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- 英文名:
EasyComp Fluorescent Particles Kit
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- 供应商:
上海熹垣生物
- CAS号:
N/A
- 规格:
8 vials
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文献和实验Cy5.5激发波长为675nm,不能被红色激光器所激发,也就不存在Cy5.5对APC的干扰,所以用PE-Cy5.5对APC计划没有串色。因此,可能需要牺牲个别荧光染料的亮度来避免荧光渗漏以及分辨率下降。 要通过单标对照进行补偿调节: 所以尽量选择光谱重叠度小的荧光染料,如FITC/PE-Cy7; 选择不同激光激发的荧光染料,如FITC/APC, PE/APC。 4) 尽量避免偶联荧光染料使用带来的假阳性 随着颜色的数量不断增加,实验中可能会用到串联荧
流式配色可以算的上是一门艺术:我们需要平衡抗原表达水平和荧光染料亮度,从而得到令人满意的实验结果。 在荧光素的选择上,除了传统的 PE、APC 等荧光蛋白和 FITC 等合成类小分子外,串联染料的出现大大扩展了可用荧光素的选择范围。 什么是串联染料? 串联染料由两个共价连接的荧光分子组成。当供体荧光分子的发射光谱与受体荧光分子的吸收光谱重叠,并且两个分子的距离在 10 nm 以内时,就会发生一种非放射性的能量转移,即荧光共振能量转移(FRET)现象,使得供体的荧光强度比它单独存在时要低的多(荧
、CD14-PE、CD19-PE、CD3-PE、CD66b-PE、CD56-PE-Cy7、CD11c-APC、 CD45-AF700、CD38-APC-AF750(每次测试 5μL),以及 CD16-FITC(每次测试 20 μL),并在冰上孵育 30 分钟。10. 在 4℃ 条件下,300 x G 离心细胞 5 分钟。11. 吸取上清液。12. 重悬到 500 μL 染色缓冲液中。13. 通过 CytoFLEX 获取结果。通过 CytoFLEX 进行数据采集:1. 创建新补偿值。2. 如适用
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