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- 百奥莱博
- 北京
- WE0170-SKF
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温(15～30℃)
- 保质期：
长期
- 英文名：
DNA Product Quick Clean-up Kit
- 库存：
888
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")WE0170型DNA产物快速纯化试剂盒现货，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。
名称：WE0170型DNA产物快速纯化试剂盒现货
编号：WE0170
英文名：DNA Product Quick Clean-up Kit
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
本试剂盒采用新型硅基质膜技术和试剂配方，通过离心吸附柱快速简单的结合-洗涤-洗脱三步即可从PCR产物或酶反应液(酶切，连接，探针标记等)中纯化回收100 bp-10 kb的DNA片段，每个吸附柱最高可吸附10μg的DNA，同时最大限度的去除引物、寡核苷酸、酶等杂质。纯化回收的DNA纯度及浓度高，完整性好，回收率高，可直接用于测序、连接和转化、标记、体外转录等分子生物学实验。
试剂盒组成：
| 组份 | 50次 | 200次 |
| Buffer PB | 30ml | 120ml |
| Buffer PS | 15ml | 60ml |
| Buffer PW(浓缩) | 6ml | 25ml |
| Buffer EB | 10ml | 30ml |
| 离心吸附柱DM及收集管 | 50套 | 200套 |
产品特点
1、快速简单：操作步骤少，15分钟完成，同时可处理多个样品，节省时间。
2、回收率高：新型硅基质膜技术和试剂配方保证每次最大量回收到纯度极高的目的DNA。
3、处理量大：每个离心吸附柱每次最多可吸附的DNA 量为10μg。
自备试剂：无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、所有组分可在干燥、室温(15～30℃)环境稳定保存1年，更长时间保存可置于2- 8℃。当溶液低温保存时,使用前需在室温中放置一段时间，恢复至室温后使用。
2、本试剂盒可无选择性回收溶液中所有DNA片段，如需选择性回收特定片段，同时去除其他不同大小片段，请选择我公司的胶回收试剂盒(WE0168)
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer PB是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀现象，可在37℃水浴几分钟，即可恢复澄清。
5、回收效率与初始DNA量和洗脱体积有关，初始量越少，洗脱体积越少，回收率越低。
6、所有离心步骤均可室温下进行。
操作步骤：
1、估计DNA反应液的体积，加入5倍体积的 Buffer PB，充分混匀(无需去除石蜡油或矿物油)。
注意：
1)如DNA反应体系为50μl(不包括石蜡油体积)，则加入250μl Buffer PB。
2)在加入Buffer PB后检测溶液的pH值，若pH值＞7.5，可向其中加入10-30μl的3 M醋酸*(pH5.0)，从而将pH值调到5-7。
2、柱平衡：向已装入收集管中的吸附柱DM中加入200μl Buffer PS，13000rpm(~～～16200×g)离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
3、将步骤1中所得溶液加入到已装入收集管的吸附柱中，室温放置1分钟，13000rpm离心30-60 s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
注意：吸附柱容积为750μl，若样品体积大于750μl可分批加入 。
4、向吸附柱中加入500μl Buffer PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)13000rpm离心30-60 s，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
注意：如果纯化的DNA用于盐敏感实验(例如平末端连接实验或直接测序)，建议加入Buffer PW后静置2-5分钟再离心。
5、13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。为确保下游实验不受残留乙醇的影响，建议将吸附柱开盖，置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的乙醇。
6、将吸附柱放到一个新离心管(自备)中，向吸附膜中间位置悬空滴加30-50μl Buffer EB，室温放置1分钟。13000rpm离心1分钟，收集DNA溶液。-20℃保存DNA。
注意：
1)洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液，应保证其pH值在7.0-8.5之间(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)。
2)为了提高DNA的回收量，可将离心得到的溶液重新加到吸附柱中，室温放置2分钟，13000rpm离心1分钟。
3)洗脱体积不应小于30μl，体积过少会影响回收效率。
4)回收＞10 kb的DNA片段时，Buffer EB应在50℃水浴中预热，适当延长吸附和洗脱时间，可增加回收效率。
储存条件：室温(15～30℃)。
关于WE0170型DNA产物快速纯化试剂盒现货的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
·FITC标记驴抗兔IgG(H+L)
编号：WE0365
英文名称：Donkey Anti-Rabbit IgG,FITC Conjugated
规格：100μl
本产品为FITC标记的经亲和纯化的驴抗体，特异识别兔IgG，检测灵敏度高，本底低，常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。FITC即硫*酸荧光素，为一种常用的荧光染料，常用于免疫荧光和流式细胞检测等多标记检测。
免疫原：兔IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：0.05%叠氮*
荧光团：FITC，Amax=492; Emax=520
应用范围：对于大多数实验(1：50-200)
·双链DNA荧光定量试剂盒
编号：WE0235
英文名称：dsDNA Assay Kit for Qubit
规格：100次|500次
本试剂盒是一种简便、灵敏、精确的双链DNA(dsDNA)荧光定量检测试剂盒。本试剂盒包含即用型荧光检测试剂和相关的dsDNA标准品。本试剂盒对dsDNA具有高度选择性，在0.2~100ng区间具有很好的线性关系，是一种快速、简单、灵敏的DNA定量方法。
本试剂盒操作简单方便，使用时只需将即用型荧光检测试剂与待测dsDNA样品混合，即可使用荧光酶标仪或Qubit®荧光仪进行读数。操作简单，结果可靠，是二代测序大规模DNA样品定量的理想选择。本试剂盒对一些常规的污染物如蛋白质、盐类物质、洗涤剂等具有较好的耐受性。
WE0170型DNA产物快速纯化试剂盒现货关键词：DNA产物快速纯化试剂盒,WE0170,DNA Product Quick Clean-up Kit
·100bp DNA Ladder
编号：WE0244
规格：100次(500μl)|500次(5×500μl)
100 bp Ladder由9条DNA片段组成，分别为1,500 bp、1000bp、800 bp、600 bp、500 bp、400 bp、300 bp、200 bp和100 bp。和本产品已含有1×Loading Buffer的DNA溶液，可取5μl直接电泳，使用十分方便；电泳时500 bp的DNA片段量约为150ng，显示亮带，其他条带的DNA量约为50ng。
注意事项：
1、本产品可直接化冻混匀使用，无需加热。
2、请及时更换电泳缓冲液并使用新制琼脂糖凝胶，以免影响电泳结果。
3、DNA琼脂糖凝胶电泳时，凝胶的纯度对DNA条带的清晰度影响很大，因此尽量选用质量好的琼脂糖，推荐凝胶浓度为1%-3%，电压4-8 v/cm。
4、凝胶浓度与DNA片段的分离性能关系密切。凝胶浓度越大，对短片段DNA分离性能越好；反之，凝胶浓度越小，越有利于长片段DNA的分离。
使用方法：
取5μl 加入琼脂糖凝胶的加样孔中(如果加样孔较宽，大于6mm时，须适当增加上样量)，进行电泳。
1%琼脂糖凝胶电泳图(5μl)
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期24个月。
·柱式中量血液基因组DNA提取试剂盒(1～5ml)
编号：WE0177
英文名称：Blood Genomic DNA Midi Extraction Kit(1-5ml)
规格：50次
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻全血(用柠檬酸盐、EDTA或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)、血浆、血清、血沉棕黄层、骨髓、无细胞体液等样本中提取总DNA，包括基因组DNA，线粒体DNA及病毒DNA。本品采用柱式提取方法，可以处理1-5ml的全血，可纯化获得大小为100bp到50kb的DNA，纯化的DNA产量高、质量好，最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染，可直接用于PCR、荧光定量PCR、酶切和Southern Blot等实验。
试剂盒组成：
| 组份 | 50次 |
| Buffer RCL | 3×260ml |
| Buffer GR | 25ml |
| Buffer GL | 25ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 蛋白酶K | 50 mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 5ml |
| 吸附柱DL及收集管 | 50套 |
保存条件：Buffer RCL 2～8℃，其他组分室温(15～30℃)
自备试剂：无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入5ml 蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
3、本试剂盒最多可以提取1-5ml全血样品，如需提取大量血液样本请选用血液基因组非柱式提取试剂盒(#WE0176)。
4、第一次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请置于56℃水浴重新溶解。
6、如下游实验对RNA污染较敏感，可加入4μl DNase Free的RNase A(100 mg/ml)，RNase A本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0225S。
7、试剂盒中的Buffer RCL浑浊后不能继续使用。
操作步骤：
1、向离心管(自备)中加入1-5ml血液样品，加入3倍体积的Buffer RCL轻轻涡旋或颠倒混匀。
2、3000 rpm(～900×g)离心10分钟，小心吸弃上清。
3、向沉淀中加入400μl Buffer GR，重悬沉淀。
注意：如果下游试验对RNA敏感，可加入4μl RNase A(100 mg/ml)溶液，震荡15秒，室温放置5分钟。
4、1-2ml血液样本提取时,向以上溶液中加入40μl 蛋白酶K ，混匀；2-5ml血液样本提取时,向以上溶液中加入100μl 蛋白酶K ，混匀。
5、加入400μl Buffer GL，颠倒混匀15次，剧烈涡旋震荡至少1分钟。
注意：不要直接将蛋白酶K 直接加入到Buffer GL中。
6、70℃孵育10分钟，其间颠倒混匀数次。
注意：
1)如溶液未彻底清亮，补加适量蛋白酶K ，孵育。延长孵育时间至溶液完全清亮为止。
2)孵育10分钟DNA的产量已经达到最大，继续延长孵育时间对DNA产量和纯度没有影响。
7、加入400μl无水乙醇，颠倒混匀10次。短暂离心，使管壁和管盖上液体集中到管底。
8、将上步所得到的溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DL中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm(~～13400×g)离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如果提取样品是小鼠或猴子等血红素难以除去的种属的血液基因组，建议重复步骤9。
10、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤10。
11、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
12、将吸附柱置于一个新的离心管中，向吸附柱中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE或灭菌水，室温下放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度，可以将步骤12所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，12000rpm离心1min；若洗脱体积小于200μl，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg，推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件：室温(15～30℃)。
WE0170型DNA产物快速纯化试剂盒现货关键词：DNA产物快速纯化试剂盒,WE0170,DNA Product Quick Clean-up Kit
·50×TAE
编号：WE0216
规格：500ml
本品为50×Tris-乙酸缓冲液，是常用的核酸电泳缓冲液。
·RRX标记驴抗大鼠IgG(H+L)
编号：WE0369
英文名称：Donkey Anti-Rat IgG, Rhodamine Red-X Conjugated
规格：100μl
本产品为RRX标记的经抗原亲和纯化的驴抗体，特异识别大鼠IgG重链和轻链，检测灵敏度高，本底低。Rhodamine Red-X(RRX)是近年新开发的一种荧光素，被激发后产生较明亮的红色荧光。它比普通的荧光更加明亮，更加不容易淬灭，且背景更低。由于其发射波长介于Cy2(或FITC)和Cy5中间，且重叠较少，RRX可与Cy2和Cy5一起用于同一样本的多重标记检测。
免疫原：大鼠IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：0.05%叠氮*
荧光团：Rhodamine Red-X，Amax=570; Emax=590
应用范围：对于大多数实验(1：50-200)
·磁珠法游离DNA提取试剂盒
编号：WE0204
英文名称：MagDNA Free-Circulating DNA Extraction Kit
规格：96次
本试剂盒适用于从血浆、血清、羊水、淋巴液、尿液等无细胞体液中简单、高效的纯化回收游离DNA(Free circulating/Cell-free DNA)。在高盐存在时，游离DNA结合于硅基包被的Magbeads表面。漂洗后，高纯度的游离DNA被洗脱于Buffer EB或去离子水中。游离DNA的得率与样品类型、储存条件、时间以及个体间差异有很大关系。纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠，可用于定量PCR以及二代测序建库等下游实验。该试剂盒还可用于病毒DNA的提取。
试剂盒组成：
| 组份 | 96次 |
| Buffer KCL | 96ml |
| Buffer KCW1(浓缩液) | 72ml |
| Buffer KCW2(浓缩液) | 60ml |
| Buffer EB | 30ml |
| 蛋白酶K | 2×25mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 2×1.25ml |
| Magbeads PN | 4ml |
自备试剂：异丙醇、无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K *(代"粉")末中加入指定用量(1.25ml/25mg)的蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取率低。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer KCW1和Buffer KCW2中加入无水乙醇并做好标记。
4、Magbeads严禁冰冻、离心。冰冻和离心可能会对Magbeads造成不可逆的损害。
5、Magbeads在使用前一定要涡旋震荡20秒使其充分混匀。
操作步骤：
第一次使用前请检查Buffer KCW1和Buffer KCW2中是否已加入无水乙醇。
1、向1.5ml的离心管中加入20 ul 蛋白酶K ，之后加入300 ul血浆。
2、向上一步的离心管中加入300 ul Buffer KCL，涡旋震荡5秒钟使其充分混匀后将离心管放于56℃水浴锅中孵育10分钟。
3、将上一步的离心管从水浴锅中取出，短暂离心后室温放置5分钟。
4、向上一步的离心管中加入150 ul异丙醇，涡旋震荡混匀后短暂离心。之后向离心管中加入40 ul彻底混匀的Magbeads，涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡10分钟(震荡过程中确保Magbeads处于悬浮状态)或连续颠倒混匀10分钟。
注意：如果样品量较多，可将异丙醇与Magbeads提前按比例混匀，之后同时加入裂解产物中。
5、将上一步的离心管放于磁力架上静置1分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)，期间避免接触Magbeads。
6、将离心管从磁力架上取下，加入500 ul Buffer KCL后涡旋点震20秒或放于25℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于悬浮状态)。之后将离心管固定于磁力架上静置2分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后弃去溶液。
注意：如果样品为血清、羊水、淋巴液或尿液，Buffer KCL漂洗步骤可去除。
7、将离心管从磁力架上取下，加入750 ul Buffer KCW1后涡旋点震20秒或放于25℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于悬浮状态)。之后将离心管固定于磁力架上静置1分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后弃去溶液，期间避免接触Magbeads。
8、将离心管从磁力架上取下，加入750 ul Buffer KCW2后涡旋点震20秒或放于25℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于悬浮状态)。之后将离心管固定于磁力架上静置1分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后弃去溶液，期间避免接触Magbeads。
9、重复步骤8。
10、保持离心管固定于磁力架上，用移液器进一步去除离心管管底和管盖上的溶液，之后室温放置5-10分钟，使乙醇挥发干净。
注意：如果离心管壁上有液珠，可向离心管中加入800 ul无水乙醇。盖盖后颠倒离心管，之后彻底去除无水乙醇。
11、将离心管从磁力架上取下，加入30-100 ul Buffer EB或去离子水。涡旋震荡时Magbeads完全悬浮于洗脱液中后将其放入56℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡洗脱10分钟或放于56℃水浴锅中孵育10分钟，期间每隔3分钟涡旋震荡10秒钟。
12、将上一步的离心管放置于磁力架上静置2分钟，待Magbeads完全吸附后用移液器将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。
储存条件：室温(15～30℃)
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文献和实验相关实验
盒包括柱离心式DNA胶回收及PCR产物快速纯化试剂盒、柱离心式质粒小量快速抽提试剂盒、柱离心式高纯质粒小量快速抽提试剂盒、 柱离心式去内毒素超纯质粒小量快速抽提试剂盒、 质粒抽提、DNA胶回收、PCR产物纯化柱离心式多用途小量纯化试剂盒、柱离心式质粒中量抽提试剂盒 、柱离心式高纯度质粒中量抽提试剂盒、 柱离心式去内毒素超纯质粒中量抽提试剂盒 、核酸纯化小柱（质粒小抽、胶回收）、核酸纯化大柱（质粒中抽、大抽）等10个产品。 现因公司产品结构调整，转让该系列试剂盒的配方、生产工艺、生产设备。包教
过的 DNA 聚合酶增强了与模板的亲和度，其灵敏度更高，因而所需的模板量少。过低的模板量会减少 PCR 的产量，过高的模板量可能造成非特异性扩增，所以 DNA 模板量的优化尤为重要。 除了 gDNA、cDNA 和质粒 DNA，PCR 产物也可作为模板以获得更高的产量。但 PCR 产物中存在的残余反应组分（如引物、dNTP、盐和副产物）可能会影响下一次的 PCR 反应。所以推荐在下一次 PCR 前使用 PCR 产物纯化试剂盒将 PCR 产物先进行纯化。 【DNA 聚合酶】 DNA 聚合酶是PCR扩增中最关键
对于 Taq 酶扩增性能更强。 1. 选择热启动酶降低非特异性扩增 在使用 Taq 酶进行扩增时，有时会出现非特异性扩增，可能的原因可以从模板、引物、体系、程序中一一排查。如模板是否被污染，引物特异性如何，Mg2+浓度偏高等等，其中一个不可忽视的原因是 DNA 聚合酶的种类是否合适。如果排查了其它原因仍旧有非特异性产物，可以选择热启动酶重新实验，即可有效减少或消除体系中其它产物的积累。常用的热启动酶分为两类：一类是化学法修饰的热启动酶，如 Ace Taq ，预变性 95℃5 - 10 min 即可
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