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- 详细信息
- 技术资料
- 免疫原:
重组GFP标签
- 亚型:
IgG1
- 形态:
液体
- 保存条件:
-20℃冻存,避光
- 克隆性:
多克隆
- 保质期:
二年
- 目录编号:
WE0346
- 级别:
单克隆
- 库存:
735
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 宿主:
小鼠
- 应用范围:
WB,ELISA
- 浓度:
1mg/ml
- 靶点:
GFP
- 抗体英文名:
Anti GFP-Tag Mouse Monoclonal Antibody
- 抗体名:
抗GFP标签单克隆单克隆抗体
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应北京现货WE0346型抗GFP标签单克隆抗体哪里卖,我公司销*(代"售")全品类的抗体抗原,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货WE0346型抗GFP标签单克隆抗体哪里卖
编号:WE0346
规格:100μl
品牌:百奥莱博
英文名:Anti GFP-Tag Mouse Monoclonal Antibody
GFP或其突变体EGFP与目的蛋白融合表达常用于检测目的蛋白的表达和分布。该抗体特异识别GFP以及EGFP、YFP、EYFP、CFP 等一些突变体。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成多肽
应用范围:WB(1:500-2000)、ELISA(1:200-20000)
北京现货WE0346型抗GFP标签单克隆抗体哪里卖极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1~20ml)
编号:WE0175
英文名称:Blood Genomic DNA Mini Extraction Kit(0.1-1ml)
规格:50次|200次
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的全血(用柠檬酸盐、EDTA或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)、血浆、血清、血沉棕黄层、淋巴细胞、无细胞体液等样本中提取总DNA,包括基因组DNA,线粒体DNA及病毒DNA。本品可以处理0.1-1ml的全血,最高得率可达30μg,可纯化获得大小为100 bp到50 kb的DNA,纯化的DNA产量高、质量好,最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染,可直接用于PCR、荧光定量PCR、酶切和Southern Blot等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 | 200次 |
| Buffer RCL | 125ml | 2×260ml |
| Buffer GR | 15ml | 50ml |
| Buffer GL | 15ml | 50ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml | 52ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml | 50ml |
| Buffer GE | 15ml | 60ml |
| 蛋白酶K | 12.5 mg | 50 mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 1.25ml | 5ml |
| 吸附柱 DM及收集管 | 50套 | 200套 |
产品特点
1、纯度高:提取的基因组DNA可直接用于下游PCR、荧光定量PCR、酶切等各种实验。
2、提取量大:可从0.1-1.0ml的全血中提取基因组DNA。
3、兼容性强:适用于处理各种抗凝血液和细胞样本。
自备试剂:无水乙醇
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3、本试剂盒最多可以提取0.1-1ml全血样品或1×107个白细胞。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GL于56℃水浴孵育重新溶解。
6、试剂盒中的Buffer RCL浑浊后不能继续使用。
操作步骤:
1、样品处理:
1.1、提取200 ul血液样品时,向离心管(自备)中加入样本后,可直接进行下一步实验。
1.2、当血液样本量小于200μl时,加入Buffer GR补足至200μl,再进行下一步实验。
1.3、当血液样本量超过200μl时,加入1~2.5倍体积的Buffer RCL,轻轻涡旋或颠倒混匀,12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,小心吸弃上清液,如果沉淀中还有红色,可以重复以上步骤一次。然后向沉淀中加入200μl Buffer GR,震荡至彻底混匀,再进行下一步实验。
1.4、如果处理血液样本为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血,其红细胞为有核细胞,血液样本量为5-20μl,可加入Buffer GR,补足至200μl后进行后续实验。
注意:如果下游试验对RNA敏感,可加入4μl RNase A(100mg/ml)溶液,震荡15秒,室温放置5分钟。RNase A本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:WE0225S。
2、向以上溶液中加入20μl 蛋白酶K ,混匀。
3、加入200μl Buffer GL,震荡至彻底混匀。
注意:不要将蛋白酶K 和Buffer GL进行预混。
4、56℃孵育10分钟,其间颠倒混匀数次。
注意:孵育10分钟DNA的产量已经达到最大,继续延长孵育时间对DNA产量和纯度没有影响。
5、加入200μl无水乙醇,颠倒混匀数次。短暂离心,使管壁和壁盖上的液体集中到管底。
6、将步骤5所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如果提取样品是小鼠或猴子等血红素难以除去的种属的血液基因组,建议重复步骤7。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤8。
9、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
10、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附柱的中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)如果要提高DNA的终浓度,可以将所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1 分钟。
3)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
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·蛋白分子量Marker
编号:WE0280
英文名称:Protein Molecular Weight Marker
规格:100次
本蛋白Marker由8条纯化好的蛋白质组成,其分子量范围是14.4 KD-220 KD(14.4 KD、20 KD、29 KD、35 KD、40 KD、66 KD、90 KD、220 KD),每种蛋白浓度为0.1-0.2 µg,进行聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳时,染色后可以用来判断蛋白质的分子量。本产品仅适用于SDS-PAGE凝胶电泳考蓝染色,不适用于Western Blot检测。
注意事项:
1、仅适用于SDS-PAGE凝胶考马斯亮蓝染色,推荐使用8%-12%的聚丙*(代"烯")酰胺凝胶。
2、不推荐用于Native-PAGE。
3、不适用于Western Blot检测。
4、为避免反复冻融及污染,可将本产品分装后,-20℃保存。
操作步骤:
1、加样前在室温或者37℃-40℃数分钟解冻后轻轻摇匀,以确保溶液混合均匀。
2、本产品推荐上样量为5μl,可根据凝胶的厚度和浓度大小调整。
实验图例:
12%的聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳后,经ShowProtein-G250蛋白快速染色试剂(#WE0290)染色的结果。
储存条件:-20℃保存,避免反复冻融。
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·一步法逆转录实时荧光定量PCR试剂盒(低含量ROX校正染料)
编号:WE0149
英文名称:BaldStar TaqMan One Step RT-qPCR Kit(Low ROX)
规格:100次
本试剂盒是采用探针法(TaqMan,Molecular Beacon等)进行一步法Real-Time RT-qPCR的专用试剂盒。使用本产品进行Real Time RT-qPCR反应时,逆转录和定量PCR在同一反应体系中进行,反应过程中无需添加试剂,无需打开管盖,避免了污染的同时提高了实验效率。本产品的检测灵敏度高,荧光信号强,信噪比高,非常适合于RNA病毒等微量RNA的检测。其所包含的特殊缓冲系统能使逆转录酶与DNA聚合酶同时发挥最大功效,提高反应效率。使用本产品可以得到更宽广的线性范围,对目的基因定量更准确,重复性好,可信度高。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器:(WE0148)
Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-rad iCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器:(WE0149)
ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System,QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system,Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器:(WE0150)
ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
试剂盒组成:
| 组份 | WE0148-100次 | WE0149-100次 | WE0150-100次 |
| 2×BaldStar TaqMan One Step Buffer | 1.4ml | 1.4ml | 1.4ml |
| BaldStar TaqMan One Step EnzymeMix | 100μl | 100μl | 100μl |
| 50×Low ROX | - | 50μl | - |
| 50×High ROX | - | - | 50μl |
| RNase-Free Water | 1.5ml | 1.5ml | 1.5ml |
注意事项:
1、本试剂盒中试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2、本产品以RNA为模板进行一步法RT-PCR实验,在操作过程中应避免RNase污染,建议在专门的区域进行RNA操作,使用专门的仪器和耗材,操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套,实验相关耗材应用0.1%DEPC(焦碳酸二乙酯)水溶液在37℃处理12小时,并高压灭菌30分钟后使用。
3、本试剂盒中的各试剂应尽量避免反复冻融,反复冻融可能使产品性能下降。
4、本试剂盒必须使用特异性引物,引物的选择可根据具体实验来选择,引物设计的好坏直接影响到RT-qPCR反应的结果,设计引物时需考虑GC含量,引物长度,引物位置,PCR产物的二级结构等因素,建议采用专业的引物设计软件进行设计。
5、本试剂盒推荐使用特异性探针,建议采用专业的设计软件进行设计。
使用方法:
以下举例为常规的反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小的不同进行相应的改进和优化。(反应液的配置请在冰上进行)
1、将RNA模板、引物、2×BaldStar TaqMan One Step Buffer、BaldStar TaqMan One Step EnzymeMix和RNase-Free Water溶解并置于冰上备用。
2、PCR反应体系:
| 试剂 | 25μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×BaldStar TaqMan One Step Buffer | 12.5μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 0.5μl | 0.2μM |
| Reverse Primer,10μM | 0.5μl | 0.2μM |
| Probe,10μM | 0.5μl | 0.2μM |
| BaldStar TaqMan One Step EnzymeMix | 1.0μl | |
| RNA Template | Xμl | 10 pg~100ng |
| 50×Low ROX or High ROX(可选) | 0.5μl | 1× |
| RNase-Free Water | up to 25μl |
注意:
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果,可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度,与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关,实际使用时请参照仪器说明书,或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常RNA模板的量以10 pg – 100ng为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同,根据使用荧光定量的仪器选择加入50×Low ROX or 50×High ROX。
3、混匀,短暂离心,将溶液收集到管底。
4、RT-PCR反应条件:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 逆转录 | 45℃ | 10 min | |
| PCR预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 95℃ | 15 s | 30-40个循环 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 45 s |
注意:
1)1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、5-10 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序,若因使用Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
储存条件:-20℃,避免反复冻融
北京百莱博科技有限公司专业生产一抗产品,欢迎来电咨询选购北京现货WE0346型抗GFP标签单克隆抗体哪里卖。
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