北京聚凝胺品牌

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖北京聚凝胺品牌在内的细胞生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：北京聚凝胺品牌
规格：500ul
品牌：百奥莱博
英文名：Polybrene (hexadimethrine bromide)
聚凝胺是一种多聚阳离子聚合物，常用于哺乳动物细胞的DNA转染实验以增强脂质体的转染效率。Polybrene目前广泛用于逆转录病毒介导的基因转染，慢病毒介导的基因转染，作用机理可能是通过中和细胞表面唾液酸与病毒颗粒之间的静电排斥从而促进吸附作用。Polybrene也是一种有名的抗肝素剂（肝素拮抗剂），常用来生产非特异性凝集的红细胞。另外Polybrene也多用于蛋白测序，因为小剂量的Polybrene在自动测序分析可明显改善多肽的降解现象。PVDF膜加入polybrene还能提高膜的亲和性。

本产品为即用型溶液，粉末用0.9%NaCl配置成10mg/ml的溶液，并用0.22μM滤膜过滤除菌。使用时一般按1:1000-1：2000稀释，依细胞种类不同稀释比例不同，具体查阅相关文献。
注：Polybrene对某些细胞（如末端分化的神经元，DC细胞）毒性较大，初次应用建议先做毒性测试。

操作步骤(仅供参考，具体使用浓度请参考相关文献)

实验1：逆转录病毒感染（Retroviral Infection）
（1）重组逆转录病毒原液的制备：取5ml生长培养基（5%血清）加入约含单层转染逆转录包装细胞的100mm培养盘内。孵育24h后，吸去培养液并用0.45μm滤器过滤。
（2）待感染细胞的培养：100mm培养盘内加入10ml完全培养基，细胞密度为5×105/盘。
（3）病毒感染：细胞培养24h后，吸去完全培养液。用含polybrene的2ml病毒上清 （或将病毒原液稀释到2ml）感染细胞，polybrene的终浓度为5μg-10μg/ml。37℃孵育3-6h。
（4）收集病毒颗粒：加入8ml完全培养基。感染3天后，按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。

实验2：转染
（1）完全生长培养基培养细胞，培养细胞密度约50%；
（2）孵育细胞18-24h后准备DNA-培养基- Polybrene混合液，按如下操作制备混合液：①添加完全培养基（60mm培养皿2ml，100mm培养皿3ml），37℃预热；②添加10ng~10µg质粒轻轻混匀；③加入Polybrene至终浓度为5μg-10μg/ml。轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。
（3）去除培养基，在细胞中加入DNA-培养基-Polybrene溶液，在37℃孵育细胞6-20h。细胞培养的前6h内约每1.5h轻柔混匀。
（4）去除DNA-培养基-Polybrene溶液。用DMSO shock solution（15%DMSO in 1X HBSS）轻轻盖住细胞（60mm培养皿3ml，100mm培养皿4ml）。每次加入溶液时用手轻晃培养盘10s，使得液体均匀分布。然后37℃孵育细胞4min。
（5）立即去除DMSO shock solution，用完全生长培养基轻轻清洗细胞2次。对于60mm培养皿每次用5ml培养液清洗，100mm培养皿每次用10ml培养液清洗。
（6）加入完全培养基到细胞中；
（7）稳定转化：去除生长培养基，按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。
瞬时表达：去除生长培养基，加入新鲜的生长培养基。24-72h后收获细胞。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期2年。

更多有关北京聚凝胺品牌的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
芴甲氧羰基-N-三*甲基-L-天冬酰胺 Aminoguanidine hemisulfate salt 132388-59-1
ARB10496 人白介素9(IL-9)尿液中含量检测 Human interleukin 9,IL-9 ELISA KIT
3-(N-玛啡啉)-2-羟基丙磺酸 N-BZ-Val-Gly-Arg PNA?HC1 68399-77-9
ARB12607 大鼠脱*表雄酮S7(DHEA-S7)定量分析 Rat dehydroepiandrosterone s7,dhea-s7 ELISA KIT
F050316 鸭IgY抗体 Duck IgY
ARB11511 人胸肾表达趋化因子(BRAK/CXCL14)免费代测 Human breast and kidney expressed chemokine,brak ELISA KIT
顺式-D-羟脯*酸 D-allo-Isoleucine 2584-71-6
BL1226 Hanks,含**,不含酚红(HBSS)
ARB13188 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)Elisa定量检测 Mouse insulin-like growth factor binding protein 2,igfbp-2 ELISA KIT
ARB10904 人抗鼠抗体(HAMA)ELISA检测服务 Human antimous antibody,hama ELISA 
ARB13050 小鼠表皮调节素(EPR)Elisa方法检测 Mouse epiregulin,epr ELISA KIT
ARB13861 猪布鲁氏菌(BrucellA)elisa检测 
PY02-250  阿奇霉素检定培养基  250克  
RN0101 TRIpure Reagent 总RNA提取试剂
ARB12574 大鼠高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)含量测试 Rat ultrasensitive thyroid-stimulating hormone,u-tsh ELISA KIT
CYB162045 兔抗小鼠IgG-FC(抗血清) 0.5ml
9014-01-1 碱性蛋白酶
ARB14209 大鼠还原型辅酶Ⅱ(NADPH)血清中含量检测 
PY02-001  营养琼脂(NA)  250克  
BL1095 DMEM(H)
曲拉通x-100 Sodium 1-hexanesulfonate 9002-93-1
ARB10026 人6羟多巴胺(6-OHDA)含量分析 Human 6-hydroxydopamine,6-ohda ELISA KIT
北京聚凝胺品牌关键词：Polybrene (hexadimethrine bromide),SY0605,聚凝胺

ARB13444 鸡白介素1β(IL-1β)酶免分析 Chicken interleukin 1β,IL-1β ELISA KIT
ARB13154 小鼠诱导型NO合酶(INOS)血清中含量检测 活性 Mouse inducible nitric oxide synthase,inos ELISA KIT
橙黄G6 cephalotin sodiu*(代"m") salt 1936-15-8
2-*基*并咪唑 Thrombin 934-32-7
蜗牛凝集素 Trolox
BTN130514 硅基磁珠 Magnetic beads,Silicic
HC0234 大龙12道手动移液器
ARB13697 兔补体蛋白3(C3)ELISA代测服务 Rabbit complement 3,c3 ELISA KIT
熊果苷 Fmoc-D-Ser-OH 497-76-7
ARB13555 兔子中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)含量测试 Rabbit neutrophil elastase,ne ELISA KIT
ARB10185 人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)Elisa分析 Human α-l-iduronidase,idua ELISA KIT
F030105 HRP标记兔抗牛血清白蛋白抗体 Rabbit Anti-BSA*HRP
3-硝基*(代"*")磺酸* Alcohol dehydrogenase 127-68-4
PY02-218  叠氮*葡萄糖肉汤基础  250克  
ARB11309 人促卵泡素(FSH)Elisa方法检测 Human follicle-stimulating hormone,fsh ELISA KIT
BTN60107 DNA粘转平试剂盒 DNA Polishing Kit
ARB12011 大鼠Toll样受体4(TLR4)ELISA代测服务 Rat toll-like receptor 4,tlr4 ELISA KIT
ARB14017 绵羊胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA检测服务 Sheep insulin-like growth factor-i,igf-i ELISA KIT
BTN130985 免DNA提取PCR试剂盒 Cell Lysate PCR Mix
利波腺苷 Phytic acid calcium salt 7724-76-7
三(3-磺酸*基*基)膦 m-Methyl red 63995-70-0
北京聚凝胺品牌关键词：Polybrene (hexadimethrine bromide),SY0605,聚凝胺


·2×PCR Plus Master Mix(含染料)
编号：SY0028
英文名称：2×PCR Plus Master Mix (With Dye)
规格：5×1ml
PCR Plus Master Mix (With Dye)包含Taq Plus DNA Polymerase，dNTP以及优化的缓冲体系，只需加入引物和模板即可进行扩增，大大简化实验的操作步骤，提高了高通量操作和实验结果的重现性。Mix中含有电泳缓冲液和染料，可在反应结束后直接进行电泳，使用方便。体系中加入的保护剂使得 Master Mix 经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。PCR产物的3’端带A，可轻松克隆至T载体。

质量控制
核酸外切酶残留检测：20 μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸外内酶残留检测：20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时, DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中，以ddH2O为模板，扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。
功能检测：50μl体系中，以20ng人基因组DNA为模板扩增α-1-antitrypsin基因。30个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，观察到单一的1Kb条带。
储存条件：-20℃。

·亲和硅烷
编号：SY0793
英文名称：Bind-Silane
规格：25ml
制备聚丙*(代"烯")酰胺凝胶时，常使用Bind-Silane（亲和硅烷）处理长玻璃板，使凝胶与之粘贴。用Repel-Silane（剥离硅烷）处理短玻璃板，使凝胶易于分离。

使用方法
制备聚丙*(代"烯")酰胺凝胶时，请先将长、短玻璃板用1M的NaOH浸泡一段时间，并用洗涤剂清洗一遍，之后用水洗掉洗涤剂，再用去离子水冲洗干净。最后用乙醇擦拭玻璃板。

1 长玻璃板的处理
每次铺胶前均需用亲和硅烷对长玻璃板进行处理。
1）用镜头纸蘸取少许亲和硅烷溶液（1ml左右，视玻璃板大小而定）涂在长玻璃板上，自上而下涂一次，从左至右涂一次，将整块玻璃板涂满，涂匀。
2）5-10分钟后，用干净的镜头纸轻轻擦拭玻璃板以除去多余的亲和硅烷。
【注】：或用95%的乙醇清洗长玻璃板3次，以去除多余的亲和硅烷。

2短玻璃板的处理
每次铺胶前均需用剥离硅烷对短玻璃板进行硅化处理。
1）处理短玻璃板前必需更换手套，以防手套上的亲和硅烷污染短玻璃板，使短玻璃板也粘胶。
2）用镜头纸蘸取适量剥离硅烷溶液（1.5ml左右，视玻璃板大小而定）涂在短玻璃板上，自上而下涂一次，从左至右涂一次，将整块玻璃板涂满，涂匀。
3）5-10分钟后，用干净的镜头纸轻轻擦拭玻璃板以除去多余的剥离硅烷。

储存条件：室温，有效期一年。

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