDA) 250克
L-甘露糖 2",4"-Dihydroxyacetophenone 10030-80-5
土壤基因组提取试剂盒批发关键词:土壤基因组提取试剂盒,WE0187,Soil Genomic DNA Extraction Kit
·抗RFP标签单克隆抗体
编号:WE0339
英文名称:Anti RFP-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格:100μl
该抗体为高纯度的鼠单克隆抗体,与RFP结构域具有高亲和性,可灵敏特异地检测各种RFP编码载体表达的RFP-Tag融合蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG
免疫原:原核表达红色荧光蛋白
应用范围:
WB(1:200-2000)
IP(5μg/mglysate)
Histo/Cytochemistry(1:50-500)
·组织样本RNA样品保存管
编号:WE0401
英文名称:Anti RFP-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格:10支
该抗体为高纯度的鼠单克隆抗体,与RFP结构域具有高亲和性,可灵敏特异地检测各种RFP编码载体表达的RFP-Tag融合蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG
免疫原:原核表达红色荧光蛋白
应用范围:
WB(1:200-2000)
IP(5μg/mglysate)
Histo/Cytochemistry(1:50-500)
·超纯RNA提取试剂盒(DNase I)
编号:WE0193
英文名称:SuperPure RNA Extraction Kit(DNase I)
规格:50次
本试剂盒是基于TRIzon改进后的柱式总RNA提取试剂盒,本制品可以从动物组织、植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中提取总RNA。首先裂解液充分裂解并匀质化样本,在特有的高盐状态下,RNA特异性地与硅基质结合,在极大程度减少了蛋白污染的同时有效去除了有机溶剂的污染,得到的RNA纯度更好,质量更高。本产品可从各细胞或组织中快速提取总RNA,每次可处理 30-50 mg组织或 5×106 细胞,可同时处理多个不同样品。如果是对微量DN非常敏感的RNA实验,残留的DNA可利用无RNase的DNase在柱上进行消化去除,提取后的RNA可直接应用于RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| DNase I | 1000 U |
| 10×Reaction Buffer | 1000μl |
| TRIzon Reagent | 60ml |
| Buffer RW1 | 40ml |
| Buffer RW2(浓缩液) | 11ml |
| RNase-Free Water | 10ml |
| 吸附柱RM及收集管 | 50套 |
| RNase-Free离心管(1.5ml) | 50个 |
保存条件:DNase I及10×Reaction Buffer -20℃保存,TRIzon Reagent 2~8℃避光保存,其它组分室温(15~30℃)。
自备试剂:*仿(新开封或提取RNA专用)、70%乙醇(无RNase水配制)、无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
1)使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
2)配制溶液应使用无RNase的水。
3)操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
2、样品应避免反复冻融,否则影响RNA提取得率和质量。
3、使用前若发现TRIzon Reagent有沉淀,可置于56℃水浴几分钟,即可溶解。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer RW2中加入无水乙醇。
5、所有离心步骤若无特殊说明均在室温下进行,且所有操作步骤动作要迅速。
操作步骤:
1、样品处理
① 组织:30-50 mg组织在液氮中充分研磨后加入1ml TRIzon Reagent,或在组织样品中加入1ml TRIzon Reagent后匀浆处理。
注意:样品体积不超过TRIzon Reagent体积的10%。
② 单层培养细胞:吸去培养液,加入适量 ,每10cm2加入1ml TRIzon Reagent。
③ 细胞悬液:离心收集细胞。每5×106细胞加入1ml TRIzon Reagent。
2、样品中加入TRIzon Reagent后反复吹打几次,使样本充分裂解。室温放置5分钟,使蛋白核酸复合物完全分离。
3、以每1ml TRIzon Reagent加入200μl*仿的比例加入*仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置2分钟。
4、4℃ 12000rpm(~~13400×g)离心10分钟,此时样品分为三层:红色有机相,中间层和上层无色水相,RNA主要在上层水相中,将上层水相移到一个新的RNase-Free离心管(自备)中。
5、在得到的水相溶液中加入等体积的70%乙醇(无RNase水配制),颠倒混匀。
6、将上步所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中。若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1,12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、配制DNase I 混合液:取52μl RNase-Free Water,向其中加入8μl 10×Reaction Buffer和20μl DNase I(1 U/μl),混匀, 配制成终体积为80μl的反应液。
9、向吸附柱中直接加入80μl DNase I 混合液,20-30℃孵育15分钟。
10、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1,12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
11、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心20秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
12、重复步骤11。
13、12000rpm离心2 分钟,倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟,彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
14、将吸附柱置于一个新的无RNase离心管中,向吸附柱的中间部位加入30-50μl RNase-Free Water,室温放置1分钟,12000rpm离心1分钟,收集RNA溶液,-70℃保存RNA,防止降解。
注意:
1)RNase-Free Wate体积不应小于30μl,体积过小影响回收率。
2)如果要提高RNA的产量,可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤14。
3)如果要提高RNA浓度,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,重复步骤14。
储存条件:室温(15~30℃)。
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