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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Universal miRNA Cloning Linker
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
0.83 nmol
5' 端腺苷化,3' 端封闭的寡核糖核苷酸可用于Bartel 方法中短片段 RNA 分子 的克隆 (1) 。RNA 连接酶可以识别“活化”的腺苷化寡核糖核苷酸,无需 ATP,即 可将其 5' 端与第二条单链 RNA 的 3' 端 OH 共价连接。利用此 5' 端腺苷化,3' 端 封闭的寡核糖核苷酸,加入 T4 RNA 连接酶 2,截短型、T4 RNA 连接酶 2,截短型 K227Q 或 T4 RNA 连接酶 1 (有/无 ATP) ,只能与核酸混合物中的目的寡核苷酸连 接。本产品可以用于小RNA克隆、miRNA文库构建。
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文献和实验miRNA和3个潜在的目标靶基因完全互补(这些scarecrow基因编码潜在的转录因子),尽管目前还不清楚这些基因是否就是miRNA的目标靶,这仍是第一次发现miRNA和其潜在的目标靶完全互补,也提示miRNA可能包含和siRNA类似的作用方式。 识别miRNAs的方法 多个研究小组采用生物化学结合是生物信息学的方法开展对miRNAs的研究工作。由于据推测都是由Dicer酶降解RNA得到的,21―23个碱基大小、有5'端磷酸基和3'羟基的RNA片断,有的实验室采用改良的定向克隆方法来筛选具有相同特征
的mirVana离心柱试剂盒来富集小RNA组分。 Q2:你如何有效克隆miRNA? Peng Jin(埃默里大学) 它取决于克隆miRNA的目的。如果是miRNA发现或高通量测序,我们会使用5’和3’接头连接,来产生小RNA库。如果是已知的miRNA,我们想了解它的表达,一般会用PCR扩增包含目的miRNA的DNA片段,然后在适当的载体上验证它的表达。 Winston Kuo(哈佛大学) 在克隆miRNA时,有几个问题。如果你想克隆miRNA周围
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