通用型LAMP试剂盒 核酸扩增(PCR)

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北京百奥莱博供应的通用型LAMP试剂盒 核酸扩增(PCR)用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多通用型LAMP试剂盒等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。

北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应通用型LAMP试剂盒 核酸扩增(PCR)，产品信息：

类别：核酸扩增(PCR)

英文名：Universal Loop-Mediated Isothermal Amplification Kit

产品名	产品编号	包装规格
通用型LAMP试剂盒	BTN100203	50次

产地：国产|进口

英文名：Universal Loop-Mediated Isothermal Amplification Kit

品牌：百奥莱博

本试剂盒可以用于LAMP等温扩增，LAMP即环介导等温扩增，是一种新颖的等温核酸扩增方法。它利用4条模板专一的特异引物和具有链置换能力的DNA聚合酶，在等温条件下(63℃左右)30－60分钟完成扩增(详细反应过程见本页面下方相关产品栏中的LAMP flash)。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于PCR技术，同时还不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程，不依赖任何专门的仪器设备。目前已成功应用于人类及动植物、细菌、病毒、寄生虫、真菌等病原体的快速检测。

 

产品特点：

1.高特异性，由于同时使用4-6条特异引物，所以特异性比PCR更高。

2.高扩增效率，扩增效率可达到10E9-10E10，比PCR灵敏一个数量级，可检测到单拷贝的DNA分子。

3. 65℃左右等温扩增，不需要贵重的热循环仪。

4. 即开即用，包含了除引物和模板DNA外的所有成份，十分方便。

5. 肉眼检测扩增结果，不需要昂贵的电泳、荧光PCR等仪器。

6. 提供扩增对照，便于在遇到困难时分析原因。

 

试剂盒组成：

 

成分	规格
LAMP Mix(2×)	0.5ml
Bst DNA聚合酶(8U/μL)	75μl
对照引物	20μl
对照模板DNA	5μl
25mM MgCl2	0.2ml
超纯水	1ml
说明书	1份

 

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

 

使用方法：

1.在冰上溶解除酶外的各种组份，混匀，稍离心。在反应管中加入以下组份：

 

成份	样品管	阴性对照
LAMP Mix(2×)	10μl	10μl
FIP引物终浓度	0.8μM	0.8μM
BIP引物终浓度	0.8μM	0.8μM
F3引物终浓度	0.2μM	0.2μM
B3引物终浓度	0.2μM	0.2μM
Loop F引物终浓度(可选项)	0.4μM	0.4μM
Loop B引物终浓度(可选项)	0.4μM	0.4μM
MgCl2(25mM)	3μL	3μL
模板DNA	1-100ng	不加
Bst DNA聚合酶(8U/μL)	1.5μl	1.5μl
补水到	20μl	20μl

注：如在反应管中加入本公司PCR级绿如蓝染料1μL(水则少加1μL)，则可直接在荧光定量PCR仪中进行荧光定量检测。

2. 混匀，置于60-65℃保温30-120分钟。注意：如果不使用Loop引物，则最好保温2小时；如果使用Loop引物，则最好保温30分钟。

3. 80℃10分钟灭活Bst DNA聚合酶。

4.产物置于-20℃备用或立即用于下游检测。扩增产物可选下列方法之一检测:

a)琼脂糖凝胶电泳。取扩增产物5μl，1-2%的琼脂糖凝胶电泳，可见LAMP特征性电泳图谱；

b)向扩增产物中直接加入本公司PCR级绿如蓝染料(另售)1μL，混匀，稍离心。将反应管置于紫外透射仪或凝胶成像系统中，紫外灯下可见绿色荧光产生；

c)荧光定量检测。

5. 结果分析：

a)如果没有扩增，则需要用阳性对照进行扩增。本试剂盒提供5次阳性对照，反应按下表设置：

 

成份	阴性对照管	阳性对照管
LAMP Mix(2×)	10μl	10μl
对照引物混合物	4.0μl	4.0μl
对照模板DNA	不加	1μl
MgCl2(25mM)	3μl	3μl
Bst DNA聚合酶(8U/μL)	1.5μl	1.5μl
水	1.5μl	0.5μl

混匀后，置于60℃保温120分钟，其余操作同上。注意：本对照引物中没有Loop引物，所以最好保温2小时。

b)如果阳性对照能够扩增出，则说明试剂盒没有问题，可能是模板或引物的问题。如果阳性对照没有扩增出条带，则是试剂盒的问题，请跟厂家联系。

 

注意事项：

1.引物设计对成功扩增十分关键。除用于SNP分型外，尽量以保守区设计引物。

2.引物至少包括F3/B3和FIP/BIP，加入环状引物F loop/B loop可以使反应速度大大提高。

3. 应优化引物序列、GC含量和尽量避免二级结构。

4.反应中各个引物的浓度及比例对扩增效果有一定的影响。

5. 建议先将所有引物混合在一起，配制成10×浓度以方便使用。

6. LAMP扩增具有特异性好、灵敏度高、时间快、不需要特殊仪器设备等优点。但太高的灵敏度使得其比普通PCR扩增更加容易污染导致假阳性。因此，必须高度重视扩增产物的污染。常规措施包括严格的实验分区、添加UNG和dUTP(可能导致反应效率下降)、使用荧光定量等不开盖检测方法。实验室一旦遭到污染，所有相关试剂必须全部更换，必要时还得更换实验室。

7. 要确证扩增的为目标基因，可以使用特定的限制性酶切和/或Southern杂交。

8. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品等用途。

通用型LAMP试剂盒 核酸扩增(PCR)专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

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编号	类别	名称
BTN131070	蛋白质研究	牛血清白蛋白标准品(BSA标准品)(2mg/mL)
BTN90602A	核酸电泳和回收	DNA marker(λDNA/HindIII)
BTN100409	核酸扩增(PCR)	6nt随机引物(0.5 ug/uL)
BTN131232	克隆与表达	壮观霉素溶液
BTN100867	蛋白质研究	SDS-PAGE浓缩胶配胶液
BTN60408	其他生化试剂	通用洗柱液
BTN120307	工具酶	SP6 RNA聚合酶
BTN130632	工具酶	T7核酸外切酶
BTN131290	其他细胞生物学试剂	PLPD固定液
BTN70503T	核酸电泳和回收	DNA marker(250-15000bp)
BTN130970	RNA纯化	柱式革兰氏阳性菌RNA提取试剂盒
BTN50903	核酸电泳和回收	微量核酸沉淀剂
BTN90902	蛋白质研究	细菌总蛋白质微量提取试剂盒
BTN130951	DNA纯化	革兰氏阳性菌DNA提取试剂盒(Southern级)
BTN130923	核酸扩增(PCR)	LAMP扩增阳性对照
BTN101113	RNA纯化	软体动物RNA柱式提取试剂盒
BTN120690	克隆与表达	红霉素溶液
BTN81203	蛋白质研究	SDS-PAGE电泳液(干粉)
BTN90603C	探针标记及检测	随机引物法DNA探针地高*(代"辛")标记试剂盒
BTN90407A	克隆与表达	λDNA
BTN100912B	蛋白质研究	长效期SDS-PAGE电泳液(2-30 KD)(干粉)
BTN3191	RNA纯化	Tris饱和酚
BTN70703	DNA纯化	柱式分枝杆菌DNA提取试剂盒
BTN130699	RNA纯化	RNase抑制剂(小鼠源)(40U/μL)
BTN131082	蛋白质研究	重组蛋白L
BTN50901	克隆与表达	菌落PCR试剂盒2.0

 

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