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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 库存:
493
- 靶点:
GFP
- 级别:
单克隆
- 目录编号:
WE0346
- 克隆性:
多克隆
- 保质期:
二年
- 抗体英文名:
Anti GFP-Tag Mouse Monoclonal Antibody
- 抗体名:
抗GFP标签单克隆单克隆抗体
- 宿主:
小鼠
- 免疫原:
重组GFP标签
- 亚型:
IgG1
- 形态:
液体
- 应用范围:
WB,ELISA
- 浓度:
1mg/ml
- 保存条件:
-20℃冻存,避光
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京现货WE0346型抗GFP标签单克隆抗体促销是高品质的一抗产品,由北京百奥莱博供应,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多抗GFP标签单克隆抗体等一抗产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京现货WE0346型抗GFP标签单克隆抗体促销
英文名:Anti GFP-Tag Mouse Monoclonal Antibody
产地:国产|进口
规格:100μl
GFP或其突变体EGFP与目的蛋白融合表达常用于检测目的蛋白的表达和分布。该抗体特异识别GFP以及EGFP、YFP、EYFP、CFP 等一些突变体。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成多肽
应用范围:WB(1:500-2000)、ELISA(1:200-20000)
北京现货WE0346型抗GFP标签单克隆抗体促销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒
编号:WE0325
英文名称:Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
规格:50次
本试剂盒是一种采用Annexin V-FITC与PI双染法进行细胞早期凋亡分析的检测试剂盒。
细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝*酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂,正常主要存在于细胞膜的内面,在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性,对PS有高度的亲和性。因此,该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的,也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的,而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就被破坏。另外一种活细胞非透过性荧光染料碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)不能通过完整的活细胞,但能够对坏死和凋亡晚期的细胞进行染色, 因此通常将Annexin V与PI配合染色, 以区别凋亡早期细胞与坏死细胞和凋亡的晚期细胞。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| 4×Binding Buffer | 10ml |
| Propidium Iodide,PI | 500μl |
| Annexin V-FITC | 250μl |
注意事项:
1、本试剂盒需使用流式细胞仪进行检测。
2、需自备PBS和去离子水。
3、荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
4、PI对人体有刺激性,请注意适当防护。
5、请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤:
1、细胞样品的准备:
a.对于贴壁细胞:小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞,至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时,加入前面收集的细胞培养液,吹打下所有的贴壁细胞,并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000×g左右离心3-5分钟,沉淀细胞。对于特定的细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清,可以残留约50μl左右的培养液,以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞,小心吸除上清。再次加入1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞。
b.对于悬浮细胞:1000×g左右离心3-5分钟,沉淀细胞。对于特定的细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清,可以残留约50微升左右的培养液,以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞,小心吸除上清,可以残留约50μl左右的PBS,以避免吸走细胞。再次加入1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞。
2、用去离子水按 1:3 稀释Binding Buffer(4ml Binding Buffer +12ml 去离子水)。
3、用 250μl Binding Buffer重新悬浮细胞,调节其浓度为 1×106/ml。
4、取 100μl 的细胞悬液于 5ml 流式管中,加入 5μl Annexin V/FITC 和 10μl 20μg/ml的PI溶液。
5、混匀后于室温避光孵育 15 分钟。
6、在反应管中加 400μl PBS,流式细胞仪(FACS)分析。
实验图例
储存条件:2~8℃,避光保存
北京现货WE0346型抗GFP标签单克隆抗体促销关键词:重组GFP标签抗体,WE0346,GFP抗体,小鼠抗重组GFP标签,抗GFP标签单克隆抗体
·BaHF高保真DNA聚合酶
编号:WE0113
英文名称:BaHF High Fidelity DNA Polymerase
规格:500U|2500U
本产品是经过特殊处理的热启动高保真聚合酶。该聚合酶具有5"-3"DNA聚合酶活性,5"-3"核酸外切酶活性和3"-5"核酸外切酶活性,在普通PCR条件下,与BaldStar Taq DNA Polymerase相比,具有扩增效率高、错配率低的优良性能。化学修饰使该酶在常温下没有聚合酶活性,有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活须在95℃下孵育10分钟,该条件可以整合入已有的PCR热循环程序。优化的缓冲体系使酶的作用发挥最大功效,实现对目的片段的高保真、高特异性、高扩增效率、高灵敏度扩增。使用本制品扩增得到的PCR产物的3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。本产品应用于常规的PCR、RT-PCR和多重PCR,特别适用于对特异性、保真性和扩增效率均有较高要求的PCR。
产品组成:
| 组份 | 500U | 2500U |
| BaHF DNA Polymerase, 5 U/μl | 100μl | 5×100μl |
| 5×BaldStar PCR Buffer | 1.9ml | 5×1.9ml |
注意:本产品的5×BaldStar PCR Buffer中含有8.5 mM*离子。
活性定义:
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
质量控制:
1、经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于99%;
2、经检测无外源核酸酶活性;
3、PCR方法检测无宿主残余DNA;
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;
5、室温存放一个月,无明显活性改变。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 5×BaldStar PCR Buffer | 10μl | 1× |
| dNTP Mix,10 mM each | 1μl | 200μM each |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| BaHF DNA Polymerase ,5 U/μ l | 0.5μl | 2.5 U/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 30-40个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 60 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品中所包含的BaHF DNA Polymerase的扩增效率为1-2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
4)本产品须在预变性95℃,10 min条件下实现酶的活化。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
北京现货WE0346型抗GFP标签单克隆抗体促销关键词:重组GFP标签抗体,WE0346,GFP抗体,小鼠抗重组GFP标签,抗GFP标签单克隆抗体
PY01-019B 牛胆酸 25克
ARB13179 小鼠透明质酸(HA)elisa测定使用说明书 Mouse hyaluronic acid,ha ELISA KIT
BTN90212 高载量PCR片段纯化试剂盒 Maxi PCR Clean-Up Kit
硼*(代"酸")溶液 4mol/L 500ml
ARB11025 人尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)elisa检测说明书 Human urokinase plasminogen activator,upa ELISA KIT
ARB11973 大鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)代做ELISA实验 Rat cxc-chemokine ligand 16,cxcl16 ELISA KIT
114162-64-0 5-*-4-*-3-吲哚葡萄糖苷 X-Gluc
ARB12691 大鼠凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)Elisa方法检测 Rat coagulation factor ⅩⅢ,fⅩⅢ ELISA KIT
多粘菌素B硫*(代"酸")盐 Azure Ⅱ 1405-20-5
KG202 GMO作物提取检测试剂盒
氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测试剂盒(DTNB速率微板法) 100T
ARB10474 人白介素12(IL-12/P70)elisa测定使用说明书 Human interleukin 12,IL-12/p70 ELISA KIT
PY02-165 碱性胆盐琼脂(AB) 250克
代谢性骨疾病固定液(pH7.35) 500ml
BTN130829 细胞蛋白质-RNA双提取试剂盒 Protein & RNA Extraction Kit
ARB11917 人髓过氧化物酶(MPO)酶标法分析 Human myeloperoxidase,mpo ELISA KIT
*甲*(代"酚")绿 Phosphomycin disodiu*(代"m") salt 76-60-8
无水偏钒酸* Anthrone 13718-26-8
NF-213 羊抗人C5血清
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文献和实验、三杂交系统和反向杂交系统等。Angermayr等设计了一个SOS蛋白介导的双杂交系统。可以研究膜蛋白的功能,丰富了酵母双杂交系统的功能。此外,酵母双杂交系统的作用也已扩展至对蛋白质的鉴定。二、噬茵体展示技术在编码噬菌体外壳蛋白基因上连接一单克隆抗体的DNA序列,当噬菌体生长时,表面就表达出相应的单抗,再将噬菌体过柱,柱上若含目的蛋白,就会与相应抗体特异性结合,这被称为噬菌体展示技术。此技术也主要用于研究蛋白质之间的相互作用,不仅有高通量及简便的特点,还具有直接得到基因、高选择性的筛选复杂混合
作用;二是必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择最后检测的抗体,所以,若预测不正确,实验就得不到结果,方法本身具有冒险性。 七、pull-down技术 蛋白质相互作用的类型有牢固型相互作用和暂时型相互作用两种。牢固型相互作用以多亚基蛋白复合体常见,最好通过免疫共沉淀(Co-IP) 、Pull-down技术或Far-western法研究。Pull-down技术用固相化的、已标记的饵蛋白或标签蛋白(生物素-、PolyHis-或GST-),从细胞裂解液中钓出与之相互作用的蛋白
作用的类型有牢固型相互作用和暂时型相互作用两种。牢固型相互作用以多亚基蛋白复合体常见,最好通过免疫共沉淀(Co-IP) 、Pull-down技术或Far-western法研究。Pull-down技术用固相化的、已标记的饵蛋白或标签蛋白(生物素-、PolyHis-或GST-),从细胞裂解液中钓出与之相互作用的蛋白。通过Pull-down技术可以确定已知的蛋白与钓出蛋白或已纯化的相关蛋白间的相互作用关系,从体外传路或翻译体系中检测出蛋白相互作用关系。
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