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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,4℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Phosphotase Inhibitor Cocktail 1
- 库存:
大量
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 规格:
1 mL/盒
产品及特点
组织/细胞裂解时会释放出大量内源性蛋白磷酸酶,催化磷酸化蛋白的去磷酸化,导致不同于正常生理状态的差异,影响实验结果。因此,加入外源性蛋白磷酸酶抑制剂,抑制磷酸化蛋白的去磷酸化,维护蛋白质的磷酸化状态,是Western Blot、免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质、和蛋白激酶活性测定等研究部可缺少的一步。本产品就是针对这一用途开发:
蛋白磷酸酶抑制剂混合液1-Phosphotase Inhibitor Cocktail 11. 即开即用,不需要单独购买每个成分再配制。
2. 抑制谱广,由多种蛋白磷酸酶抑制剂组成,能特异性地抑制丝氨酸磷酸酶、苏氨酸磷酸酶、及各种碱性磷酸酶。
3. 本产品溶剂为DMSO。与各种细胞裂解液兼容,在裂解液中加入1/100体积即可。
低温运输,4℃保存,有效期一年。80930-200 微量样品核酸提取试剂盒 200次 1990
DNA样品污染去除
60607-100 液相内毒素清除剂 100次 190
60607-500 液相内毒素清除剂 500次 590
60608-100 固相内毒素清除剂 100g 150
60608-500 固相内毒素清除剂 500g 690
51203-1.5 非酶RNA清除剂1.0 1.5ml 70
60912-1.5 非酶RNA清除剂2.0 1.5ml 140
60801-30 柱式腐殖酸清除剂 30次 190
60801-100 柱式腐殖酸清除剂 100次 490
60804-1 PCR抑制物清除剂 1ml 290
90205-100 RNase A干粉 100mg 120
90205-500 RNase A干粉 500mg 590
3160-1.5 RNase A溶液 1.5ml 90
60309-1.5 RNase A溶液 1.5ml 30
81106-100 蛋白酶K干粉 100mg 360
80911-1.5 蛋白酶K溶液 1.5ml 150
其它
60911-50 硅胶膜离心吸附柱系列(微量) 50套 见表
90303-5 硅胶膜DNA离心吸附柱系列(大提) 5套 100
60606-500 硅胶膜离心吸附柱再生液 500次 190
60408-50 通用洗柱液 50ml 50
70705A-5 DNA洗脱液 5ml 20
70705B-5 DNA洗脱液 5ml 30
电泳套装
60904-10 一站式RNA电泳套装 10次 190
80701-30 超快无毒RNA电泳套装 30块 890
70606-30 一站式miRNA PAGE电泳套装 30次 890
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文献和实验化状态进行有效保护。无数经验和实验证据表明:使用 western blot 检测磷酸化蛋白时,一定要在细胞裂解液中加入蛋白酶抑制剂,还要加入一定量的磷酸酶抑制剂,否则即使出来条带也会很浅,给后继定量分析造成困难。磷酸酶抑制剂可以自己配制,也有商品化的 cocktail 可直接购买。像 erk1/2 的磷酸化有 THR 磷酸化和 tyr 磷酸化,所以要有 ser/thr 磷酸酶抑制剂和 tyr 磷酸酶的抑制剂。一般自己配制略显麻烦,考虑的因素比较多,效果不一定好,很多商品化的 cocktail 操作
signaling公司的Phospho-PI3K p85 (Tyr458)/p55(Tyr199) 我自己分析没有条带无非是细胞状态不好,或者抗体不好,不知道还有没有可能是没有加磷酸化酶抑制剂,以至于磷酸化的蛋白被去磷酸化了? 谢谢啦~ yhwangcams 检测内参蛋白如GAPDH,ACTIN,TUBULIN是否成功? 用PLB裂解细胞得到的蛋白适合做REPORTER,做WESTERN不太合适。建议可以用其他BUFFER裂解蛋白。
混匀后即可使用,最好现用现配。 封闭液 脱脂奶粉/BSA 5g/3g TBST 100ml 4. SDS-PAGE胶配制: 三、实验方法: 1. 蛋白抽提 预冷RIPA蛋白抽提试剂,加入蛋白酶抑制剂Protease inhibitor cocktail (Roche)(磷酸化蛋白需要同时加入磷酸酶抑制剂)。将组织按照10
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