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- 详细信息
- 文献和实验
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43
- 英文名:
荧光素PE-Cy7标记链霉亲和素
- CAS号:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
详见说明书
- 规格:
瓶
产品名称:荧光素PE-Cy7标记链霉亲和素
英文名称: Streptavidin/PE-Cy7
应用: Flow-Cyt=1:500-5W;ICC=1:500-5W;IF=1:500-5W;not yet tested in other applications.optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
浓度: 1mg/ml
| 产品名称 | 荧光素PE-Cy7标记链霉亲和素 |
| 英文名称 | 荧光素PE-Cy7标记链霉亲和素 |
| 货号 | BH-DB4123 |
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
| 细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
| 107个 | 0.5 mL~1 mL |
| 5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
固定液的应用:
1.单纯固定液(1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以pH7 2~7 4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封…
1.单纯固定液
(1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以 pH 7.2~7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处,保存时间不 超过一个月。
(2)乙醇固定液:使用时以80%~95%的浓度为宜,具有硬化、固定、脱水等作用,对组织渗透力较弱,因此很少单独使用,但其保存组织中的核酸强于中性甲醛,故常用于有核酸操作的实验或检查,如果用于证明尿酸结晶和保存糖原,可用100%乙醇固定组织。
(3)4%的多:主要用于培养细胞的固定。
2.混合固定液
(1)乙醇一甲醛(乙醇-福尔马林,AF)固定液:适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用,固定后的标本可直接入95%乙醇脱水。
(3)Bouin固定液:特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀,收缩很少,不会使组织变硬变脆。需现配现用。
(4)Carnoy固定液:穿透能力强,可很好的固定细胞质和细胞核,特别适合于固定外膜致密的组织,亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
(5)Zenker固定液:经此液固定的标本,细胞核和细胞质染色颇为清晰,但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光,以免引起化学变化而失效
以下是荧光素PE-Cy7标记链霉亲和素的相关产品:
4NPP对硝基本嶙酸二钠25克BS
锶StrontiuM;
cis4xy7noxyDproline顺式4羟基D脯酸25克BR,99%
酸氢钾 Potassium hydrogen diiodate,≥99.8% 52 25G 通用试剂
(S)2(甲基)1... (S)()2Aminomethyl1ethylpyrrolidi... 2299 1G 通用试剂
微晶蜡,英文名或英文缩写:Ceresin,级别:BR,%,规格:100克
1三扶乙酰胺;2,2,2三扶乙酰胺Trifluonoeetemi7e;2,2,2Trifluonoeetemi7e
N二甲基琥珀酰酸,英文名或英文缩写:B9,级别:USP级,98.5%,规格:100克
氧化亚铜 Curpous oxide 3 25G 通用试剂
d Octaned,98% 2527 1G 通用试剂
维生素B1/盐酸硫胺/盐酸噻胺/硫胺盐酸盐/盐酸硫胺素/维生素B1盐酸盐/尼克酸/3(4基2甲基5嘧啶基)甲基5(2)4甲基噻唑鎓盐酸盐/VB1 0.99 25克 国产/进口
Indoxylacetate盐酸吲哚酚25克CP
丽春红S Poncqcu S;Fcst poncqcu 2B; Poncqcu S qxtrc; 2
乙酸钴/乙酸亚钴/亚钴/钴/四水合乙酸钴/Cobaltous acetate tetrahydrate AR,99.5%, 100克 国产/进口
分型巯基测试盒/SH测试盒 分光光度法,分蛋白结合型和非蛋白结合型;可以测2种蛋白分型 100管/24样 国产
MouseAi-SmoothMuscleAibody,ASMA小鼠抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒规格:96T/48T 芝麻酚 HPLC≥98% 20mg
MouseAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISA试剂盒小鼠抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒规格:96T/48T 芝麻林素 HPLC≥98% 20mg
Mouseai-thrombieceptor,AELISA试剂盒小鼠抗凝血酶受体(A)ELISA试剂盒规格:96T/48T 芝麻素 HPLC≥98% 20mg
MouseAi-ThrombinⅢ,AT-Ⅲ小鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒规格:96T/48T 知母皂苷A HPLC≥94% 10mg
MouseAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISA试剂盒小鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒规格:96T/48T 知母皂苷A HPLC≥98% 20mg
Mouseai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-Ab小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA试剂盒规格:96T/48T 知母皂苷BII HPLC-ELSD≥95% 20mg
Mouseai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISA试剂盒小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA试剂盒规格:96T/48T 知母皂苷BIII HPLC≥98% 10mg
MouseAi-ypsin,ATELISA试剂盒小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA试剂盒规格:96T/48T 知母皂苷C HPLC≥97% 10mg
Mouseai-zonapellucidaaibody,aZP小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 知母皂苷E HPLC≥98% 10mg
Mouseai-zonapellucidaaibody,aZPELISA试剂盒小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 栀子苷 HPLC≥98% 20mg
荧光素PE-Cy7标记链霉亲和素载玻片细胞DHPR受体蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20 川陈皮素 HPLC≥98% 20mg
Humanβ2-Glycoprotein1AibodyIgG,β2-GP1AbIgGELISA试剂盒人β2糖蛋白1抗体IgG(β2-GP1AbIgG)ELISA试剂盒规格:96T/48T 川翠定甲 HPLC≥98% 20mg
小鼠组蛋白H4(H4)ELISA试剂盒 ,英文名: H4 ELISA Kit 川楝素 HPLC≥98% 20mg
山羊白介素2(IL-2)ELISA检测试剂盒GoatIerleukin2,IL-2ELISAKit 96T/48T 川麦冬甘A HPLC≥98% 20mg
犬(NO)试剂盒 Canine niic oxide,NO ELISA Kit 川芎嗪 HPLC≥98% 20mg
英文名称Mouse25(OH)D3ELISAKit小鼠25羟基维生素D3(25(OH)D3)规格:96T/48T 川续断皂苷VI HPLC≥98% 20mg
产气荚膜梭菌α(Closidiumperfringenscpa)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20 川续断皂苷乙 HPLC≥98% 20mg
RatFreeProstateSpecificAigen,fPSAELISA试剂盒大鼠游离前列腺特异性抗原(fPSA)ELISA试剂盒规格:96T/48T 穿琥宁 HPLC≥98% 20mg
小鼠组蛋白H3(H3)ELISA试剂盒 ,英文名: H3 ELISA Kit 穿心莲内酯 HPLC≥98% 20mg
山羊坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒GoatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKIT 96T/48T 慈溪麦冬皂苷A HPLC≥98% 20mg
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文献和实验可以将干扰扣除,但补偿值越大,补偿后的信号分辨率会降低越厉害。最好选择很少或者没有重叠的荧光基团,以最大限度减少这种渗漏。不同激光激发的染料是首选,如PE和APC,但在某些情况下,这可能与尽量选择亮的荧光素的规则是冲突的。如在进行四色分析时,经常会将PE-Cy5标记的抗体与APC标记的抗体搭配使用。因为Cy5的激发波长与APC的激发波长相近,所以PE-Cy5与APC均可被红色激光(640nm)所激发,而两者的发送光谱也比较接近,导致PE-Cy5与APC的颜色补偿很难调整。相反,由于PE-Cy5.5中的
指标:确认流式细胞仪能检测多少个通道,流式抗体每个通道只能选择1种荧光素。各个通道之间的荧光素可以随意搭配。如实验者同时检测三个指标,可以在下图中绿色、黄色和红色三个通道中各选一个适当的荧光素标记,FITC、PE和PE-cy5。切忌所有指标选择同一个通道的荧光标记,以防止荧光的重叠和相互干扰,影响最后结果。因此,流式细胞仪的通道越多,同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多。常用荧光标记包括FITC, PE, PEcy5, PEcy5.5, APC等。 4、同型对照的选择: 流式
位。 IF(免疫荧光检测)是采用荧光素标记物作为探针,形成的抗原抗体复合物上带有荧光素,在荧光显微镜下,受激发光的照射后发出一定波长的荧光,从而对细胞、组织中的抗原进行定位或定量。 表 1 IHC/ICC与IF特点对比 IHC/ICC 与 IF 染色中使用的抗体主要为一抗与二抗,根据是否选用二抗以及二抗标记物类型可形成多种不同的检测系统。信号放大是免疫组化实验中的重要步骤,信号放大可以使目标蛋白质的信号从微弱到明显,从而更容易被观察和定量。现有的信号放大技术多为链霉亲和素-生物素法,该方法基于链酶亲和
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