北京现货SuperSYBR Mixture(低含量ROX校正

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京现货SuperSYBR Mixture(低含量ROX校正染料)哪里卖在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：北京现货SuperSYBR Mixture(低含量ROX校正染料)哪里卖
编号：WE0134
英文名：SuperSYBR Mixture(Low ROX)
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
  本品是专用于染料法(SYBR Green I)实时荧光定量PCR的预混体系，浓度为2×，包含 BaldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I 荧光染料、Mg2+和ROX I 校正染料，操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后cDNA靶序列的检测。
  本品所含的荧光染料SYBR Green I可以与所有的双链DNA结合，使该产品可用于不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。本品含有的BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效热启动酶，在常温下没有聚合酶活性，有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合，有效抑制了非特异性的PCR扩增，显著提高了PCR的扩增效率。
  所含的ROX染料可校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，本试剂盒中ROX校正染料含量较较低，适用于ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等需要较低ROX信号校正的荧光定量PCR仪。

试剂盒组成：

 

组份	1ml	5ml
2×SuperSYBR Mixture(Low ROX)	1ml	5×1ml
ddH2O	1ml	5×1ml

产品特点
1、本产品中使用了全新高效热启动酶BaldStar Taq DNA Polymerase与独特的PCR缓冲体系，显著提高PCR的扩增效率，具有高灵敏度和特异性强的特点。
2、适用于荧光定量PCR检测，能够准确地对目的基因进行定量和检测。

注意事项：
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、本产品中含有SYBR Green I荧光染料和ROX染料，保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照射。
3、避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降。
4、本品不能用于探针法荧光定量PCR。
5、配制反应液时，请使用新的或者无污染的枪头和离心管，尽量防止污染。

操作步骤：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×SuperSYBR Mixture(Low ROX)	2 5μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	2μl
ddH2O	up to 50μl

注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可得到较好结果，可以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。
3)推荐反应体系为50μl，也可以根据实际实验需求按比例扩大或者缩小反应体系。

2、PCR反应程序：
注意！本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成！

建议采用下表显示的两步法PCR进行程序设定，本程序是以ABI7500荧光定量PCR仪为例。若因Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR 扩增，三步法操作步骤详见《反应条件的优化》。
 

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	15 s	35-40 个循环
退火/延伸	60℃	1 min
融解曲线分析	95℃	15 s
	60℃	1 min
	95℃	15 s
	60℃	15 s

注意：
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考，发生非特异性反应时，可提高退火温度。
3)本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定，融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定。

反应条件的优化：
在荧光定量反应条件优化时，应从引物浓度、退火温度、延伸时间等方面进行考虑，以提高反应特异性和扩增效率。
1、反应特异性和扩增效率高的实验体系应具备以下条件：
1)反应特异性高：阴性对照无引物二聚体等非特异性扩增；不产生目的片段以外扩增。
2)扩增效率高：Ct值低；PCR扩增效率高，接近理论值100%。
2、反应条件优化方法：
1)引物浓度：通常引物浓度以0.2μM可得到较好结果，可以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。若提高反应特异性，可降低引物浓度；若提高扩增效率，可增加引物的浓度，由此优化反应体系。
2)退火温度：建议采用两步法PCR，退火温度60℃进行反应。若提高反应特异性，可提高退火温度，以60-64℃作为设定范围的参考。若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增，三步法的退火温度请以56℃-64℃的范围作为设定参考。
3)延伸时间：建议采用两步法PCR，延伸时间1 min进行反应。若提高扩增效率，可尝试将延伸时间增加，或尝试三步法PCR。
注意！本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成！

三步法荧光定量PCR(本程序是以ABI7500荧光定量PCR仪为例)：
 

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	10 s	35-40个循环
退火	56-64℃	30s
延伸	72℃	32s
融解曲线分析	95℃	15s
	60℃	1 min
	95℃	15 s
	60℃	15 s

注意：
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度。
3)若需提高反应扩增效率，可适当增加延伸时间。
4)本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定，融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定。

储存条件：-20℃，避免反复冻融

北京现货SuperSYBR Mixture(低含量ROX校正染料)哪里卖极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·HRP标记抗c-Myc标签单克隆抗体
编号：WE0333
英文名称：HRP Conjugated Anti c-Myc Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格：20μl|100μl
本抗体为经辣根过氧化物酶(HRP)直接标记的抗c-Myc标签鼠单克隆抗体，可高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的c-Myc标签(EQKLISEEDL)， 而不受邻近*基酸组成的影响，可用于检测c-Myc Tag融合蛋白。本产品经HRP直接标记，无需使用二抗，可直接用相应酶底物显色或化学发光法检测目的蛋白，减化了实验步骤，避免由二抗交叉反应引起的非特异性条带。

抗体类型：鼠IgG
免疫原：人工合成多肽
标记物：HRP
应用范围：WB(1：1000-5000)、ELISA(1：1000-20000)

·组织样本RNA样品保存管
编号：WE0401
英文名称：HRP Conjugated Anti c-Myc Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格：10支
本抗体为经辣根过氧化物酶(HRP)直接标记的抗c-Myc标签鼠单克隆抗体，可高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的c-Myc标签(EQKLISEEDL)， 而不受邻近*基酸组成的影响，可用于检测c-Myc Tag融合蛋白。本产品经HRP直接标记，无需使用二抗，可直接用相应酶底物显色或化学发光法检测目的蛋白，减化了实验步骤，避免由二抗交叉反应引起的非特异性条带。

抗体类型：鼠IgG
免疫原：人工合成多肽
标记物：HRP
应用范围：WB(1：1000-5000)、ELISA(1：1000-20000)

·6×UltraStain上样缓冲液
编号：WE0211
英文名称：6×UltraStain Loading Buffer
规格：500μl|500μl×5
  本产品在常规6×Loading Buffer中添加了UltraStain染料，该染料是一种生物大分子，不能穿透细胞膜进入细胞内。相对于EB的强诱变性，是一种安全无毒的核酸染料。使用6×UltraStain Loading Buffer替代原始Loading Buffer时，在制胶过程中无需加入EB等核酸染料，只需要将DNA与6×UltraStain Loading Buffer混匀即可进行凝胶电泳。由于UltraStain与EB具有相同的光谱特性，无需改变滤光片及观察装置，在正常紫外光激发检测即可，使用非常方便和灵活。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、由于该染料只需在电泳前与DNA混匀，无需加入凝胶中，可使制备的凝胶保存时间更长。
2、由于Loading Buffer中染料的量远高于将染料加入凝胶中的量，对DNA的灵敏度更高。

操作步骤：
1、配置合适浓度的琼脂糖凝胶
2、吸取5μl DNA样品与1μl 6×UltraStain Loading Buffer混匀后，直接电泳于上样孔内，进行常规电泳和图像采集。


图为向Super DNA Ladder(货号：WE0243)中添加1μl 本产品，在不加染料的TAE缓冲液配置的琼脂糖凝胶中的电泳图

储存条件：2～8℃避光


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·FITC标记山羊抗兔IgG(H+L)
编号：WE0384
英文名称：Goat Anti-Rabbit IgG, FITC Conjugated
规格：100μl
本产品为FITC标记的经亲和纯化的山羊抗体，特异识别兔IgG，检测灵敏度高，本底低，对其他种属IgG无明显交叉反应，常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。

免疫原：兔IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：0.05%叠氮*
荧光团：FITC，Amax=492; Emax=520
应用范围：Immunofluorescence(1：25-100)

·Western中分子量蛋白Marker
编号：WE0292
英文名称：Western MidiWT Protein Marker
规格：20次(100μl)
  本品是专门为Western Blot实验设计的分子量标准。由4种不同分子量的蛋白组成(20 kD、35 kD、60 kD、110 kD)，这四种蛋白都可与人、小鼠、大鼠、山羊、绵羊、兔的IgG恒定区结合，因此该Marker能与待检抗原在同一张胶片上曝光，阳性信号的分子量大小可以直接通过MidiWT的位置做出准确判断，无需后续图片拼接即可确定目的蛋白。另外该Marker还可以作为Western Blot实验的阳性对照。本产品不经过任何化学修饰，分子量精确，可以准确衡量目的蛋白的分子量大小，推荐上样量为5-10 µl。

注意事项：
1、本产品可直接使用，不需要加热。
2、将产品取出后于室温放置融化，务必使其完全融化，否则影响实验结果。
3、该产品与抗血清或高浓度多克隆抗体一起孵育时可能会出现非特异性条带，此时可降低该Western Blot Marker的上样量至2-5μl。
4、使用新配制的凝胶，及时更换电泳缓冲液和转膜液，以免影响实验结果。

操作步骤：
1、将产品取出后于室温放置融化。
2、温和地充分混匀，取5μl至上样孔中，进行SDS-PAGE电泳。
3、电泳完毕后将凝胶上蛋白转至NC或PVDF膜，依次孵育一抗、二抗。
4、孵育完毕并经充分洗涤后，将印迹膜与ECL工作液反应数分钟，使用X-光胶片曝光或化学发光成像。

实验图例

12%的聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳后转膜，化学发光法曝光结果。

储存条件：-20℃保存，避免反复冻融


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1-羟基*并三氮唑一水物 Acridine hydrochloride 123333-53-9
ARB13720 兔诱导型一氧化*(代"氮")合成酶(INOS)含量检测 Rabbit inducible nitric oxide synthase,inos ELISA KIT
PY06-002  大肠杆菌显色培养基  1000ml，用于大肠杆菌的快速分离与计数
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BTN90315 非冻型尿液DNA保存液 Urine DNALOCKER
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*唑西林* 5-BrU 1173-88-2
BL0903 FITC标记羊抗牛IgG抗体
ARB11575 人基质金属蛋白酶9(MMP-9)Elisa方法检测 Human matrix metalloproteinase,mmp-9 ELISA KIT
ARB11881 人激肽释放酶6(KLK 6)含量检测 Human kallikrein 6,klk 6 ELISA KIT
PY08-038  肠道菌增菌肉汤 10ml  10支/盒，用于肠道菌的增菌培养，特别用于阪崎肠杆菌的选择性增菌培养
18656-96-7 X-Gluc
BFD030 链霉素快速检测试剂盒

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