- ¥2090
- Ybscience
- 中国/上海
- YB130681-0.83
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Universal miRNA Cloning Linker
- 库存：
大量
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 规格：
0.83 nmol/盒
产品及特点
5 端腺苷化，3 端封闭的寡核糖核苷酸可用于Bartel 方法中短片段 RNA 分子的克隆 (1) 。RNA 连接酶可以识别“活化”的腺苷化寡核糖核苷酸，无需 ATP，即可将其 5 端与第二条单链 RNA 的 3 端 OH 共价连接。利用此 5 端腺苷化，3 端封闭的寡核糖核苷酸，加入 T4 RNA 连接酶 2，截短型、T4 RNA 连接酶 2，截短型K227Q 或 T4 RNA 连接酶 1 (有/无 ATP) ，只能与核酸混合物中的目的寡核苷酸连接。本产品可以用于小RNA克隆、miRNA文库构建。本产品原理如下：
腺苷化的 oligo 序列：
5´-rAppCTGTAGGCACCATCAAT-NH2 3´。
建议工作浓度：100μM
通用 miRNA 克隆接头-Universal miRNA Cloning Linker参考文献
(1) Lau et al. (2001) Science , 294, 858–856.
(2) Pfeffer, S., Lagos-Quintana, M. and Tuschl, T. (2005). Current Protocolsin Molecular Biology, John Wiley & Sons, Inc. (26.4.14).90402-50 微量蛋白胶回收试剂盒 50次 490
90403-5 中量蛋白胶回收试剂盒 5次 590
蛋白电泳染料
61204-10 一步式PAGE染液 10次 190
80812-250 考马斯亮蓝染液 250ml 190
101003-0.5 纳克级蛋白凝胶荧光染料 0.5ml 490
100607-1000 超快蛋白银染试剂盒 1000ml 询价
100811-10 质谱兼容蛋白银染试剂盒 10次 询价
Western Blot
70101-125 瞬间可逆蛋白印迹膜染液 125 190
81206 氨基黑染膜液 询价
100924 丽春红S染膜液 询价
81215A-20 一站式免疫印迹套装 20次 1900
81215B-20 一站式免疫印迹套装 20次 1900
100928-20 移湿法电转缓冲液 20L 690
100929-20 半干法电转缓冲液 20L 690
81210-200 Western 印迹膜封膜液 200ml 90
81208-100 Western Blot抗体稀释液 100ml 90
80813-50 Western印迹膜抗体清除剂 50ml 90
80813-200 Western印迹膜抗体清除剂 200ml 190
81223-100 增强型DAB显色试剂盒 100ml 190
81224-100 BCIP/NBT底物显色试剂盒 100ml 190
100214-100 预混型BCIP/NBT溶液 100ml 240
91101A-100 一管式TMB显色液 100ml 190
91101B-100 一管式TMB显色液 100ml 190
100887-100 BCIP 询价
100888-250 NBT 询价
TS003 Illumina高通量DNA测序服务 价格见具体项目
TS004 Roche高通量DNA测序 价格见具体项目
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文献和实验的mirVana离心柱试剂盒来富集小RNA组分。 Q2：你如何有效克隆miRNA? Peng Jin(埃默里大学) 它取决于克隆miRNA的目的。如果是miRNA发现或高通量测序，我们会使用5’和3’接头连接，来产生小RNA库。如果是已知的miRNA，我们想了解它的表达，一般会用PCR扩增包含目的miRNA的DNA片段，然后在适当的载体上验证它的表达。 Winston Kuo(哈佛大学) 在克隆miRNA时，有几个问题。如果你想克隆miRNA周围
所特有的，下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率，把引物二聚体调整到越小越好；探针法则需要设计荧光探针，这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个：完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上；这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置，根据自己试验情况而定，本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
miRNA and shRNA Expression Vectors Based on mRNA and miRNA Processing
vectors, designated pSM155, and pSM30 that take into consideration of miRNA processing and RNA splicing by placing the miRNA-based artificial miRNA expression cassettes inside of synthetic introns. These vectors significantly improved the expression
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