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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
室温(15~30℃)
- 保质期:
长期
- 英文名:
MagBeads DNA Purification Kit
- 库存:
403
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
磁珠法DNA纯化回收试剂现货的品牌:百奥莱博,是优质的DNA纯化产品,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多磁珠法DNA纯化回收试剂等DNA纯化产品请联系我司咨询订购。
名称:磁珠法DNA纯化回收试剂现货
规格:5ml|50ml
品牌:百奥莱博
英文名:MagBeads DNA Purification Kit
产地:国产|进口
本试剂提供了一种简单、快速、高效的核酸纯化方法。该产品可用于二代测序建库时DNA的选择性或非选择性回收,以及PCR产物的纯化回收。MCPure与样品按一定比例混合后,磁珠选择性将核酸吸附。经两步漂洗后,洗脱得到的DNA纯度高,A260/A280的比值在 1.7-1.9之间, A260/A230的比值通常在2.0以上。经该试剂盒纯化得到的DNA适用于PCR,Real-Time PCR, 测序,southern blotting等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 96次 |
| Buffer KCL | 96ml |
| Buffer KCW1(浓缩液) | 72ml |
| Buffer KCW2(浓缩液) | 60ml |
| Buffer EB | 30ml |
| 蛋白酶K | 2×25mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 2×1.25ml |
| Magbeads PN | 4ml |
自备仪器及试剂:磁力架|80%乙醇|洗脱液:Buffer EB(10 mM Tris-HCl, pH 8.0);去离子水(pH在7.0-8.0之间)。
产率举例:
| 片段长度 | 典型产率 |
| 5000 bp | 高至90% |
| 1000 bp | 高至90% |
| 500 bp | 高至80% |
| 200 bp | 高至70% |
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、冰冻、离心、超声会对MCPure中的磁珠造成不可逆的损害。
2、MCPure中磁珠长期放置后会聚集成团,从而使磁珠表面积减小,降低样品回收得率,使用前一定要涡旋振荡彻底混匀磁珠。
3、使用前,建议将MCPure涡旋震荡混匀后分装到1.5ml的离心管中,每管分装1mlMCPure。
4、本试剂不适用于纯化回收小于100 bp的DNA片段,如果要回收小于100 bp的DNA片段,建议将MCPure的用量增加到样品体积的4倍。
5、进行DNA的选择性回收时,MCPure对于DNA溶液中的离子浓度较为敏感。不同厂家的二代测序建库试剂得到的接头连接后的DNA溶液以及PCR扩增产物中离子浓度不同,所以用MCPure做DNA选择性回收时,试剂用量有所不同。
操作步骤:
1、涡旋振荡MCPure 20秒,使其彻底混匀为均一溶液。
2、向1.5ml的离心管中加入纯化的DNA溶液。
3、向上一步的离心管中加入2倍样品体积的MCPure,涡旋震荡5秒后室温静置5分钟。
4、将上一步的离心管放于磁力架上,直至磁珠完全吸附(约需5分钟)。
5、保持离心管固定于磁力架上,彻底弃去溶液,期间避免接触磁珠。
6、继续保持离心管固定于磁力架上,向离心管中加入250μl新鲜配置的80%乙醇。
7、保持离心管固定于磁力架上,待悬起的磁珠完全吸附后彻底弃去乙醇。
8、重复步骤6-7两次。
9、保持离心管固定于磁力架上静置放置10分钟,使乙醇完全挥发干净。
10、将离心管从磁力架上取下,加入20-100μl EB(自备)或去离子水,涡旋振荡使磁珠完全重悬于洗脱液中后,室温放置5分钟。
11、将离心管放于磁力架上直至磁珠完全吸附(约需5分钟)。
12、将洗脱液转移至一个新的1.5ml离心管中。此时,可弃去磁珠。
纯化回收得率的计算:
我们建议通过琼脂糖电泳纯化前后的样品进行回收得率的计算。我们不建议通过260 nm处的光吸收值来计算回收得率。因为溶液中单链、双链DNA和dNTP以及一些纯化前的某些杂质在260 nm处都有光吸收,这样在计算回收前样品中DNA浓度时会得到一个假的、虚高的DNA浓度。
储存条件:室温(15~30℃)
想要了解更多关于磁珠法DNA纯化回收试剂现货的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
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磁珠法DNA纯化回收试剂现货关键词:MagBeads DNA Purification Kit,WE0205,磁珠法DNA纯化回收试剂
·细菌蛋白抽提试剂盒
编号:WE0261
英文名称:Bacterial Protein Extraction Kit
规格:100次
本试剂盒使用温和的非离子型去污剂,适用于大肠杆菌表达的重组蛋白及转染昆虫细胞的蛋白提取。提取过程中不需进行超声破碎,有效避免了外源蛋白的污染。细菌蛋白抽提试剂盒在抽提试剂的基础上添加了溶菌酶、DNase I和蛋白酶抑制剂混合物,可提高蛋白提取效率并减轻因DNA引起的粘稠现象,有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物学活性,可进行IP,Western Blot,蛋白纯化等下游操作。
试剂盒组成:
| 组份 | 100次 |
| Bacterial Protein Extraction Reagent | 100ml |
| Protease Inhibitor Cocktail | 1ml |
| Lysozyme(50 mg/ml) | 200μl |
| DNaseⅠ(1000U/ml) | 100μl |
保存条件:Lysozyme、DNaseⅠ、Protease Inhibitor Cocktail:-20℃,其它组分:室温
注意事项:
1、本产品适用于从新鲜或冻存细菌和昆虫细胞中提取蛋白。
2、本品采用Tris缓冲系统,蛋白提取后的纯化操作,请使用相同的缓冲系统。
3、使用本产品获得的蛋白裂解液,可用BCA或Bradford法进行蛋白定量。
4、对于特殊的菌株,如果抽提效果不理想,可在抽提蛋白前冰冻样品。
5、根据具体情况,可在本产品中加入蛋白酶抑制剂、盐、螯合剂、还原剂等。
使用方法:
细菌可溶性蛋白提取
1、5000×g离心10分钟,收集菌体。
2、可选步骤:每1ml Bacterial Protein Extraction Reagent中加入1μl DNase I(1000U/ml)、2μl Lysozyme(50 mg/ml)和10μl Protease Inhibitor Cocktail,涡旋震荡混匀。
3、按照每克菌体沉淀加入20ml Bacterial Protein Extraction Reagent的比例,向菌体沉淀中加入抽提液,充分涡旋或用移液器上下吹打直至菌体完全重悬。
4、重悬后,室温孵育10-15分钟(放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
5、15000×g离心5分钟。
6、转移上清至新的离心管中(上清中即为可溶性蛋白),进行蛋白定量及下游实验。
注意:如目的蛋白以包涵体形式存在,可使用包涵体蛋白溶解液进行溶解或优化表达条件增加可溶性蛋白的表达。
昆虫细胞蛋白提取
1、低速离心收集细胞。每1ml Bacterial Protein Extraction Reagent中加入10μl Protease Inhibitor Cocktail即为1×工作液。
2、称量细胞湿重,按10ml/g的量加入1×工作液。
3、重悬后,冰上孵育20分钟(冰上放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
4、15000×g离心15分钟,分离可溶性蛋白。
常见问题分析
| 问题 | 可能原因 | 解决方法 |
| 目的蛋白不溶 | 目的蛋白表达为包涵体 | 优化表达条件或使用包涵体蛋白溶解液 |
| 在蛋白抽提试剂中加入Lysozyme 和DNase I | ||
| 加入Lysozyme 后目的 蛋白仍没有提取出来 |
温度过低 | 将使用试剂恢复至室温 |
| Lysozyme 活性降低或失活 | 加入更多的Lysozyme 或更换新的酶 | |
| 提取物粘度高 | DNase I 活性降低或失活 | 加入更多的DNase I 或更换新的DNase I |
| 将*离子的终浓度增加至2 mM | ||
| 蛋白抽提后仍有大 部分蛋白存在于沉淀中 |
蛋白量过大 | 加入Lysozyme及DNase I |
| 蛋白抽提试剂有沉底析出 | 温度过低 | 将蛋白抽提试剂恢复至室温 |
储存条件:-20℃
磁珠法DNA纯化回收试剂现货关键词:MagBeads DNA Purification Kit,WE0205,磁珠法DNA纯化回收试剂
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磁珠法DNA纯化回收试剂现货
¥150 - 1740









