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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Cre Recombinase
- 库存:
大量
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 规格:
50U/盒
产品及特点:
Cre 重组酶是细菌噬菌体 P1 的 I 型拓扑异构酶,催化 loxP 位点间的 DNA 进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子,Cre 介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡。loxP 识别元件是一个 34bp 序列,其两端是两个 13bp 的反向重复序列,中间是起定向作用的 8 bp 间隔区。重组产物根据 loxP 位点的位置和相对方向而不同,两个含单 loxP 位点的 DNA 将被融合。两个正向重复 loxP 位点间的DNA 将以环状形式切割,而两个反向 loxP 位点间的 DNA 序列将被翻转。本产品作用原理图如下:
本产品具有下列特点:
1. 两个 loxP 位点之间 DNA 的切割
2. 含 loxP 位点 DNA 分子的融合
3. loxP 位点之间 DNA 序列的翻转
Cre 重组酶-Cre Recombinase反应条件
1X Cre 重组酶反应缓冲液 [33 mM NaCl, 50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @25℃),10 mM MgCl2],37℃ 温育。Buffer 成分
15 mM Tris-HCl,250 mM NaCl,0.3 mg/ml BSA,50% Glycerol,pH8.0 @ 25℃
热失活
70℃ 10 分钟。
Cre 重组酶备注
建议进行琼脂糖凝胶电泳前,将 Cre 重组酶反应混合物于 70℃ 温育 10 分钟。由于 Cre 重组酶反应是一个动态平衡过程,用 loxP 2+ 对照底物仅有 20-30%发生重组。由于重组产物的量较少,故溴化乙锭染色后呈现微弱条带,同时伴有底物染色强度相应减弱。延长温育时间不会提高重组效率,相反,还可能导致大分子量重组产物的生成。反应中增加 Cre 重组酶量将形成loxP依赖性 Cre - DNA 复合物,从而抑制重组反应。1kb DNA Marker(条带1000.2000.3000.4000.5000.6000.8000.10000) 1000T
1kb Plus(条带300.500.800.1000.1500.2000.3000.4000.5000.6000.8000.10000) 50T
1kb Plus(条带300.500.800.1000.1500.2000.3000.4000.5000.6000.8000.10000) 500T
DL15000(条带:250.1000.2500.5000.7500.10000.15000) 50T
DL15000(条带:250.1000.2500.5000.7500.10000.15000) 500T
DL15000 Plus(条带250.500.1000.1500.2500.4000.5000.7500.10000.15000) 50T
DL15000 Plus (条带250.500.1000.1500.2500.4000.5000.7500.10000.15000) 500T
DL2000(条带100.250.500.750.1000.2000) 50T
DL2000(条带100.250.500.750.1000.2000) 1000T
DL2000 Plus (条带100.250.500.750.1000.2000.3000.5000) 50T
DL2000 Plus (条带100.250.500.750.1000.2000.3000.5000) 500T
λ /HindIII 50T
λ /HindIII 500T
pUC18/MspI 20T
pUC18/MspI 200T
DH5a Competent cell 40×100ul
TOP10 Competent cell 40×100ul
JM109 Competent cell 20×100ul
BL21 Competent cel 20×100μl
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文献和实验Regulation of Cre Recombinase: Use of Ligand-Regulated and Dimerizable Cre for Transgenesis
or, if combined with the use of a specific promoter, in a time- and cell-type-dependent manner. The most widely used approach to obtain this regulation relies on the fusion of the recombinase, mostly Cre recombinase, with the ligand-binding domain (LBD
Conditional Gene Knockout Using Cre Recombinase
The directed introduction of null mutations into defined genes has proven invaluable in elucidating gene function in a variety of experimental organisms. In the last decade or so this approach has been extended to mice (1 ) by the combined
Creation and Use of a Cre Recombinase Transgenic Database
Embryonic stem (ES) cell-mediated transgenic approaches have revolutionized mammalian genetics in the last decade. Close to 4000 genes have been targeted to date. Analysis of these genetic alterations has provided an unprecedented
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