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12个月
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凯基生物
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0.25 ml
该预染蛋白分子量 marker 旨在监测 SDS-PAGE 电泳进程,评估转移到 PVDF、尼龙和硝酸纤维素膜上的转移率,并在凝胶染色或使用 Western blot 检测试剂后估算可见的分离蛋白的大致分子量。该蛋白 Ladder 包含一个 70kDa 的橙色参考条带和一个 10kDa 的绿色参考条带。
实验类型:预染彩色蛋白分子量
检测方法:SDS-PAGE 电泳
保存条件:-20℃,保存12个月,避光
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文献和实验【求助】180KD的膜蛋白western转膜条件怎样?(湿转)
zhywang4072 鄙人现在做一180KD的蛋白,之前转PVDF膜用的是100v两个半小时,预染marker转得很漂亮,内参也很不错,但是目标蛋白条带却没有,请教各位大侠,这是什么原因?还有诸位大蛋白转膜时候条件怎样?我用的是湿转,谢谢 wodezxn 我觉得100V2h肯定是足够了,没转上应该是你目的蛋白的问题,可能是蛋白表达量太少或者你提蛋白的时间有问题。 zhibinx2007
电泳过程同样很重要啊。电转的时候其实只要预染marker只要转到膜上了,那么你的相应分子量的目的蛋白也就转过去了,所以这就是你摸索条件的指示带。3、电泳过程中有推荐TRICINE-SDS-PAGE胶来进行电泳,会更有利于小分子量蛋白的分离,研读了一些文献,这个效果应该还是很肯定的,但是鄙人没有做过这种电泳,所以给不了什么经验,我最终还是用普通SDS-PAGE胶做出来的,不过鉴于我的蛋白分子量是11KD,那么假如你是几KD甚至更小分子量的多肽,那么还是建议你用TRICINE-SDS-PAGE胶来电
或者多肽的分离辨别。其中GE的从2kD到16kD之间有6条带的蛋白标准挺不错,另外提醒一句,特别小的蛋白Marker条带如果要显色好,上样一定要上足够的量哦。 二.预染蛋白分子量标准 预染蛋白分子量是一些纯化好的蛋白混合物,通过与染料共价耦联,在电泳过程中或者转膜时可以直接观察到。预染蛋白分子量的出现方便了我们的实验,这种蛋白分子量标准可以帮助我们在电泳时、电泳后,以及转膜后监测电泳情况和估计迁移率——比如,已知垂直电泳最佳分辨区域大约在胶的2/3处。如果使用预染Marker
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