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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
12个月
- 库存：
100
- 供应商：
柯雷生物
- 规格：
50ug
宿主：E.coli
内毒素水平<1.0EU/µg(LAL法测定)
亚细胞定位n/a
片段与标签：N-terminal His Tag
缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）
性状：冻干粉
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文献和实验转移酶重组蛋白的诱导 1. 接种含有重组氯霉素酰基转移酶蛋白的大肠杆菌BL21菌株于5mL LB液体培养基中（含100ug/mL 氨苄青霉素），37℃震荡培养过夜。 2. 转接1mL过夜培养物于100mL（含100ug/mL 氨苄青霉素）LB液体培养基中，37℃震荡培养至OD600 = 0.6 - 0.8。取10ul 样品用于SDS-PAGE 分析。 3. 加入IPTG至终浓度0.5 mmol/l, 37℃继续培养1-3h. 4. 12，000rpm 离心10 min, 弃上清，菌体
酶作用下连接入载体。4. 获得含重组表达质粒的表达菌种① 将连接产物转化大肠杆菌 DH5α，根据重组载体的标志（抗 Amp 或蓝白斑）作筛选，挑取单斑，碱裂解法小量抽提质粒，双酶切初步鉴定。② 测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确， 进入下步操作。否则应筛选更多克隆，重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。③ 以此重组质粒 DNA 转化表达宿主菌的感受态细胞。5. 氯霉素酰基转移酶重组蛋白的诱导① 接种含有重组氯霉素酰基转移酶蛋白的大肠杆菌 BL21 菌株于 5 mL LB 液体培养基中（含 100
-Triton蛋白分级抽提试剂盒细胞膜NP-40 or RIPA膜蛋白抽提试剂盒蛋白分级抽提试剂盒细胞核RIPA核蛋白抽提试剂盒线粒体RIPA线粒体蛋白抽提试剂盒亚细胞定位蛋白抽提试剂盒蛋白酶磷酸酶抑制剂抑制剂蛋白酶或磷酸酶PMSF丝氨酸蛋白酶抑制剂，如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶Leupeptin 亮肽素抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶，如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤溶酶和组织蛋白酶BAprotinin 抑肽酶丝氨酸蛋白酶抑制剂，抑制纤维蛋白溶酶、激肽释放酶、胰蛋白
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