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常温运输,4℃保存(miRNAon、 miRNA Marker需要-20℃保存),
- 保质期:
一年
- 英文名:
One-Stop miRNA Urea-PAGE Pack
- 库存:
大量
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 规格:
30次/盒
尿素-丙烯酰胺凝胶电泳(Urea PAGE)是目前分离100 nt以下的小片段 RNA,尤其是20 nt左右的microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是单独配制 各种溶液十分繁琐,为此天恩泽开发了本产品。它具有下列特点:
1. 一站式,即开即用,十分方便。
2. 安全,免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙烯酰胺。
3. 灵活,可以根据RNA的长度,用高浓度的母液配制各种浓度的Urea-PAGE。
4. 含天恩泽独特的固相RNase清除剂,可清除工作环境中RNase的污染。
5. 电泳后可直接用于UV观察、银染、胶回收、Northern杂交和放射自显影等。
一站式miRNA尿素-PAGE电泳套装-One-Stop miRNA Urea-PAGE Pack使用及效果
详细操作步骤较多,请参考操作手册
ECL底物发光试剂盒(试剂A:25ml,试剂B:25ml) 50ml
ECL底物发光试剂盒(试剂A:50ml,试剂B:50ml) 100ml
可溶型TMB显色底物试剂 100ml
可溶型TMB显色底物试剂 500ml
沉淀型TMB显色底物试剂 100ml
沉淀型TMB显色底物试剂 500ml
HRP-DAB底物显色试剂盒 60ml
超敏可逆蛋白显色试剂 100ml
碱性磷酸酶底物显色试剂盒(BCIP/NBT) 100 ml
胞浆总蛋白提取试剂盒 50T
植物细胞质膜提取试剂盒 50T
植物蛋白提取试剂盒 50T
细菌总蛋白提取试剂盒 50T
酵母总蛋白提取试剂盒 50T
胞浆和核蛋白分步提取试剂盒 50T
一站式miRNA尿素-PAGE电泳套装-One-Stop miRNA Urea-PAGE Pack膜蛋白提取试剂盒 50T
动物组织蛋白裂解液 50ml
真核细胞蛋白裂解液 50ml
RIPA裂解液 50ml
RIPA裂解液 100ml
包涵体溶解液 50ml
包涵体溶解液 100ml
蛋白复性液 50ml
蛋白复性液 100ml
蛋白标准(5mg/ml BSA) 1ml
PMSF(100mM) 1ml
5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 250ml
SDS-PAGE电泳液(10X) 100ml
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 2ml
非变性PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 2ml
10%过硫酸铵 1.5ml
30% 丙烯酰胺 (29:1) 100ml
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文献和实验可以采取现在比较常用的TRIzol一步法。不要使用带柱子的RNA提取试剂盒,因为除了专门用于提取miRNA的试剂以外,绝大部分柱子无法捕获20nt左右的miRNA。 2、电泳 (1)配制15%的尿素变性PAGE胶,可以先用预冷的0.5XTBE缓冲液作为电泳缓冲液,60V预跑30min。 (2)将样品与RNA loading buffer按比例混合,70℃预热5min,立即放置冰上。 (3)上样前,用缓冲液冲洗点样孔,防止点样孔中的杂质影响电泳。 (4)点样时,使样品均匀铺在点样孔底部
或northern时,你必须验证分析只检测目的miRNA,而不是其它成员。我们在玉米(Zea)RNA载体背景中加入合成的成熟miRNA(IDT)来验证。 就northern来说,每个miRNA家族成员的合成miRNA在含有8M尿素的15% PAGE胶上进行。优化杂交温度,让LNA探针只与目的miRNA结合,而不与其它成员结合。一旦利用加标策略建立了适当的northern杂交条件,就能应用于实验样品。 3. 原位杂交:我们也利用Exiqon的DIG标记的miRCURY LNA
Conduct SDS-PAGE according to standard procedures. 1. Cast gel and allow to polymerize 2. Prepare samples to be resolved 3.Load gel 4.Run gel ( Transferring proteins
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