人单链选择性单功能尿嘧啶-DNA糖基化酶-hSMUG1

产品及特点：

人类单链选择性单功能尿嘧啶-DNA 糖基化酶 (hSMUG1，Human Singlestrand-selective Monofunctional Uracile-DNA Glycosylase) 作用于单链和双链 DNA 上的脱氧尿嘧啶和在 C5 位携带氧化基团的脱氧尿嘧啶衍生物，如 5-羟基尿嘧啶、5-羟甲基尿嘧啶和 5-甲酸基尿嘧啶。其反应示意图如下：

具体有下列特点：

1. DNA 的氧化损伤研究

2. 单细胞凝胶电泳 (彗星实验)

人单链选择性单功能尿嘧啶-DNA糖基化酶-hSMUG1性单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时从含有单一 dU 位点的34 bp 双链寡核苷酸上催化切除 1 pmol 脱氧尿嘧啶所需的酶量。

反应条件

1X Buffer+BSA [10 mM Bis Tris 丙烷-HCl，10 mM MgCl2 和 1 mMDTT， (pH 7.0 @ 25℃)]。加入 100 μg/ml BSA。37℃ 温育。

Buffer 成分

10 mM Tris-HCl，250 mM NaCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，200 μg/ml BSA，50% Glycerol，0.15% Triton® X-100，pH 7.4 @ 25℃

热失活

65℃ 加热 20分钟。

备注

hSMUG1 作用于 5- 羟甲基尿嘧啶的活性是作用于尿嘧啶的 50%；作用于单链 DNA 的活性是作用于双链 DNA 的 50可溶型TMB显色底物试剂    500ml
沉淀型TMB显色底物试剂    100ml
沉淀型TMB显色底物试剂    500ml
HRP-DAB底物显色试剂盒    60ml
超敏可逆蛋白显色试剂    100ml
碱性磷酸酶底物显色试剂盒(BCIP/NBT)    100 ml
胞浆总蛋白提取试剂盒    50T    
植物细胞质膜提取试剂盒    50T    
植物蛋白提取试剂盒    50T    
细菌总蛋白提取试剂盒    50T    
酵母总蛋白提取试剂盒    50T    
胞浆和核蛋白分步提取试剂盒    50T    
膜蛋白提取试剂盒    50T    
动物组织蛋白裂解液    50ml
真核细胞蛋白裂解液    50ml    
RIPA裂解液     50ml
RIPA裂解液     100ml    
包涵体溶解液    50ml
包涵体溶解液    100ml    
蛋白复性液    50ml
蛋白复性液    100ml
蛋白标准(5mg/ml BSA)    1ml    
PMSF(100mM)    1ml
5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液    250ml
SDS-PAGE电泳液(10X)    100ml
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)    2ml
非变性PAGE蛋白上样缓冲液(5X)    2ml    
10%过硫酸铵    1.5ml
30% 丙烯酰胺 (29:1)    100ml
40% 丙烯酰胺 (39:1)    100ml
0.5M DTT    2ml