EasyComp荧光微球套装，7瓶（空白，FITC，PE，P

多色流式实验荧光染料的选择

Cy5.5激发波长为675nm，不能被红色激光器所激发，也就不存在Cy5.5对APC的干扰，所以用PE-Cy5.5对APC计划没有串色。因此，可能需要牺牲个别荧光染料的亮度来避免荧光渗漏以及分辨率下降。 要通过单标对照进行补偿调节： 所以尽量选择光谱重叠度小的荧光染料，如FITC/PE-Cy7； 选择不同激光激发的荧光染料，如FITC/APC, PE/APC。 4) 尽量避免偶联荧光染料使用带来的假阳性 随着颜色的数量不断增加，实验中可能会用到串联荧

优化流式配色的小技巧

流式配色可以算的上是一门艺术：我们需要平衡抗原表达水平和荧光染料亮度，从而得到令人满意的实验结果。 在荧光素的选择上，除了传统的 PE、APC 等荧光蛋白和 FITC 等合成类小分子外，串联染料的出现大大扩展了可用荧光素的选择范围。 什么是串联染料？ 串联染料由两个共价连接的荧光分子组成。当供体荧光分子的发射光谱与受体荧光分子的吸收光谱重叠，并且两个分子的距离在 10 nm 以内时，就会发生一种非放射性的能量转移，即荧光共振能量转移（FRET）现象，使得供体的荧光强度比它单独存在时要低的多（荧

如何选择合适的流式抗体

抗体二抗上连接有荧光染料。直接标记染色背景低，实验程序少尽量减少实验工序和过程，以保证实验的真实和准确性。因此在条件允许的范围内，建议尽量用直接标记的抗体进行实验。 3、流式抗体荧光标记的选择： 如果实验中检测单一指标：不同荧光标记在不同的仪器上强度不同。以某仪器为例：PE ＞APC ＞PE-Cy5 ＞PerCP ＞FITC ＞PerCP-Cy5.5，通常来说，PE最强，适用于弱表达抗原。FITC强度较弱，适用于强表达抗原，使用范围比较广。用户需根据检测的目标蛋白进行具体选择。 如果同时检测多个