- ¥890
- 泽叶生物
- 中国/美国
- ZY70606-30
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输，4℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
One-Stop miRNA Urea-PAGE Pack
- 库存：
60
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
30次
尿素-丙烯酰胺凝胶电泳（Urea PAGE）是目前分离100 nt以下的小片段 RNA，尤其是20 nt左右的microRNA（miRNA）分子的主要方法，但是单独配制 各种溶液十分繁琐，为此天恩泽开发了本产品。它具有下列特点:
1. 一站式，即开即用，十分方便。
2. 安全，免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙烯酰胺。
3. 灵活，可以根据RNA的长度，用高浓度的母液配制各种浓度的Urea-PAGE。
4. 含天恩泽独特的固相RNase清除剂，可清除工作环境中RNase的污染。
5. 电泳后可直接用于UV观察、银染、胶回收、Northern杂交和放射自显影等。
一站式miRNA尿素-PAGE电泳套装使用及效果
详细操作步骤较多，请参考操作手册
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文献和实验可以采取现在比较常用的TRIzol一步法。不要使用带柱子的RNA提取试剂盒，因为除了专门用于提取miRNA的试剂以外，绝大部分柱子无法捕获20nt左右的miRNA。 2、电泳 （1）配制15%的尿素变性PAGE胶，可以先用预冷的0.5XTBE缓冲液作为电泳缓冲液，60V预跑30min。 （2）将样品与RNA loading buffer按比例混合，70℃预热5min，立即放置冰上。 （3）上样前，用缓冲液冲洗点样孔，防止点样孔中的杂质影响电泳。 （4）点样时，使样品均匀铺在点样孔底部
或northern时，你必须验证分析只检测目的miRNA，而不是其它成员。我们在玉米(Zea)RNA载体背景中加入合成的成熟miRNA(IDT)来验证。 就northern来说，每个miRNA家族成员的合成miRNA在含有8M尿素的15% PAGE胶上进行。优化杂交温度，让LNA探针只与目的miRNA结合，而不与其它成员结合。一旦利用加标策略建立了适当的northern杂交条件，就能应用于实验样品。 3. 原位杂交：我们也利用Exiqon的DIG标记的miRCURY LNA
为15%的PAGE(含7 M 尿素)上电泳(用1XTEB 缓冲液) ， 最后用0.5ug/mL 的EB 溶液染色。我们这边不用EB染色，但是EB的灵敏度还是很高的，如果EB不行，其他的也都够呛 Q8、PCR寡核苷酸样品被溴酚蓝混合了，如何分离? A8、跑个电泳切后回收一下试试 最后再讲一下，寡核苷酸在引物设计实验中也有着不可忽视的作用，使用合适的寡核苷酸可从三方面考虑：1)估测即将出现的核酸双链稳定性;2)遵从引物选择通用准则;3)根据氨基酸序列design
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