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- 百奥莱博
- 北京
- WE0251-OPW
- 2026年05月21日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80℃
- 保质期：
长期
- 英文名：
TOP10 Competent Cell
- 库存：
990
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")TOP10感受态细胞 克隆与表达，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。
名称：TOP10感受态细胞 克隆与表达
规格：100μl×10支
英文名：TOP10 Competent Cell
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
本产品是大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的热击转化。TOP10是一种常用于质粒克隆的菌株，其φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的β-半乳糖苷酶*基端实现α互补，可用于蓝白斑筛选。使用pUC19质粒检测，转化效率可达108，适用于高效的质粒DNA克隆并能保证高拷贝质粒的稳定复制。
产品组成：
| 组份 | 0.1ml×10支 |
| TOP10 Competent Cell | 10×100μl |
| Control DNA pUC19，0.1ng/μl | 10μl |
实验前准备及重要注意事项
1、感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
2、转化所有步骤均在无菌条件下操作。
3、包装中有0.1ng/μl的pUC19DNA，供对照试验使用。
使用方法：
1、取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2、待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3、42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4、向每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150 rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5、根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。
注意：
1)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2)新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3)涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
储存条件：-80℃。
想要了解更多关于TOP10感受态细胞 克隆与表达的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：
·X-gal溶液(20mg/ml)
编号：WE0220
英文名称：X-gal Solution(20mg/ml)
规格：5ml
·组织蛋白抽提试剂盒
编号：WE0260
英文名称：Tissue Protein Extraction Kit
规格：25次|100次
本试剂盒应用于组织样本的总蛋白提取。提取蛋白之前可根据具体实验需要加入蛋白酶抑制剂、盐、还原剂、螯合剂等成分。使用该提取液提取的组织蛋白，可进行蛋白活性分析、免疫检测、蛋白纯化等下游操作，并可采用BCA、Bradford、Lowry法进行蛋白定量。试剂盒中带有蛋白酶抑制剂混合物，可有效避免蛋白提取过程中蛋白的降解。
试剂盒组成：
| 组份 | 25次 | 100次 |
| Tissue Protein Extraction Reagent | 25ml | 100ml |
| Protease Inhibitor Cocktail | 250μl | 1ml |
保存条件：Protease Inhibitor Cocktail：-20℃，其它组分：室温
注意事项：
1、本产品适用于提取心肌、骨骼肌、肾脏、前列腺、皮肤、结肠、肝脏等软组织。
2、为防止蛋白降解，所有的操作尽量在冰上进行。
3、使用本产品提取蛋白后，可采用BCA、Bradford、Lowry法进行蛋白定量。
4、为了获得实验最佳效果，请根据实验调整最佳使用量。
使用方法：
1、请在实验前取出Tissue Protein Extraction Reagent进行预冷。
2、取适量Tissue Protein Extraction Reagent，抽提蛋白2-3分钟按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail，即1×工作液。
3、1 g组织加入10ml 1×工作液匀浆处理(抽提试剂的使用量可根据组织不同而调整)。若需要浓缩的蛋白提取物，可适当减少组织蛋白抽提试剂使用量。
4、冰上孵育20分钟(冰上放置时间可根据组织不同而调整)。
5、10000×g 离心15-20分钟。
6、转移上清至新管中，进行下一步的蛋白含量测定、纯化及分析。
储存条件：-20℃
TOP10感受态细胞 克隆与表达关键词：TOP10 Competent Cell,TOP10感受态细胞,WE0251
盐*(代"酸")*肼 L-Dopa 59-88-1
D-色*醇 Gly-Gly-Len 52485-52-6
ARB11926 大肠杆菌宿主残留蛋白(E.colI P)Elisa分析 escherichia coli protein,e.coli p ELISA KIT
ARB11749 人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员2(EAR2)Elisa方法检测 Human eosinophIL-associated ribonuclease a family member 2 ELISA KIT
95-54-*(代"5") OPD 邻*二胺
F040317 狗IgG抗原 Dog IgG
9025-70-1 β-葡聚糖酶 β-Dextranase
BTN131190 分子生物学级糖原溶液 Glycogen Solution
1-(3-二甲基胺丙基)-3-乙基碳二亚胺 CDI 1892-57-5
ARB12969 小鼠肌酐(Cr)定量分析 Mouse creatinine,cr ELISA KIT
ARB12407 大鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)尿液中含量检测 Rat tissue-type plasiminogen actilyse,t-pa ELISA KIT
ARB13726 兔热休克蛋白40(HSP-40)Elisa分析 Rabbit heat shock protein 40,hsp-40 ELISA KIT
TOP10感受态细胞 克隆与表达关键词：TOP10 Competent Cell,TOP10感受态细胞,WE0251
CYB164011 羊抗人IgG(1：500～2000)-HRP
异硫"青"酸胍 L-Aspartic acid Mg salt 593-84-0
BTN130301 DNA甲基化修饰试剂盒 Embedded Bisulfite Modification Kit
CBZ-D-缬*酸 Calcium citrate tetrahydrate 1685-33-2
ARB12092 大鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)免费代测 Rat secreted phospholipase a2,spla2 ELISA KIT
PY01-130 6-糠*基嘌呤 1克
ARB12665 大鼠碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)Elisa方法检测 Rat basic fibroblast growth factor 6,bfgf-6 ELISA KIT
ARB13023 小鼠肝炎病毒(MHV)elisa检测 Mouse hepatitis virus ELISA KIT
PY02-267 精*酸支原体肉汤培养基基础 100克
BFD048 沙丁胺醇快速检测卡
胭脂红 Aspartame 1390-65-4
BTN130807 显影定影试剂盒 Film Development Kit
002012 枸橼酸纳抗凝兔血
扁桃酸 Talc 90-64-2
ARB10928 人吡哆醛/吡哆醇维生素B6激酶(PDXK)elisa测定使用说明书 Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase,casp4 ELISA KIT
ARB14043 猴Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)elisa检测说明书 Monkey collagen type Ⅳ,col Ⅳ ELISA KIT
25988-63-0 Poly-L-Lysine 多聚-L-赖*酸(7-15万)
PY02-357 1%聚山梨酯80-玉米琼脂培养基 250克
三*蔗糖 H-Tyr-Ome 56038-13-2
CYB166012-D 兔抗大鼠IgG-GOLD
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国外的同学说一般他们克隆都是直接购买感受态细胞转化，实验效率很高的。我总是以为如果是一般的克隆实验，自己做感受态好像够用了－－如果是建库，购买现成的感受态细胞就是非常必要的首选，因为转化效率确实比实际手工制备的高2－3个数量级以上，特别是建库，能实实在在地提高实验的效率。实际上，除了建库以外，Stratagene为更好的表达蛋白、以及转化效率较低的巨无霸质粒，而特别优化了一些感受态细胞，做表达的人其实可以参考一下，有点用处的。在这里借用Merck公司提供的资料供大家参考
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