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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括XH110型SABC(兔IgG)-POD免疫组化试剂盒哪里卖在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:XH110型SABC(兔IgG)-POD免疫组化试剂盒哪里卖
编号:XH110
产地:国产|进口
规格:100T
试剂盒组成:
1, 封闭液(5%BSA):10ml。
2, 3% H2O2:10ml。
3, Bio-羊抗兔IgG:浓缩液100ul。
4, SABC-POD:浓缩液100ul。
5, 稀释液:30ml。
6, 显色液(1ml+1ml):20×DAB显色液A,20×DAB显色液B。
试剂盒保存:如果一段时间不使用,请将所有试剂存放于-20℃,如经常使用,可将封闭液,封闭液和20×DAB显色液B存放于2-8℃以方便使用
试剂盒简介:
本试剂盒适合于一抗为兔IgG的免疫组化实验. DAB显色。
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
自备试剂:
1.粘片剂多聚赖*酸
2. 0.01 M PBS(pH7.2-7.4)
3. 0.01M柠檬酸*缓冲液
4、苏木素
实验步骤: 微量试剂请离心后使用
以石蜡切片为例
1. 切片常规脱蜡至水(三次二甲*,三次乙醇)。
2. 3%H2O2室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
3.可选步聚:a、热修复抗原,将切片浸入0.01M 柠檬酸*缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.4)洗涤1-2次。b、酶消化,滴加消化液,37℃10分钟, PBS(pH7.2-7.6)洗涤2-3次。c、跳过此步,直接进入下一步。
4. 滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 不洗。
5.用稀释液将一抗(如兔抗IL-10)按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗,37 ℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间。)
6.根据使用量,用稀释液将Bio-羊抗兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul Bio-羊抗兔IgG浓缩液,混匀即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加Bio-羊抗兔IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。
7.根据使用量,用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-POD浓缩液,混匀即成SABC-POD工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-POD工作液,20-37℃,30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗5分钟×4次。
8.DAB显色:根据用量,用PBS(pH7.2-7.4)配制,按1mlPBS加入50ul 20×DAB显色液A,加入50ul 20×DAB显色液B 。混匀后加至切片。室温显色, 镜下控制反应时间,一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
9.苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。
对于细胞片,常规固定后,PBS漂洗两次,再用0.5%Txiton X-100室温20分钟,PBS漂洗两次,3%H2O2处理15分钟;PBS漂洗两次,下接上面第4步。
对于冰冻切片,固定后,可用PBS漂洗两次,再接上面第二步。
注意事项:如果染色背景过高,在SABC反应之后,DAB显色之前,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后DAB显色。
因为免疫组化指标众多,标本不一,此步骤仅作参考。
除XH110型SABC(兔IgG)-POD免疫组化试剂盒哪里卖外,我公司正在打折促销以下产品:
黄素腺嘌呤二核苷酸二*盐 PUC19 84366-81-4
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碱式碳酸* Hydroxybenzotriazole monohydrate 56378-72-4或39409-82-0
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E0605 脱纤维裂解马血(无菌)
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L-天冬酰胺一水 IUPAC 5794-13-8
XTT*盐 4-Hydroxycinnamic acid 111072-31-2
BTN130427 丁基硫介质 Butyl-S Medium
柠檬酸* 1,3,5-Tribromobenzene 6100-05-6
F020219 兔抗牛IgG抗体 Rabbit Anti-Bovine IgG
乳酸脱*酶(兔肌) Sesbania Gum 9001-60-9
1476-53-5 Novobiocin Sodium Salt 新生霉素
XH110型SABC(兔IgG)-POD免疫组化试剂盒哪里卖关键词:SABC(兔IgG)-POD免疫组化试剂盒,百奥莱博,XH110
·载体两性电解质PH3.5-10
编号:XH069
规格:12ml
别名:两性电解质两性电解质载体(ph3.5-10):Ampholyte solution、Ampholine。
性状;近无色至浅黄色透明液体,有粘性,为一中相对分子质量300-1000的人工合成的多*基多羧酸系列两性化合物的复杂混合物。
溶度:为40%的溶液
用途:用于生物大分子蛋白质和酶的等电聚焦电泳
储存:充氮密封4℃保存。保持期,两年。开启后请尽快用完。
·去内毒素质粒DNA提取试剂盒
编号:XH012
规格:50T/200T
原理简介
本试剂盒在常规质粒提取试剂盒的基础上改进而来,增加内毒素清步骤,提取的质粒可用于一些要求更高的实验,如转染。
本试剂盒(以200T为例)可以用200小次或者10大次提取。
注意事项
1.溶液Ⅱ低温时可能出现析出和沉淀,可以37度水浴几分钟即可恢复澄清透明。用完请及时盖紧盖子。
2.溶液Ⅰ中加入RNase 后请放2-8度保存,如果长久不用(如一个月),可-20度冻存,或者按照比较分次加入。
3.可根据实验情况中量或者大量提取,加入的试剂等比放大。
4.内毒素清除剂在常温下出现面混浊现象,为正常,在2-8℃放置一段时间混浊会消失。
5.本试剂盒在去除内毒素的过程中会损失少量质粒,因而相对于常规提取,本试剂盒得率偏低。
操作步骤(以小量提取为例,中提或者大提可等比例加入)
在溶液Ⅰ中加入RNaseA,混匀,2-8度保存。
1.取过夜菌1-5毫升,5000g离心1分钟收集细菌沉淀,弃上清(可重复多次收集于一管中,收集量可考虑菌液浓度与质粒拷贝数),如为阳性细菌,可加入100mg/ml的溶菌酶悬浮菌液,37度处理30分钟,离心,收集沉淀。
2.在收集的菌液中,加入200ul溶液I,重悬细菌沉淀。确保沉淀完全散开,无可见细菌团块(可vortex 5-10秒或更长时间)。室温放置2-3分钟。
3.每管加入200ul溶液Ⅱ(如有沉淀,可37度水浴),轻轻颠倒离心管4-6次,使细菌完全裂解,溶液透明。放置2-3分钟,不过超过5分钟。但也不要混匀后立刻加入溶液Ⅲ。
4.放置2-3分钟后,每管加入200ul溶液III,随即颠倒离心管4-6次混匀,可见白色絮状物产生。
5.最高速(13,000rpm左右)室温离心5分钟。
6.将上清转移到新的离心管中,如有沉淀,可再次离心。
7.加入上清1/5体积冰预冷的内毒素清除剂,振荡混匀,溶液变浑浊,冰浴2min至溶液变清亮。
8.37℃水浴2min,不时振荡,溶液又变浑浊。12000rpm室温离心2min,溶液应分为两相,上层水相含质粒DNA,下层油状相含内毒素。
9.将含质粒DNA的上层水相转移至新管,弃下层油状相,注意不要吸入油状相。重复抽提三次,即重复步骤7-9三次。
10.在得到的上清中加入等体积的结合液,再加入等体积的无水乙醇,混匀(上清:结合液:无水乙醇=1:1:1)
11.玻璃奶摇匀。取20ul混匀的玻璃奶加入上面的混合液中,混匀。室温放置5分钟,期间颠倒2次。
12.10000转/分钟离心1分钟,倒掉上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。
13.室温放置10分钟(如果为大提,请延长放置时间到30分钟,此步为去除残余酒精,以免影响下游实验),加入30-50ulTE缓冲液混匀溶解,55℃水浴5分钟。离心,取上清转移到一新的离心管中。此为所提质粒。
14.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
XH110型SABC(兔IgG)-POD免疫组化试剂盒哪里卖关键词:SABC(兔IgG)-POD免疫组化试剂盒,百奥莱博,XH110
·Pfu DNA Polymerase
编号:XH022
规格:500U/2500U
产品简介:
我们生产的Pfu DNA Ploymerase(高保真TAQ酶)是从克隆有Pyrococcus furiosis DNA Ploymerase基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出来的重组蛋白,其分子量为90kDa。由于Pfu酶具有3’→5’核酸外切酶活性,它能纠正DNA扩增过程中产生的错配,而传统的Taq酶却不能,其它耐热DNA Polymerase如Vent、Deep Vent、Tli、UITma等虽具有校正功能,但Pfu酶是目前已发现的所有耐热DNA Polymerase中出错率最低的。Pfu酶无5’→3’核酸外切酶活性,PCR反应中的延伸速度一般为0.5-1kb/分钟,比Taq酶要低。Pfu 酶比Taq酶热稳定性更好,95℃ 1小时仍保持90%以上的活性,对于GC含量很高的模板,变性温度可以提高到98℃而不影响其活性。Pfu酶的PCR产物为平末端,可加A处理再与T-载体连接或使用平末端克隆载体。一般用于DNA的高保真扩增,如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变分析(SNP)和末端补平等。
注意事项:
1、Pfu DNA Ploymerase应储存于-20℃,有效期12个月。
2、取Pfu DNA Ploymerase做PCR反应时,请用高压灭菌处理过的吸头。
3、用Pfu酶扩增时,引物的纯度要求较高,引物长度大于18个碱基,Tm值在55-80℃之间,引物浓度在0.1-0.5uM之间,比Taq酶略高。
活性定义:
1单位(U) Pfu DNA Polymerase活力定义为在74℃,30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
·FITC标记套装
编号:XH086
规格:一套
保存条件:FITC -20℃保存,其他常温保存。
产品说明:本套装是将FITC标记的常用试剂集合为一体而成。适合于蛋白等含有*基物质的标记。特别是抗体的标记。
如果待标记物分子量太小(如小于5KD),可能并不适合用此套装(主要是后期纯化去除未标记上的FITC,可选用透析袋)。
标记原理:在高PH下FITC可蛋白等分子的*基相连,形成共价健。
操作方法:
一, 标记量的计算:FITC分子量为389.4。一般为FITC:待标记物=10:1左右。比如抗体IgG分子量一般为150-160KD。则1mg HRP可标记抗体40mg之间。
二, 计算好各步反应时间。作好开始标记的准备工作。因为标记是在PH为9.5的条件下反应,如果待标记物本身盐含量很低并且缓冲力差,如生理盐水,可等二天再准备。如果不确定,将0.2M PH9.5 CB稀释20倍,作为透析液,将待标记物装入透析袋中4℃透析过夜,透析袋适当留长约1ml体积的量以备第二天加入酶(透析袋用双蒸水清洗三次,祥细使用请见附录)。
三, 如果样品缓冲能力很小(固体可用水溶解),加入1/20体积的0.2M PH9.5 CB,混匀。
四, 准备层析柱(使用方法见附录)。
五, 在样品准备好的情况下,称量2mg左右FITC(请不要一次称量过小,称量过小时,误差会很大),加入1ml DMSO溶解。取适量溶解好的FITC,加入准备好的样品迅速混匀。避光常温反应两小时或者4℃反应过夜。
六, 加入1/20体积的1M NH4Cl,避光4℃反应两小时。
七, 过柱。请保证总溶液体积不超过总体积的1/5。比较理想的是在1/10。也就是10ml凝胶,最多过柱1ml的标记液(此步也可以改为透析。一般避光透析两天左右,到没有明显黄色出来为止)。
附透析袋使用方法:
本透析袋已预处理过,用双蒸水清洗后将水用适当吸一下。就可直接使用。透析袋上下都可以用铁夹,但如果铁夹不够用,下部可用细线或者其他的透析袋夹。
将透析袋轻轻的折上两到三折。用线或者透析袋夹封住,上面支开,加入待透析物,留一定量的空气在顶上,并小心的折一折,用铁夹夹住,轻轻的挤压,如没发现有液体流出,可放入透析液中。一般透析可用纯净水瓶去顶使用。用一次性筷子或者其他合适物穿过铁夹,将透析袋吊在透析液中,补充透析液,使透析液盖过透析袋中的液面而不要淹过铁夹下面。
分子筛柱使用方法:
取空柱,加入双蒸水冲洗三次,找一合适的地方架好,下面收集废液,将Sephadex G-25取出摇匀,轻轻的沿壁倒入柱中(用去尖移液器加入也可以),等液体流出少量时,不停的补加凝胶到一合适的体积。一般加到10ml左右。在上口留出1-2ml空间。灌完胶后,用三倍体积的双蒸水冲洗(从上面加入,下面自动流出),再用合适的缓冲液冲洗三倍体积(如生理盐水或者PBS等)。
当最后一次加缓冲液后,把柱上层弄平整。等上层溶液完全流完,就可以加入待过柱的标记液。用去尖吸头小心的中空滴加,如果一次加不完,等流出少量后再加,一直加完。待标记物完全流干后,再加入少量约3-5滴缓冲液(如生理盐水或者PBS等),流完再加,如此三次左右,接着就可以一次加入1-2ml缓冲液(如生理盐水或者PBS等)。加到一定体积后,可以看到柱中黄色会分层。收集下层溶液,加入适当的稳定剂等,定溶。备用。
用过的凝胶可以丢弃或者重复使用(如果重复使用,须用大量的缓冲液冲洗,待上层黄色完全流走。折中的方法是小心的将上层黄色胶挖掉。流下层的回收)
我公司生产供应销*(代"售")的细胞及免疫学产品正全系列现货促销,满分期待您的垂询选购XH110型SABC(兔IgG)-POD免疫组化试剂盒哪里卖。
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