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- 百奥莱博
- 北京
- SY0022-LQF
- 2025年07月12日
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-20℃
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长期
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782
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货pUM19-T Vector TA克隆载体特价优惠，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京现货pUM19-T Vector TA克隆载体特价优惠，产品信息：
类别：克隆与表达
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| pUM19-T Vector TA克隆载体 | SY0022 | 5μg |
规格：5μg
编号：SY0022
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
pUM19-T载体是一种高效克隆PCR产物（TA Cloning）的专用载体。它是在线性化pUC19载体的基础上，在两侧的3’端添加碱基T而制成。特殊的纯化方式使得超过99%的pUM19载体两端都具有3’-T突出端，因此极大的降低了载体自连率。由于大部分耐热聚合酶反应时都会在PCR 产物的3’端添加一个A，可与pUM19载体3’端的T互补连接，因此可大大提高PCR 产物的连接和克隆效率。pUM19载体多克隆位点位于β-lactamase基因内，可以通过蓝白斑快速筛选含有插入片断的重组子。连接使用的PCR 片段3’端应带有A 末端；Pfu DNA Polymerase等高保真聚合酶的扩增产物不带A，应先在其末端加A后再进行TA克隆。本品随载体提供对照片段(500bp)用于阳性对照反应。
1.将载体置于冰上融化。建议第一次使用时将载体分装成小份保存，每次取一支使用。
2.按下表配置连接反应体系
ddH2O——To 10 μl
10×Ligase Buffer——1 μl
pUM19-T Vector (50 ng/μl)——1μl (约0.025 pmol)
插入片段*——0.075 pmol～0.25 pmol
T4 DNA Ligase (400 U/μl)——1 μl
注：插入片段与载体的摩尔比应在3:1～10:1之间。请根据琼脂糖凝胶电泳或紫外分光光度计检测确定插入片段的浓度，并根据其大小计算摩尔量。1 pmol 1 kb双链DNA的质量约为660 ng。
3.对照反应体系（可选）：
ddH2O——6 μl
10×Ligase Buffer——1 μl
pUM19-T Vector (50 ng/μl)——1 μl (约0.025 pmol)
500 bp control insert(50 ng/μl)——1 μl (约0.15 pmol)
T4 DNA Ligase (400 U/μl)——1 μl
4.轻轻吹打混匀反应体系，室温22-26℃孵育1-2小时，或16℃过夜。
5.转化：
1) 将连接产物加入到100 μl感受态细胞中(连接产物的体积不要超过感受态细胞体积的1/6)，轻轻弹匀，冰上孵育30分钟。
2) 将离心管置于42℃水浴，不要晃动，准确热激90秒后，立刻置于冰水浴中，不要晃动，静置2-3分钟。
3) 向离心管中加入900 μl LB或SOC培养基，150 rpm, 37℃振荡培养45分钟，使菌体复苏，抗性基因表达。
4) 2500 g离心5分钟，去掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬混匀，用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀，室温正置10分钟。待菌液被平板吸收后，37℃倒置培养过夜。
注：如果使用超级感受态细胞（转化效率>108 cfu/μg），可以直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存，一周之内都可重新涂板。
储存条件：-20℃。
注意事项
1) 尽量避免反复冻融，可将载体和对照片段分装成小份后保存。
2) 为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
北京现货pUM19-T Vector TA克隆载体特价优惠专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司
关键词：百奥莱博,pUM19-T Vector TA克隆载体,SY0022
pUM19-T Vector TA克隆载体由我公司长期专业供应，公司为广大顾客提供 pUM19-T Vector TA克隆载体产品说明，生产厂家，价格，规格，哪里买 。公司遵循高品质的产品，高质量的技术服务，合理的价格，是国内研发与生产，销*(代"售")合为一体的一家大型企业，我们承诺：以最少的经费，最高的效率，得到您最需要的实验结果，同时我们承诺，若有质量问题，无条件退换。
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| 编号 | 类别 | 名称 |
| SY0049 | 核酸扩增(PCR) | 通用型动物组织PCR试剂盒 |
| SY0717 | 二抗 | Cy3标记兔抗绵羊IgG(H+L) |
| SY0493 | 细胞凋亡与增殖 | 罗丹明123 |
| SY0248 | 核酸电泳和回收 | 强力*化乙锭去除剂 |
| SY0168 | 报告基因检测 | LXR-GFP报告基因质粒 |
| SY0802 | 生化检测试剂盒 | 活性氧(ROS)检测试剂盒 |
| SY0603 | 其他细胞生物学试剂 | 脂质体核酸转染试剂 |
| SY0530 | 其他培养基 | 硫*(代"酸")链霉素 |
| SY0656 | 一抗 | HRP标记小鼠抗V5-Tag单克隆抗体 |
| SY0052 | 核酸扩增(PCR) | 腺苷三磷酸溶液(100 mM)(ATP) |
| SY0237 | 报告基因检测 | 腔肠素f |
| SY0192 | 报告基因检测 | p53-GFP报告基因质粒 |
| SY0219 | 报告基因检测 | LXR-GFP报告基因质粒 |
| SY0097 | 报告基因检测 | Pax6-Luc荧光素酶报告基因质粒 |
| SY0174 | 报告基因检测 | HNF4-GFP报告基因质粒 |
| SY0621 | 培养基配套试剂 | 赤霉素，赤霉素A3 |
| SY0507 | 细胞凋亡与增殖 | 台盼蓝染色液(0.4%) |
| SY0232 | 报告基因检测 | D-荧光素*盐 |
| SY0646 | 一抗 | 兔抗Flag-Tag多克隆抗体(DYKDDDDK) |
| SY0017 | 克隆与表达 | JM109化学感受态细胞 |
| SY0682 | 二抗 | DyLight 405标记山羊抗小鼠IgG(H+L) |
| SY0617 | 培养基配套试剂 | 反玉米素 |
| SY0357 | 蛋白质研究 | 4×Tris-HCl浓缩胶缓冲液,pH6.8 |
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒，更多试剂产品需求，欢迎来电咨询选购北京现货pUM19-T Vector TA克隆载体特价优惠。
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文献和实验相关专题 北京百泰克—国内自主研发核酸提取与PCR相关试剂盒商家 T载体 是TA克隆载体的简称，就是利用载体的T末端和PCR产物的A末段连接而将目的基因克隆到载体中的方法。 目前市场上常见的T载体 ，根据连接方法可以分成两种： 方法1、以T4连接酶进行连接的方法，这种方法的载体 有P公司、T公司， 可以说这两家公司将这两种方法发挥到了很高的水平，转化子比较多，阳性率 也不错，唯一
碱基，但我觉得还是不如从质粒上往下切好切，而且容易切坏、切碎；②无法从电泳上看出来切没切开，因为也就切下了几个十几个bp，带形没啥变化。连TA克隆载体的优点：①进载体后，大提一次的质粒夸张点说够用一辈子的，不用总PCR往出调了，再说PCR那东西还不太稳定，一把多一把少的。②酶切会很清晰，切下来了就是有带，没切动就是没有，没连上也能知道不是没切开而是别的步骤有问题。连TA克隆载体也有些麻烦的地方，如需要的切点有时跟T载体上自带的切点冲突，这就要小心鉴别；而且连T载体最好测序看一下PCR的产物对不对、切点对不对
of 4 (where n is the number of nucleotides mutated and the randomized base is N = G, A, T, C). Cloning of the PCR product: library construction The mutated-promoter library should be constructed in an appropriate vector if phenotypic analysis is desired
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