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lnRcute lncRNA cDNA第一链合成试剂盒(去基因组)(KR202)

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供应商信息

天根生化科技(北京)有限公司
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产品详情

品牌: TIANGEN
货号: KR202
规格: 20 μl×25 次/20 μl×100 次
规格: 20 μl×25 次 产品价格: ¥780.0
规格: 20 μl×100 次 产品价格: ¥2380.0

产品简介
lnRcute lncRNA cDNA第一链合成试剂盒是专门针对长链非编码RNA (lncRNA) 反转录而开发的产品。与mRNA相比,lncRNA具有丰度低、GC含量差异大、二级结构更复杂等特性,传统反转录试剂对lncRNA难以达到理想的效果。本试剂盒含有高效去除基因组DNA的gDNase,通过42℃,3 min即可去除RNA样品中残留的基因组DNA,可有效避免残留的基因组DNA对后续PCR检测结果的干扰。本试剂盒中lnR RT Enzyme Mix中使用的反转录酶为FastKing RT Enzyme,此酶是通过分子改造后的新型反转录酶,特别增加了疏水motif,具有更强的RNA亲和性和热稳定性,从而进一步提高了其反转录效率和反应速率,42℃、15 min即可完成cDNA第一链的合成,且反转录长度至少可达10 kb。另外,新型酶与RNA亲和力的更强,配合特殊优化过的缓冲体系和引物体系,使本试剂盒在通读GC含量高,二级结构复杂,低丰度的RNA模板和抗逆性等方面表现突出,特别适合表达水平相对较低,二级结果相对复杂的lncRNA的反转录反应。


产品特点
● 性能卓越:反转录效率可达95%以上,Total RNA最低检测下限可达10 ng,反转录长度可达10 kb以上。
● 简单快速:反应体系配制简单,21 min完成lncRNA cDNA第一链的合成;
● 适用广泛:能够通用于GC含量差异大,二级结构复杂,低丰度的RNA模板;对不同物种来源及杂质较多的RNA模板的适用性高;
● 兼容性好:后续配合荧光定量检测产品,灵敏度高、稳定性好。

 

实验例

实验例1. 提取拟南芥总RNA,分别使用TIANGEN KR202+FP402 及国外A 公司提供的解决方案 ( 使用mRNA反转定量试剂) 检测lncRNA COOLAIR,展示扩增曲线、熔解曲线、标准曲线和Ct 值。结果显示,TIANGEN lncRNA 专属检测试剂扩增Ct 靠前,特异性高,梯度优秀,优于竞争公司的mRNA 通用试剂。NTC:阴性对照。ND:未检出。

 

实验例2. 分别提取人类(左)、小鼠(中)和大鼠(右)总RNA,分别使用TIANGEN KR202+FP402(蓝色线)及国内B 公司提供的解决方案(使用mRNA 反转定量试剂,红色线)检测lncRNA ( 人类:HEIH,小鼠:NONMMUT000882,大鼠:NONRATT000076),展示扩增曲线和熔解曲线。结果显示,TIANGEN lncRNA 专属检测试剂扩增Ct 靠前,特异性高,具有良好的物种普适性,优于竞争公司的mRNA 通用试剂。

温馨提示:不可用于临床治疗。

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产品简介lnRcute lncRNA cDNA第一链合成试剂盒是专门针对长链非编码RNA (lncRNA) 反转录而开发的产品。与mRNA相比,lncRNA具有丰度低、GC含量差异大、二级结构更复杂等特性,传统反转录试剂对lncRNA难以达到理想的效果。本试剂盒含有高效去除基因组DNA的gDNase,通过42℃,3 min即可去除RNA样品中残留的基因组DNA,可有效避免残留的基因组DNA对后续PCR检测结果的干扰。本试剂盒中lnR RT Enzyme Mix中使用的反转录酶为FastKing RT Enzyme,此酶是通过分子改造后的新型反转录酶,特别增加了疏水motif,具有更强的RNA亲和性和热稳定性,从而进一步提高了其反转录效率和反应速率,42℃、15 min即可完成cDNA第一链的合成,且反转录长度至少可达10 kb。另外,新型酶与RNA亲和力的更强,配合特殊优化过的缓冲体系和引物体系,使本试剂盒在通读GC含量高,二级结构复杂,低丰度的RNA模板和抗逆性等方面表现突出,特别适合表达水平相对较低,二级结果相对复杂的lncRNA的反转录反应。产品特点● 性能卓越:反转录效率可达95%以上,Total RNA最低检测下限可达10 ng,反转录长度可达10 kb以上。● 简单快速:反应体系配制简单,21 min完成lncRNA cDNA第一链的合成;● 适用广泛:能够通用于GC含量差异大,二级结构复杂,低丰度的RNA模板;对不同物种来源及杂质较多的RNA模板的适用性高;● 兼容性好:后续配合荧光定量检测产品,灵敏度高、稳定性好。 实验例实验例1. 提取拟南芥总RNA,分别使用TIANGEN KR202+FP402 及国外A 公司提供的解决方案 ( 使用mRNA反转定量试剂) 检测lncRNA COOLAIR,展示扩增曲线、熔解曲线、标准曲线和Ct 值。结果显示,TIANGEN lncRNA 专属检测试剂扩增Ct 靠前,特异性高,梯度优秀,优于竞争公司的mRNA 通用试剂。NTC:阴性对照。ND:未检出。 实验例2. 分别提取人类(左)、小鼠(中)和大鼠(右)总RNA,分别使用TIANGEN KR202+FP402(蓝色线)及国内B 公司提供的解决方案(使用mRNA 反转定量试剂,红色线)检测lncRNA ( 人类:Htiangenkr202
lncRNA的丰度只有mRNA丰度的1/10(Cabili et al, Genes Dev, 2011; Aleksandra et al, Genome Biol, 2016)。据估计,人体内有超过30,000种lncRNA,但一个细胞内大于1个copy的lncRNA不超过1000种(Djebali et al, Nature, 2012)。故此,传统mRNA的定量试剂的灵敏度远远不足,并不适用于lncRNA的反转录和荧光定量实验。  TIANGEN关注lncRNA与mRNA的不同,根据lncRNA的特点量身定制了检测试剂,是国内首创的专门适用于lncRNA反转和定量的检测试剂盒。 lnRcute lncRNA cDNA第一链合成试剂盒 (目录号:KR202) ■  稳定高效的King反转录酶■  缓冲液中加入提升灵敏度的组分,检测下限可达1 ng RNA■  反转录之前去除基因组DNA,简化模板,提高效率lnRcute lncRNA荧光定量检测试剂盒 (SYBR Green) (目录号:FP402) ■  超高灵敏度的抗体热启酶■  缓冲液中加入H-competitor因子,完美解决高GC和复杂lncRNA模板■  适用快速定量流程,高效完成lncRNA检测  实验例1. 提取拟南芥总RNA,分别使用TIANGEN KR202+FP402 及国外A 公司提供的解决方案 ( 使用mRNA反转定量试剂) 检测lncRNA COOLAIR,展示扩增曲线、熔解曲线、标准曲线和Ct 值。结果显示,TIANGEN lncRNA 专属检测试剂扩增Ct 靠前,特异性高,梯度优秀,优于竞争公司的mRNA 通用试剂。NTC:阴性对照。ND:未检出。实验例2. 分别提取人类(左)、小鼠(中)和大鼠(右)总RNA,分别使用TIANGEN KR202+FP402(蓝色线)及国内B 公司提供的解决方案(使用mRNA 反转定量试剂,红色线)检测lncRNA ( 人类:HEIH,小鼠:NONMMUT000882,大鼠:NONRATT000076),展示扩增曲线和熔解曲线。结果显示,TIANGEN lncRNA 专属检测试剂扩增Ct 靠前,特异性高,具有良好的物种普适性,优于竞争公司的mRNA 通用试剂。tiangen套装1/套装2
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。cDNA第一链合成试剂盒II(RNase H-)销售是高品质的核酸扩增(PCR),由北京百奥莱博供应,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多cDNA第一链合成试剂盒II(RNase H-)等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。名称:cDNA第一链合成试剂盒II(RNase H-)销售规格:20次|100次编号:YT397品牌:百奥莱博产地:国产|进口本试剂盒是一种采用了经过改造和优化的M-MLV反转录酶II(RNase H-)(YT394),用于以总RNA、mRNA等为模板反转录合成cDNA第一链的试剂盒。本试剂盒包含了进行cDNA第一链合成所需的各种试剂。使用本试剂盒合成的第一链,可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR也称定量PCR(quantitative PCR, qPCR)、 cDNA的第二链合成以及cDNA文库的构建等。使用本试剂盒可以轻松完成长度为8 kb及以下基因的反转录(参考图1),反转录的最大长度可以超过10 kb。在采用M-MLV反转录酶II(RNase H-)(YT394)的情况下,由于缺失了RNase H酶活性,RNA和DNA双链复合物中的RNA不会被降解,这样反转录出来的cDNA的长度就会更长,并且产量更高。使用本试剂盒对总RNA反转录后,对于不同长度的cDNA进行PCR扩增后的电泳效果图。图中可见对于0.2-8kb的cDNA可以非常高效地被反转录。本试剂盒中的M-MLV反转录酶II(RNase H-)(YT394)热稳定性高,最适反应温度为42-45℃,但当温度达到50℃时仍具有很高活性,且可获得较高产量的cDNA。试剂盒中提供了RNase Inhibitor,确保在反转录过程中的RNA不会被RNA酶所降解并取得较好的反转录效果。试剂盒还提供了Oligo(dT)18和random hexamer这两种引物,前者适合用于带有Poly(A)尾的mRNA的反转录,后者进行反转录时不需要poly(A)尾。也可以自行采用基因特异性引物进行cDNA第一链的合成。本试剂盒用于体积为20微升的cDNA第一链合成反应时足够进行20个cDNA第一链样品的合成。产品百奥莱博yt397-ymg
产品简介本产品是一种高效、稳定、快速并可以去除基因组DNA污染的反转录预混Mix。5× FastKing-RT SuperMix中不但含有RT-PCR中反转录反应所需的所有试剂(FastKing RT Enzyme、RNase Inhibitor、Random primers、Oligo dT primer、dNTP Mixture、反应Buffer),还含有高效去除基因组DNA的热敏gDNase,使得RNA中残留基因组的去除与反转录反应同时进行,方便反转录操作。此外,热敏的gDNase生效快,效率高,作用时间短,在处理残留基因组DNA之后不会对cDNA造成影响。本试剂盒所含的高效反转录酶FastKing RT Enzyme,是通过分子改造后的新型反转录酶,特别增加了疏水motif,具有更强的RNA亲和性和热稳定性,从而进一步提高了其反转录效率和反应速率,42℃、15 min即可完成cDNA第一链的合成。另外,由于新型酶与RNA亲和力的增强,使其在通读GC含量高,二级结构复杂的RNA模板和抗逆性等方面的表现也更为的突出。 产品特点● 体系配制简单:本产品为预混Mix形式,只需加入模板RNA和水便可以进行反应。● 反转录效率高:反转录效率可达95%以上。● 反转录速度快:只需42℃,15 min即可完成cDNA第一链的合成,同时去除残留DNA。● 通读复杂模板:能够作用于GC含量高,二级结构复杂的RNA模板。● 后续兼容性好:后续配合荧光定量检测产品,灵敏度高、稳定性好。 适用范围RT-PCR;荧光定量RT-PCR;cDNA文库构建;SAGE(基因表达连续分析);引物延伸。 实验例实验例 1. 分别使用 TIANGEN KR118、国外 A 公司和国内 B 公司的一步法反转定量试剂合成cDNA,使用 TIANGEN FP209检测小鼠 RN5 基因,展示扩增曲线、熔解曲线和标准曲线。结果显示,TIANGEN KR118 反转录得到的 cDNA 量大,扩增 Ct靠前,特异性高,梯度优秀,特别对于低丰度模板的检测优于其他竞争试剂。  实验例 2. 分别使用 TIANGEN KR118、国外 A 公司和国内 B 公司的一步法反转定量试剂合成 cDNA,使用 TIANGEN FP209 检测人类 HsG 基因,并且人为添加不同浓度的tiangenkr118

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