血液RNA提取试剂盒(含DNase I)特价促销

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应血液RNA提取试剂盒(含DNase I)特价促销，产品信息：

类别：RNA纯化

英文名：RNAtiqu Blood RNA Extraction Kit(DNase I)

产品名	产品编号	包装规格
血液RNA提取试剂盒(含DNase I)	WE0197	50次

产地：国产|进口

规格：50次

品牌：百奥莱博

编号：WE0197

英文名：RNAtiqu Blood RNA Extraction Kit(DNase I)

  本试剂盒适用于从新鲜全血(用柠檬酸盐、EDTA或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)中提取总RNA，可处理多至1.5ml的全血，洗脱得到分子量大于200 bp的高纯度RNA，多个样品可以在1小时内同时完成。本产品无需CsCl纯化的超离心步骤和LiCl或乙醇沉淀，不含有*酚或*仿等有毒溶剂，经过纯化的RNA有效去除血红素、肝素等酶抑制剂和污染物，可直接用于各种分子生物学常规实验，如RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译等实验。

 

试剂盒组成：

 

组份	50次
DNase I	1000 U
10×Reaction Buffer	1000μl
Buffer RBL(10×)	60ml
Buffer RL	35ml
Buffer RW1	40ml
Buffer RW2(浓缩液)	11ml
RNase-Free Water	10ml
过滤柱FL及收集管	50套
吸附柱RM及收集管	50套
RNase-Free离心管(1.5ml)	50个

保存条件：DNase I及10×Reaction Buffer -20℃保存，其它组分室温(15～30℃)。

 

自备试剂：β-巯基乙醇、无水乙醇。

 

实验前准备及重要注意事项/strong>：

1、预防RNase污染，应注意以下几方面：

1)使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。

2)配制溶液应使用无RNase的水。

3)操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。

2、样品应避免反复冻融，否则影响提取RNA提取得率和质量。样品在Buffer RL中，可于-70℃保存一个月。

3、Buffer RL在使用前请加入β-巯基乙醇，1ml Buffer RL加10μl β-巯基乙醇。加入β-巯基乙醇的Buffer RL室温可保存1个月。

4、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer RW2中加入无水乙醇。

5、使用前请检查Buffer RL是否出现结晶或者沉淀，可置于于56℃水浴重新溶解。

6、本试剂盒不能用于加入抗凝剂的冷冻血液样本RNA的提取。

7、10×Buffer RBL需在使用前将溶液用无RNase的水进行10倍稀释，稀释后置于2～8℃保存。

 

操作步骤：

1、向新鲜的抗凝全血样本中，加入5倍血液样本体积的1×Buffer RBL(请于使用前用无RNase水将10×Buffer RBL稀释10倍)，轻轻涡旋或颠倒混匀。冰上孵育10-15分钟，孵育过程中混匀两次。

注意：孵育过程中浑浊的悬液会变成透明，证明红细胞被裂解，必要时可以把孵育时间延长至20分钟。

2、4℃ 2,100 rpm(~400×g)离心10分钟，小心吸弃上清。

3、向以上沉淀中加入2倍血液样本体积的1×Buffer RBL(请于使用前用无RNase水将10×Buffer RBL稀释10倍)，轻轻涡旋，充分重悬沉淀。

4、4℃ 2,100 rpm离心10分钟，小心并彻底吸弃上清。

注意：此步一定要完全去除上清否则影响裂解导致RNA产量下降。

5、向沉淀中加入Buffer RL(使用前检查是否已经加入β-巯基乙醇)，具体加量按照下表进行，涡旋混匀。

注意：如果血液不是健康人的全血，需要根据血液中白细胞的数量来确定所需Buffer RL的加入量。完全混匀后细胞应完全裂解，块状沉淀消失。

 

Buffer RL(μl)	健康人类全血(ml)	白细胞数量
350	小于0.5	多至2×106
600	0.5-1.5	2×106 至1×107

6、将以上所得液体转移到已装入收集管的过滤柱中，12000rpm(~～13400×g)离心2分钟，收集滤液，弃掉过滤柱。

7、向滤液中加入1倍体积(600μl或350μl)的70%乙醇(无RNase水配制)，混匀。

注意：加入乙醇后可能会产生沉淀，不会影响后续实验。

8、将上步所得溶液全部加入到吸附柱中(已装入收集管)，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心15秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

9、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1，12000rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。

10、配制DNase I 混合液：取52μl RNase-Free Water，向其中加入8μl 10×Reaction Buffer和20μl DNase I(1 U/μl)，混匀， 配制成终体积为80μl的反应液。

11、向吸附柱中直接加入80μl DNase I 混合液，20-30℃孵育15分钟。

12、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1，12000rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。

13、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心15秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

14、重复步骤13。

15、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。

注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。

16、将吸附柱置于一个新的RNase-Free的1.5ml离心管(自备)中，向吸附柱的中间部位加入30-50μl RNase-Free Water，室温放置1分钟，12000rpm离心1分钟，收集RNA溶液，-70℃保存RNA，防止降解。

注意：

1)RNase-Free Wate体积不应小于30μl，体积过小影响回收率。

2)如果要提高RNA的产量，可用30-50μl新的RNase-Free Water再次洗脱，室温放置1分钟，12000rpm离心1分钟。

3)如果要提高RNA浓度，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置1分钟，12000rpm离心1分钟。

 

储存条件：室温(15～30℃)。

血液RNA提取试剂盒(含DNase I)特价促销专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

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我公司位于北京市海淀区，是一家专业从事生化试剂、分子生物学试剂、实验耗材研发、销*(代"售")、服务为一体的生物科技公司，公司主要经营的进口品牌包括Sigma,Invitrogen,Roche,Abcam,BD, R&D,GE,Amresco,Merck等；产品涉及化工原料、生化试剂、分子克隆相关试剂、细胞培养及检测常用试剂、实验室常用耗材等。百奥莱博秉承博采众长、诚信为本、德行天下的宗旨服务于客户。公司合作单位及客户包括各大医院、科研机构、大专院校、制药单位、医学检验单位、卫生防疫、生物技术公司、食品单位等诸多领域，正逐步成长为一流的生化试剂和耗材供应商。 我们将一如既往的为您提供优质的产品和完善的售后服务。

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编号	类别	名称
WE0169	核酸电泳和回收	微量凝胶DNA回收试剂盒
WE0295	蛋白质研究	Western抗体稀释液
WE0359	FITC标记抗体	FITC标记兔抗人IgG(H+L)
WE0119	核酸扩增(PCR)	结核分枝杆菌基因分型试剂盒(HV-3)
WE0305	蛋白质研究	丽春红染色试剂
WE0219	其他分子生物学试剂	IPTG溶液(50mg/ml)
WE0209	DNA纯化	磁珠法口腔拭子DNA提取试剂盒
WE0376	HRP标记抗体	HRP标记山羊抗人IgM(Fc5μ)
WE0224	工具酶	RNase A溶液(10mg/ml)
WE0253	克隆与表达	BL21(DE3)感受态细胞
WE0239	工具酶	T4 DNA连接酶
WE0261	蛋白质研究	细菌蛋白抽提试剂盒
WE0262	蛋白质研究	哺乳动物蛋白抽提试剂盒
WE0203	RNA纯化	DNA/RNA提取试剂盒
WE0273	蛋白质研究	微量BCA蛋白定量试剂盒
WE0335	一抗	HRP标记抗His标签单克隆抗体
WE0132	核酸扩增(PCR)	cDNA第一链合成试剂盒
WE0232	基因结构和功能	Y染色体人基因组DNA定量试剂盒
WE0109	核酸扩增(PCR)	Babuddy超保真DNA聚合酶
WE0193	RNA纯化	超纯RNA提取试剂盒(DNase I)
WE0242	核酸电泳和回收	UltraStain DNA Marker
WE0162	DNA纯化	高纯质粒小提试剂盒
WE0330	免疫检测	抗His标签抗体琼脂糖介质
WE0272	蛋白质研究	Ni琼脂糖凝胶
WE0382	二抗	RRX标记山羊抗兔IgG(H+L)

 

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