北京现货2×BaHF MasterMix(含染料)优惠

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖北京现货2×BaHF MasterMix(含染料)优惠在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：北京现货2×BaHF MasterMix(含染料)优惠
规格：5ml
英文名：2×BaHF MasterMix(With Dye)
编号：WE0114
品牌：百奥莱博
  本品为由BaHF DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系，浓度为2×，具有操作简便快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好的优点，可最大限度地减少人为误差和污染。该产品所含的BaHF DNA Polymerase是经过特殊处理的热启动高保真聚合酶。该聚合酶具有5"-3"DNA聚合酶活性，5"-3"核酸外切酶活性和3"-5"核酸外切酶活性，在普通PCR条件下，与BaldStar Taq DNA Polymerase相比，具有扩增效率高、错配率低的优良性能。化学修饰使该酶在常温下没有聚合酶活性，有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活需要在95℃下孵育10分钟，该条件可以整合入已有的PCR热循环程序。优化的缓冲体系使酶的作用发挥最大功效，实现对目的片段的高保真、高特异性、高扩增效率、高灵敏度扩增。本产品已加入染料(蓝色)，反应结束后可直接进行电泳检测，无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。适用于常规的PCR反应和对高保真性有要求的基因克隆等实验。

产品组成：

 

组份	1ml	5ml
2×BaHF MasterMix(With Dye)	1ml	5×1ml
ddH2O	1ml	5×1ml

注意：2×BaHF MasterMix含有BaHF DNA Polymerase,3.4 mM MgCl2和 400μM each dNTP。

质量控制：
1、经检验无外源核酸酶活性；
2、PCR方法检测无宿主残余DNA；
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因；
4、2～8℃存放三个月，活性无明显改变。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×BaHF MasterMix(With Dye)	25μl	1×
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	＜0.5μg	＜0.5μg/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	95℃	10 min
变性	94℃	30 s	30-40 个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	60 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品中所包含的BaHF DNA Polymerase的扩增效率为1-2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
4)本产品须在预变性95℃，10 min条件下实现酶的活化。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

更多有关北京现货2×BaHF MasterMix(含染料)优惠的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·抗V5标签单克隆抗体
编号：WE0343
英文名称：Anti V5 Mouse Monoclonal Antibody
规格：100μl
V5标签是从猿病毒5(SV5)副粘病毒P蛋白和V蛋白中分离得到的由14个*基酸残基组成的多肽(GKPIPNPLLGLDST)。该抗体高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的V5标签，不受邻近*基酸组成的影响，可用于检测各种表达载体表达的V5-Tag融合蛋白。

抗体类型：鼠单克隆抗体IgG
免疫原：人工合成多肽
应用范围：WB(1：500-5000)、ELISA(1：1000-10000)

·Real-time RT-PCR MasterMix
编号：WE0130
英文名称：SuperFastRT MasterMix(for Real-Time PCR)
规格：100次
  本品是专为Real-time RT-PCR而研发的快速逆转录试剂混合液。5×SuperQuick RT MasterMix中包含SuperFastRT逆转酶、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP、RT Buffer等从RNA模板逆转录成cDNA第一链所需的全部试剂。该产品的逆转录效率高，可对少量RNA模板进行良好的逆转录反应，15分钟即可完成荧光定量模板cDNA第一链合成。另外，逆转录反应温度可以提高到50℃，可通读GC含量高和二级结构复杂的RNA模板。本试剂盒操作十分方便快捷，仅需加入RNA模板和水即可进行逆转录反应，特别适合于高通量检测。

产品组成：

组份	100次
5×SuperQuick RT MasterMix	200μl
RNase-Free Water	1ml

产品特点：
1、简便：即用型逆转录Mix，只需加入RNA模板和水，便可进行反应。
2、快速：15分钟完成cDNA第一链合成。
3、反转录效率高：反转录效率高于90%。
4、灵敏度高：pg级模板也可以得到高质量的cDNA。
5、通读复杂模板：GC含量高和二级结构复杂模板。

注意事项：
1、在操作过程中应避免RNase污染，防止RNA降解或实验中的交叉污染，建议操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套，使用专门的仪器和耗材。
2、逆转录体系配制在冰上进行操作，防止RNA发生降解。试剂盒的MasterMix使用后尽快置于-20℃保存，并尽量避免反复冻融。
3、反应体系可倍比放大，10μl反应体系可最大使用1μg总RNA。
4、对于二级结构复杂的RNA模板，建议在操作步骤之前，将模板RNA在65℃孵育5min立刻置于冰上，短暂离心后进行下一步操作。

操作步骤：
1、将模板RNA在冰上解冻；将试剂盒组分在室温解冻后立刻置于冰上，使用前将每种溶液涡旋振荡混匀，并经短暂离心后使用。
2、根据以下表格配制反应体系(反应液配制请在冰上进行)，涡旋震荡混匀，短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。
 

试剂	10μl反应体系	终浓度
RNA Template	Xμl	1 pg～0.5μg
5×SuperQuick RT MasterMix	2μl	1×
RNase-Free Water	up to 10μl

注意：
1)如果总RNA量大于1μg，请按比例扩大反应体系。
2)5×SuperQuick RT MasterMix 中含有Oligo(dT)、Random primer、RNase Inhibitor、dNTP Mixture、RT Buffer等。

3、42℃孵育15分钟。
注意：对于二级结构复杂或GC含量高的模板，可以提高逆转录温度至50℃，增强逆转录效率。
4、85℃孵育5分钟，使逆转录酶失活。
5、短暂离心后置于冰上，再进行后续Real-time PCR检测，如果需要长时间保存，请置于-20℃。
注意：进行Real-time PCR反应时，逆转录产物的加量应不超过PCR反应总体积的1/10。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。


北京现货2×BaHF MasterMix(含染料)优惠关键词：2×BaHF MasterMix(With Dye),2×BaHF MasterMix(含染料),WE0114


·细菌蛋白抽提试剂盒
编号：WE0261
英文名称：Bacterial Protein Extraction Kit
规格：100次
  本试剂盒使用温和的非离子型去污剂，适用于大肠杆菌表达的重组蛋白及转染昆虫细胞的蛋白提取。提取过程中不需进行超声破碎，有效避免了外源蛋白的污染。细菌蛋白抽提试剂盒在抽提试剂的基础上添加了溶菌酶、DNase I和蛋白酶抑制剂混合物，可提高蛋白提取效率并减轻因DNA引起的粘稠现象，有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物学活性，可进行IP，Western Blot，蛋白纯化等下游操作。

试剂盒组成：

组份	100次
Bacterial Protein Extraction Reagent	100ml
Protease Inhibitor Cocktail	1ml
Lysozyme(50 mg/ml)	200μl
DNaseⅠ(1000U/ml)	100μl

保存条件：Lysozyme、DNaseⅠ、Protease Inhibitor Cocktail：-20℃，其它组分：室温

注意事项：
1、本产品适用于从新鲜或冻存细菌和昆虫细胞中提取蛋白。
2、本品采用Tris缓冲系统，蛋白提取后的纯化操作，请使用相同的缓冲系统。
3、使用本产品获得的蛋白裂解液，可用BCA或Bradford法进行蛋白定量。
4、对于特殊的菌株，如果抽提效果不理想，可在抽提蛋白前冰冻样品。
5、根据具体情况，可在本产品中加入蛋白酶抑制剂、盐、螯合剂、还原剂等。

使用方法：

细菌可溶性蛋白提取
1、5000×g离心10分钟，收集菌体。
2、可选步骤：每1ml Bacterial Protein Extraction Reagent中加入1μl DNase I(1000U/ml)、2μl Lysozyme(50 mg/ml)和10μl Protease Inhibitor Cocktail，涡旋震荡混匀。
3、按照每克菌体沉淀加入20ml Bacterial Protein Extraction Reagent的比例，向菌体沉淀中加入抽提液，充分涡旋或用移液器上下吹打直至菌体完全重悬。
4、重悬后，室温孵育10-15分钟(放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
5、15000×g离心5分钟。
6、转移上清至新的离心管中(上清中即为可溶性蛋白)，进行蛋白定量及下游实验。
注意：如目的蛋白以包涵体形式存在，可使用包涵体蛋白溶解液进行溶解或优化表达条件增加可溶性蛋白的表达。

昆虫细胞蛋白提取
1、低速离心收集细胞。每1ml Bacterial Protein Extraction Reagent中加入10μl Protease Inhibitor Cocktail即为1×工作液。
2、称量细胞湿重，按10ml/g的量加入1×工作液。
3、重悬后，冰上孵育20分钟(冰上放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
4、15000×g离心15分钟，分离可溶性蛋白。

常见问题分析
 

问题	可能原因	解决方法
目的蛋白不溶	目的蛋白表达为包涵体	优化表达条件或使用包涵体蛋白溶解液
		在蛋白抽提试剂中加入Lysozyme 和DNase I
加入Lysozyme 后目的 蛋白仍没有提取出来	温度过低	将使用试剂恢复至室温
	Lysozyme 活性降低或失活	加入更多的Lysozyme 或更换新的酶
提取物粘度高	DNase I 活性降低或失活	加入更多的DNase I 或更换新的DNase I
		将*离子的终浓度增加至2 mM
蛋白抽提后仍有大 部分蛋白存在于沉淀中	蛋白量过大	加入Lysozyme及DNase I
蛋白抽提试剂有沉底析出	温度过低	将蛋白抽提试剂恢复至室温

储存条件：-20℃


北京现货2×BaHF MasterMix(含染料)优惠关键词：2×BaHF MasterMix(With Dye),2×BaHF MasterMix(含染料),WE0114

ARB10437 人甲状腺抗体(TAb)ELISA代测服务 Human thyroid antibody,tab ELISA KIT
BL1127 细胞爬片抗原修复液(1×)
ARB13726 兔热休克蛋白40(HSP-40)Elisa方法检测 Rabbit heat shock protein 40,hsp-40 ELISA KIT
ARB12009 大鼠TH1细胞内细胞因子(TH1)elisa测定使用说明书 
ARB11683 人葡萄球菌蛋白A(SPA)酶标法分析 Human staphylococal protein a,spa ELISA KIT
ARB10954 人肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)免费代测 Human heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor,hb-egf ELISA KIT
002013 草酸*抗凝兔血 100ml|500ml
F050312 小鼠IgA抗体 Mouse IgA
岩藻多糖 TAPSO sodiu*(代"m") salt 9072-19-9
"
PY04-024  1%亚碲酸*(*)溶液  2mg/支×10支  每支添加于00ml亚碲酸*(*)肉汤培养基基础，用于金黄色葡萄球菌增菌培养
BL0323 弗氏完全佐剂 Freund "s Adjuvant Complete
β-谷甾烷醇 Terramycin 915-05-9

我公司正在火爆促销核酸扩增(PCR)系列产品，欢迎您的垂询选购北京现货2×BaHF MasterMix(含染料)优惠。