DNA去磷酸化试剂盒-DNA Dephosphorylati

产品及特点

分子克隆时，载体的自连极大降低了连接效率，而对载体DNA两个5′端的-PO4基团进行去磷酸化处理可以抑制自连反应。此外在进行DNA或RNA5′端标记前，也需要将其本来的-PO4基团去除再加上标记基团。本公司开发的DNA去磷酸化产品就是针对这一目的而开发。其反应示意图如下：

它具有下列特点：

1. 基于细菌碱性磷酸酶，反应在较高温度进行，效率更高。

2. 把DNA和RNA 5′端的-PO4基团变成-OH基团，丧失连接能力。

3. 模板可以是单链，也可以是双链，既可以是DNA，也可以是RNA。

4. 处理后的核酸纯化后可以直接用于连接反应和标记反应。

5. 本产品足够20次去磷酸化实验。

DNA去磷酸化试剂盒-DNA Dephosphorylation Kit使用及效果

在离心管中加入不超过10 pmolDN**段、10×去磷酸缓冲液、细菌碱性磷酸酶超纯水，65℃反应30分钟。酚氯仿抽提去除酶活性，乙醇沉淀DNA待用。2×HotStart Taq PCR MasterMix（不含染料）    0.5ml
2×HotStart Taq PCR MasterMix（不含染料）    5ml
超纯 dNTP Mixture(2.5 mM each)    1ml
超纯 dNTP Mixture(2.5 mM each)    5×1ml
超纯 dNTP Mixture(10 mM each)    1ml
超纯 dNTP Mixture(10 mM each)    5×1ml
dATP 100mMsolution    0.25 ml
dCTP 100mM solution    0.25 ml
dGTP 100mM solution    0.25 ml
dTTP 100mM solution    0.25 ml
PCR enhancer    100μl
PCR enhancer    500μl
TUREscript H Minus M-MuLV Reverse Transcriptase （反转录酶）    5000U
    10000U
    10000U X 5
"TUREscript 1st Strand cDNA Synthesis Kit                       （第一链反转录试剂盒）
"    25次
    50次
" TUREscript One Step RT-PCR Kit                                           （一步法反转录试剂盒）
"    25次
    50次
" TUREscript SYBR Green qRT-PCR Kit                             （两步法荧光定量反转录试剂盒）
"    25次
    50次
DNA MarkerⅠ（条带100.200.300.400.500.600）    50T
DNA MarkerⅠ（条带100.200.300.400.500.600）    500T
DNA Marker Ⅱ（条带100.300.500.700.900.1200）    50T
DNA Marker Ⅱ（条带100.300.500.700.900.1200）    500T