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BaldStar TaqMan One Step RT-qPCR Kit
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
一步法逆转录实时荧光定量PCR试剂盒 核酸扩增(PCR)由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多一步法逆转录实时荧光定量PCR试剂盒等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。
名称:一步法逆转录实时荧光定量PCR试剂盒 核酸扩增(PCR)
编号:WE0148
英文名:BaldStar TaqMan One Step RT-qPCR Kit
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:100次
本试剂盒是采用探针法(TaqMan,Molecular Beacon等)进行一步法Real-Time RT-qPCR的专用试剂盒。使用本产品进行Real Time RT-qPCR反应时,逆转录和定量PCR在同一反应体系中进行,反应过程中无需添加试剂,无需打开管盖,避免了污染的同时提高了实验效率。本产品的检测灵敏度高,荧光信号强,信噪比高,非常适合于RNA病毒等微量RNA的检测。其所包含的特殊缓冲系统能使逆转录酶与DNA聚合酶同时发挥最大功效,提高反应效率。使用本产品可以得到更宽广的线性范围,对目的基因定量更准确,重复性好,可信度高。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器:(WE0148)
Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-rad iCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器:(WE0149)
ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System,QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system,Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器:(WE0150)
ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
试剂盒组成:
组份 | WE0148-100次 | WE0149-100次 | WE0150-100次 |
2×BaldStar TaqMan One Step Buffer | 1.4ml | 1.4ml | 1.4ml |
BaldStar TaqMan One Step EnzymeMix | 100μl | 100μl | 100μl |
50×Low ROX | - | 50μl | - |
50×High ROX | - | - | 50μl |
RNase-Free Water | 1.5ml | 1.5ml | 1.5ml |
试剂 | 25μl反应体系 | 终浓度 |
2×BaldStar TaqMan One Step Buffer | 12.5μl | 1× |
Forward Primer,10μM | 0.5μl | 0.2μM |
Reverse Primer,10μM | 0.5μl | 0.2μM |
Probe,10μM | 0.5μl | 0.2μM |
BaldStar TaqMan One Step EnzymeMix | 1.0μl | |
RNA Template | Xμl | 10 pg~100ng |
50×Low ROX or High ROX(可选) | 0.5μl | 1× |
RNase-Free Water | up to 25μl |
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
逆转录 | 45℃ | 10 min | |
PCR预变性 | 95℃ | 10 min | |
变性 | 95℃ | 15 s | 30-40个循环 |
退火/延伸 | 60℃ | 45 s |
SDS-PAGE 分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
6%胶 | 50-150 kD |
8%胶 | 30-90 kD |
10%胶 | 20-80 kD |
12%胶 | 12-60 kD |
15%胶 | 10-40 kD |
分离胶浓度 | 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 分离胶缓冲液(4×) | 10%APS | TEMED | ||
6% | 5ml | 2.75 | 1.0 | 1.25 | 0.05 | 0.004 |
10ml | 5.5 | 2.0 | 2.5 | 0.1 | 0.008 | |
15ml | 8.25 | 3.0 | 3.75 | 0.15 | 0.012 | |
20ml | 11 | 4.0 | 5 | 0.2 | 0.016 | |
8% | 5ml | 2.42 | 1.33 | 1.25 | 0.05 | 0.003 |
10ml | 4.8 | 2.7 | 2.5 | 0.1 | 0.006 | |
15ml | 7.25 | 4.0 | 3.75 | 0.15 | 0.009 | |
20ml | 9.7 | 5.3 | 5 | 0.2 | 0.012 | |
10% | 5ml | 2.08 | 1.67 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10ml | 4.17 | 3.33 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
15ml | 6.25 | 5.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
20ml | 8.3 | 6.7 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
12% | 5ml | 1.75 | 2.0 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10ml | 3.5 | 4.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
15ml | 5.25 | 6.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
20ml | 7.0 | 8.0 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
15% | 5ml | 1.25 | 2.5 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10ml | 2.5 | 5.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
15ml | 3.75 | 7.5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
20ml | 5 | 10.0 | 5 | 0.2 | 0.008 |
凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 浓缩胶缓冲液(4×) | 10%APS | TEMED | |
2ml | 1.14 | 0.34 | 0.5 | 0.02 | 0.002 |
4ml | 2.28 | 0.68 | 1 | 0.04 | 0.004 |
6ml | 3.42 | 1.02 | 1.5 | 0.06 | 0.006 |
8ml | 4.56 | 1.36 | 2 | 0.08 | 0.008 |
组份 | WE0154-5ml | WE0155-5ml | WE0156-5ml |
2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG) | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
50×Low ROX | - | 200μl | - |
50×High ROX | - | - | 200μl |
ddH2O | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG) | 25μl | 1× |
Forward Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
Reverse Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
Probe,10μM | 1μl | 0.2μM |
Template DNA | 2μl | |
50×Low ROX or High ROX(可选) | 1μl | 1× |
ddH2O | up to 50μl |
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
UNG酶消化 | 37℃/50℃ | 2-10 min | |
预变性 | 95℃ | 10 min | |
变性 | 95℃ | 15 s | 35-40个循环 |
退火/延伸 | 60℃ | 1 min |
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
UNG酶消化 | 37℃/50℃ | 2-10 min | |
预变性 | 95℃ | 10 min | |
变性 | 95℃ | 15 s | 35-40个循环 |
退火 | 55℃-65℃ | 30s | |
延伸 | 72℃ | 30s |
北京百莱博科技有限公司专业生产核酸扩增(PCR)产品,欢迎来电咨询选购一步法逆转录实时荧光定量PCR试剂盒 核酸扩增(PCR)。
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