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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
0.25 ml
本产 品溶于 Storage Buffer 【 62.5mM Tris-H3PO4 (pH7.5 at 25°C), 1mM EDTA, 2%SDS, 0.1M DTT, 1mM NaN3, 0.01% bromophenol blue and 33% glycerol】
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文献和实验! 我也做过小分子量的蛋白,大概是15kD左右吧,我没有三抗,我自己的经验是: 1. 电泳的时间一定不要太长,我把积层胶制的很厚,分离胶比平常的要短一些,我用的是15%的分离胶,大概跑了2/3分离胶左右的时候就停了; 2. 转膜我们是湿转,时间我控制在6小时左右,恒压25-27V左右; 3. 小分子量蛋白有时候会被marker的不准确而影响判断,我一般是用两种不一样的marker加在两边,来综合判断分子量,这样更准确;
电泳过程同样很重要啊。电转的时候其实只要预染marker只要转到膜上了,那么你的相应分子量的目的蛋白也就转过去了,所以这就是你摸索条件的指示带。3、电泳过程中有推荐TRICINE-SDS-PAGE胶来进行电泳,会更有利于小分子量蛋白的分离,研读了一些文献,这个效果应该还是很肯定的,但是鄙人没有做过这种电泳,所以给不了什么经验,我最终还是用普通SDS-PAGE胶做出来的,不过鉴于我的蛋白分子量是11KD,那么假如你是几KD甚至更小分子量的多肽,那么还是建议你用TRICINE-SDS-PAGE胶来电
Separation and Size Determination of DNA over a 10,200 kbp Range
7 ). Here conditions are described for the separation of DNA in the l0–,200-kbp size range by CHEF. CHEF resolution in this range exceeds that of many commonly used size standards. Production and use of a size standard giving a 10-kbp ladder in the l0–,200-kbp range








