北京高纯度质粒重量提取试剂盒现货供应

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京高纯度质粒重量提取试剂盒现货供应，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京高纯度质粒重量提取试剂盒现货供应
编号：ALH083
规格：20次
英文名：Plasmid Extraction Kit (solution type, no endotoxin, transfection grade)
品牌：百奥莱博
产地：北京
本试剂盒适用于中量高纯或者转染级质粒制备和BAC/PAC大型质粒制备。用碱裂解法从培养菌中提取质粒DNA，采用独特的溶液配方和内毒素清除试剂，只需要几次简单离心去除蛋白质、多糖、内毒素、RNA等杂质，获得高质量的质粒DNA。纯化DNA的OD260/280通常在1.8左右，得到的质粒可直接应用于细胞转染甚至动物体内实验等对DNA纯度要求很高的工作中。纯化后期过程均在Eppendorf管中操作，方法简单，不需特殊设备，无需过柱，不用酚*仿抽提；基本可完全回收细菌裂解释放出的质粒，不必担心质粒DNA的丢失。本方法提取纯化质粒DNA，对质粒损伤小，即使是10kb甚至100kb以上的大型质粒或超大型BAC/PAC质粒，只要碱裂解法能够提取，就可以有效纯化。可选择任意小体积溶解质粒，浓度可高达3μg/μl。

试剂盒组份(20次)：
RNaseA(10mg/ml)-————————0.75
溶液P1—————————————65ml
溶液P2—————————————50ml
溶液PⅢ-————————————50ml
杂质清除剂A-——————————1.5ml
杂质清除剂B-——————————15ml
内毒素清除剂——————————5ml

试剂盒特点：
1.不需要使用有毒的*酚，*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。快速、 方便、从50-70 ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中，可快速提取100μg -250μg纯净的高拷贝质粒DNA，提取率达80-90 %。
2.获得的质粒产量高，浓度高，超螺旋比例高，纯度好，可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
3.内毒素含量极低（<0.1 EU/μg DNA），可直接应用于细胞转染。

注意事项
1. 提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒，应加大菌体使用量，同时按比例增加P1、P2、PⅢ的用量。
2. 提取大质粒时操作动作要轻柔，应该使用剪大了开口的吸头，防止机械剪切对DNA 的损坏。
3. DNA 沉淀液沉淀离心后，可能看不到明显沉淀。如未见沉淀，担心DNA 丢失，可保留上清液，待完成全部操作后电泳鉴定，以确定是否获得终产物（数百微克DNA 离心沉淀在管的侧壁上，可能无法看到明显团块）。
4. 得到的质粒DNA 可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1 相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可能为2 条或者多条DNA 条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成，与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过95%。
5. 质粒DNA 确切分子大小， 必须酶切线性化后，对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的质粒，泳动位置不确定，无法通过电泳知道确切大小。

储存条件：室温，有效期12个月。

本品别名：无内毒素质粒中量提取试剂盒|细胞转染用质粒制备试剂盒|高纯度质粒重量提取试剂盒|细胞转染质粒提取试剂盒|无内毒素培养菌质粒提取试剂盒

关于北京高纯度质粒重量提取试剂盒现货供应的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·组织细胞总RNA提取试剂盒(柱式吸附去除DNA)(非TRIzol法)
编号：ALH019
英文名称：Total RNA Extraction Kit From Cell & Tissue
规格：20次|50次
本试剂盒适用于快速提取动物细胞和易裂解动物组织总RNA，是在无*酚、*仿RNA快速提取技术基础上，又采用基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留，得到的RNA不需要DNase消化，可直接用于PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，然后裂解混合物通过一个基因组DNA清除柱，基因组DNA被清除而RNA穿透滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

产品特点：
1.完全不使用有毒的*酚，*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。
3.基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留，得到的RNA不需要DNase消化，可直接用于PCR、荧光定量PCR等实验。
4.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，基本无DNA残留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。

试剂盒组分：

 

组份	20次	50次
裂解液RLT Plus	20ml	50ml
去蛋白液RW1	15ml	40ml
漂洗液RW	5ml	10ml
RNase-free H2O	10ml	10ml
70%乙醇	4ml	9ml
基因组DNA清除柱和收集管	20套	50套
吸附柱和收集管	20套	50套

储存条件：室温，有效期一年。

注意事项：
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱和和RNA吸附柱处理能力，否则造
成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大，例如胸腺脾脏DNA含量丰富，超过5mg就会超过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富，超过3x106细胞就会超过柱子吸附能力。所以开始摸索实验条件时，如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量，如细胞不超过3-4x106，组织不超过10mg。将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
3. 裂解液RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 预防RNase 污染，应注意以下几方面：
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA 在裂解液RLT Plus 中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4 小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 分钟，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。4) 配制溶液应使用无RNase 的水。（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC 至终浓度0.1%( v/v)，37℃放置过夜，高压灭菌。）
5. 关于DNA 的微量残留：
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留（DNase 消化也无法做到100%无残留），本试剂盒由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 清除柱技术，绝大多数DNA 已经被清除，不需要DNase 消化，可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR，我们建议在进行模板和引物的选择时：
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理以提高效果。本试剂盒还可以用于DNase I 处理后的RNA清洁,请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前，直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
6. RNA 纯度及浓度检测：

完整性： RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件：胶浓度1.2%；0.5×TBE 电泳缓冲液；150v，15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA，电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb，分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍，否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。

纯度：OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的参考指标。高质量的RNA，OD260/OD280 读数（10mMTris, pH7.5）在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品，假定在10mM Tris，pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间，在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间，但这并不表示RNA 不纯。

浓度：取一定量的RNA 提取物，用RNase-free 水稀释n 倍，用RNase-free 水将分光光度计调零，取稀释液进行OD260, OD280 测定，按照以下公式进行RNA浓度的计算：终浓度（ng/μl）= (OD260)×(稀释倍数n)×40。

本制品别名：组织总RNA提取试剂盒|组织总RNA分离试剂盒|组织总RNA纯化试剂盒|细胞总RNA提取试剂盒|细胞总RNA分离试剂盒|组织总RNA纯化试剂盒


北京高纯度质粒重量提取试剂盒现货供应关键词：无内毒素质粒中量提取试剂盒,高纯度质粒重量提取试剂盒,细胞转染质粒提取试剂盒,细胞转染用质粒制备试剂盒

RFT197 蛋白酶抑制剂混合物(真菌或酵母蛋白提取用) Protease inhibitor cocktail for fungal and yeast extracts
BTN131072 即用型BSA蛋白标准品系列 Instant BSA Standard
HR0087 血细胞蛋白提取试剂盒 Blood cell protein extraction kit
YT892 Hoechst 33258细胞蓝色荧光染料 Hoechst 33258
BTN130606 全血直接扩增Taq DNA聚合酶 Blood-Direct Taq Polymerase
BTN90602D DNA marker(λDNA/EcoR I) DNA ladder(λDNA/EcoR I)
SV1445 6-Tube 磁性分离架
YT239 p53凝胶迁移探针(10μM) p53 Probe For EMSA(10μM)
KFS320 CCK-8法细胞增殖检测试剂盒
SY0563 Hoechst 33342 染液(1mg/ml)
SV0677 SbfI-HF限制性内切酶 SbfI-HF Restriction Endonuclease
WE0227 人类cDNA Human Placenta cDNA 
HR0552 Rhodamine 123染色液 Rhodamine 123 staining solution
SY0199 ERSE-GFP报告基因质粒 ERSE GFP Reporter Plasmid
RFT034 RNA提取试剂 RNA Extraction Reagent
KFS173 *离子荧光探针 MEQ (6-甲氧-N-乙基喹*(代"啉")碘)(CoFM FACS) MEQ(MQAE)
ALH609 高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料) Fast&HiFi PCR MasterMix
北京高纯度质粒重量提取试剂盒现货供应关键词：无内毒素质粒中量提取试剂盒,高纯度质粒重量提取试剂盒,细胞转染质粒提取试剂盒,细胞转染用质粒制备试剂盒


·细菌RNA提取试剂盒
编号：ALH027
英文名称：Bacterial total RNA Extraction Kit
规格：20次|50次
本试剂盒适用于快速提取细菌总RNA。采用独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的*酚,*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。
4.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，基本无DNA残留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。

试剂盒组份：

组份	20次	50次
TE (PH8.0)	6ml	6ml
溶菌酶	20mg	20mg
裂解液RLT	20ml	50ml
去蛋白液RW1	15ml	40ml
漂洗液RW	5 ml	10ml
RNase-free H2O	10ml	10ml
吸附柱和收集管	20套	50套

注意事项：
1.第一次使用前请先在漂洗液RW瓶加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
2. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 需要自备乙醇。
4. 裂解液RLT和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 预防RNase 污染，应注意以下几方面：
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA在裂解液RLT中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时，塑料器皿可在0.5M NaOH 中浸泡10分钟，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase 的水。（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC 至终浓度0.1%( v/v)，37℃放置过夜，高压灭菌。）
6. 关于DNA 的微量残留：
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本公司的RNA 提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜，在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留（一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见）影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时：
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁,请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前，直接在吸附柱上进行DNase I处理。请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
7. RNA纯度及浓度检测：
完整性： RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件：胶浓度1.2%；0.5×TBE 电泳缓冲液；150v，15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA，电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb，分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍，否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。

纯度：OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA，OD260/OD280 读数（10mMTris, pH7.5）在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品，假定在10mM Tris，pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间，在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9
之间，但这并不表示RNA 不纯。

浓度：取一定量的RNA 提取物，用RNase-free 水稀释n 倍，用RNase-free 水将分光光度计调零，取稀释液进行OD260, OD280 测定，按照以下公式进行RNA浓度的计算：终浓度（ng/μl）= (OD260)×(稀释倍数n)×40

储存条件：室温，有效期12个月

本制品别名：细菌RNA提取试剂盒|细菌总RNA提取试剂盒|细菌RNA纯化试剂盒|细菌RNA抽提试剂盒

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