50×TAE缓冲液折扣价

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括50×TAE缓冲液折扣价在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：50×TAE缓冲液折扣价
英文名：50×TAE Buffer
产地：国产|进口
编号：SY0263
品牌：百奥莱博
TAE即Tris acetate-EDTA buffer，常用于琼脂糖和聚丙*(代"烯")酰胺核酸的电泳实验。可用作电泳以及凝胶配制缓冲液。本品是50倍浓缩的TAE，使用时需用去离子水稀释到1×TAE工作液即可。

产品组分
1×TAE工作液中含有40 mM Tris-Acetate和1 mM EDTA，pH 8.3。

欲咨询购买50×TAE缓冲液折扣价，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·剥离硅烷
编号：SY0794
英文名称：Repel-Silane
规格：200ml
本品为剥离硅烷，组分主要为4%的二*二甲基硅烷。备聚丙*(代"烯")酰胺凝胶时，常使用Bind-Silane（亲和硅烷）处理长玻璃板，使凝胶与之粘贴。用Repel-Silane（剥离硅烷）处理短玻璃板，使凝胶易于分离。

使用方法
制备聚丙*(代"烯")酰胺凝胶时，请先将长、短玻璃板用1M的NaOH浸泡一段时间，并用洗涤剂清洗一遍，之后用水洗掉洗涤剂，再用去离子水冲洗干净。最后用乙醇擦拭玻璃板。

1 长玻璃板的处理
每次铺胶前均需用亲和硅烷对长玻璃板进行处理。
1）用镜头纸蘸取少许亲和硅烷溶液（1ml左右，视玻璃板大小而定）涂在长玻璃板上，自上而下涂一次，从左至右涂一次，将整块玻璃板涂满，涂匀。
2）5-10分钟后，用干净的镜头纸轻轻擦拭玻璃板以除去多余的亲和硅烷。
【注】：或用95%的乙醇清洗长玻璃板3次，以去除多余的亲和硅烷。

2短玻璃板的处理
每次铺胶前均需用剥离硅烷对短玻璃板进行硅化处理。
1）处理短玻璃板前必需更换手套，以防手套上的亲和硅烷污染短玻璃板，使短玻璃板也粘胶。
2）用镜头纸蘸取适量剥离硅烷溶液（1.5ml左右，视玻璃板大小而定）涂在短玻璃板上，自上而下涂一次，从左至右涂一次，将整块玻璃板涂满，涂匀。
3）5-10分钟后，用干净的镜头纸轻轻擦拭玻璃板以除去多余的剥离硅烷。

储存条件：室温，有效期一年。


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·第一条链 cDNA合成试剂盒
编号：SY0290
英文名称：First Strand cDNA Synthesis Kit
规格：50T
本试剂盒是基于Reverse Transcriptase，该酶热稳定性提高，在50℃的半衰期超过240min，且可长时间耐受高达55℃的反应温度，适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录，能稳定可靠地合成cDNA。且Reverse Transcriptase的独特设计，进一步增强了模板亲和力和行进性，使得全长cDNA的合成能力有了大幅度提升，可获得长达20 kb的cDNA，并且对于常见的逆转录抑制物具有更高的耐受度，非常适合于植物组织RNA的逆转录反应。

本试剂盒包含由总RNA或mRNA合成高质量第一条链cDNA所需的所有成分，并提供两种cDNA合成引物：Random hexamers和oligo（dT）18。合成的单链cDNA产物可直接用来进行后续PCR、qPCR以及PCR克隆。其中，5×RT Mix包含优化的缓冲体系和dNTP； Enzyme Mix包含Reverse Transcriptase和RNase inhibitor。可根据需要，选择Oligo (dT)18、Random hexamers或基因特异引物作为逆转录引物。

试剂盒组分：

 

组份	规格
RNase free ddH2O	1 ml
5×RT Mix	200 μl
Enzyme Mix*	50 μl
Oligo dT18 (0.5 μg/μl)	50 μl
Random hexamers (N6)	50 μl
*包含RNase inhibitor，用于抵抗环境和体系中可能存在的痕量的RNase。

储存条件：-20℃，有效期一年。

质量控制

所有组分经检测均无核酸外切酶、核酸内切酶、RNase残留。
功能检测1：以500 ng mouse total RNA为模板，Oligo dT18为引物，50℃反应45分钟。取1/10 cDNA产物进行PCR扩增ne*(代"b")ulin基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的20.0 kb条带。
功能检测2：以100 pg Hela cell total RNA为模板，Oligo dT18为引物，50℃反应30分钟。取1/10 cDNA产物进行PCR扩增β-actin基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的550 bp条带。
功能检测3：以500 ng Hela cell total RNA为模板，Oligo dT18为引物，55℃反应45分钟。取1/10 cDNA产物进行PCR扩增Polε基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的4.8 kb (GC-rich)条带。
功能检测4：以1 pg-1 µg HeLa cell total RNA为模板，以Oligo dT18和Random hexamers为引物，测试qRT-PCR性能。

以6个数量级的模板量的对数值对Ct值做标准曲线，R2>0.990，斜率在-3.20到-3.60之间。

客户需要准备的材料
1.RNase free的1.5 ml微量离心管或0.2ml PCR管
2.水浴锅或PCR仪
3.冰
4.RNA（高质量的完整的RNA对于获得高质量的cDNA是至关重要的。

引物选择
1） 如果模板为真核生物来源，建议选择Oligo dT18，其与真核生物mRNA的3’Poly A尾配对，可获得最高产量的全长cDNA。
2）基因特异性引物 (GSP)的特异性最高。但有些情况下，用于PCR反应的GSP无法有效引导第一链cDNA合成。这时，可改用Oligo dT18或Random hexamers重新进行逆转录。
3）Random hexamers特异性最低，所有RNA，包括mRNA、rRNA、tRNA均可以作为Random hexamers的模板。当目标区域具有复杂二级结构或GC含量较高，或者模板为原核生物来源，使用Oligo dT18或基因特异性引物 (GSP)无法有效引导cDNA合成时，可使用Random hexamers为引物。

应用实例

1 第一条链cDNA合成*（以20μl反应体系为例）
1）按照下表在RNase free离心管中配制如下混合液：

RNase free ddH2O	to 20 μl
Oligo(dT)18(0.5 μg /μl)	1 μl
or Random Primer	or 1 μl
or Gene Speicific Primers	or 2 pmol
5×RT Reaction Mix	4 μl
Enzyme Mix**	0.8-1μl
模板RNA	Total RNA: 50 ng-5 μg/mRNA: 5-500 ng

*可选步骤（一般不需要）：如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构，可以先只加RNA模板、引物和和RNase free H2O混匀，65℃变性5分钟，冰上冷却 5min，短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤。
** Enzyme Mix非常粘稠，溶液容易吸附在管壁和吸头外导致损失，用前请瞬时离心后使用，并且避免吸头外壁沾附损失。可每次按照0.8μl使用，不会影响使用效果。

2）用移液枪轻轻吹打混匀。
3）如用Oligo(dT)18或基因特异引物(GSP)，42℃孵育30-50min。
如用Random Primer，25℃孵育10 min，42℃孵育30-50 min。
4）65℃加热15 min(或者85℃加热5 min)失活Reverse Transcriptase。

2 RT-PCR
建议取1/10-1/5 体积(2-4 μl)的反转录产物作为PCR模板。
1）建议反应条件
 

Components	Volume	Final Concentration
cDNA Template	2 μl	as required
Forward Primer (10 μM)	1 μl	0.2 μM each
Reverse Primer (10 μM)	1 μl	0.2 μM each
10×Taq Buffer (含Mg2+)	5 μl	1×
2.5 mM dNTPs	4 μl	0.2 mM
Taq DNA Polymerase	0.5 μl	2.5 units
ddH2O to final volume	50 μl	Not applicable

注意事项
1）所有操作均应在冰上进行。
2）除使用RNase free的枪头和离心管外，RNA实验用的试剂建议专用，并在单独的洁净的区域操作。操作时，戴上口罩和一次性手套，避免说话。总RNA提取完成后，建议取少量跑1%琼脂糖凝胶电泳，检验RNA的完整性。
3）逆转录反应抑制物包括酚，盐，SDS，EDTA等。建议用75%乙醇 (用DEPC水配制)仔细洗涤RNA沉淀 (轻弹管底让沉淀悬浮，并静置数分钟)。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。






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·HRP标记小鼠抗V5-Tag单克隆抗体
编号：SY0656
英文名称：HRP-conjugated V5-Tag, Mouse mAb
规格：100μl(＞200次)
本品为HRP标记小鼠抗V5-Tag单克隆抗体，HRP标记小鼠抗V5标签单克隆抗体。推荐稀释比例：WB（1:4000）。

V5-Tag是一种合成的14aa多肽（GKPIPNPLLGLDST），载体构建中常作为一种标签用于蛋白的表达及后续检测。本品是HRP标记的V5-tag小鼠单克隆抗体，可用于特异性检测V5-tag融合蛋白。

产品类型：Mouse monoclonal antibody (Mouse mAb) ; Mouse IgG2b
反应性：含V5-tag的重组蛋白
应用：WB
储存缓冲液：PBS with 50% glycerol pH 7.3.
免疫原：偶联KLH的合成多肽【GKPIPNPLLGLDST】
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。

·兔抗HA-Tag多克隆抗体
编号：SY0653
英文名称：HA-Tag, Rabbit pAb
规格：20μl(＞50次)
本品为兔抗HA-Tag多克隆抗体，兔抗HA标签多克隆抗体。推荐稀释比例：WB（1:2000～20000），IP（1:1000～10000），IF（1:10～100）。

人流感病毒血凝素（Human influenza hemagglutinin, HA）是决定人病毒传染性的一类表面糖蛋白。HA标签（HA-Tag）来源于HA分子对应的98-106位*基酸（YPYDVPDYA ），广泛用作表达载体的通用表位标签。许多融合蛋白经基因工程重组后表达HA tag，且融合蛋白本身的生物活性和体内分布并不会受影响。其他常用的标签还包括myc、Flag、His、GST等，标签的使用简化了蛋白的检测，分离和纯化。

本抗体特异性识别HA Tag，不仅利于检测带HA Tag的融合蛋白的表达量，另外还利于后续对融合蛋白的分离纯化。

产品类型（Pruduct Type）：Rabbit IgG
反应性：Human, recombinant protein, Tag
宿主：Rabbit
应用：WB、IP、IF
缓冲液：Phosphate buffered saline (PBS) with 0.1% sodiu*(代"m") azide and 50% glycerol, pH 7.3
纯化：亲和纯化
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。

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