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- klRPA399Ca01
- 2025年07月12日
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- 详细信息
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- 技术资料
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负20度
- 保质期：
一年
- 英文名：
Recombinant High Mobility Group Protein 1 (HMG1)
- 库存：
大量
- 供应商：
柯雷生物
| Organism species | Homo sapiens (Human) |
| Product No. | xy399Hu01 |
| Source | Prokaryotic expression |
| Host | E.coli |
| Purity | > 95% |
| UOM | 50ug |
| Predicted Molecular Mass | 26.4kDa |
| Concentration | 5.9 |
| Applications | SDS-PAGE; WB; ELISA; IP. |
| Endotoxin Level | <1.0EU per 1µg (determined by the LAL method) |
| Residues | Met1~Glu215 with N-terminal His-Tag |
MGKGDPKKPR GKMSSYAFFV QTCREEHKKK HPDASVNFSE FSKKCSERWK TMSAKEKGKF EDMAKADKAR YEREMKTYIP PKGETKKKFK DPNAPKRPPS AFFLFCSEYR PKIKGEHPGL SIGDVAKKLG EMWNNTAADD KQPYEKKAAK LKEKYEKDIA AYRAKGKPDA AKKGVVKAEK SKKKKEEEED EEDEEDEEEE EDEEDEDEEE DDDDE
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文献和实验裂解细胞。其中超声波裂解细胞是更广泛应用的一种方法，但利用此方法细胞的裂解率较低，并且液不适用于大量细胞的裂解（超出 50 g）。无论选择何种方法，都必须将细胞置于冰上； 4) 细胞裂解后在混和液中迅速加入蛋白酶抑制剂，每 40 mL 混和液加入 5 mL 的含有 EDTA 的蛋白酶抑制剂 Cocktail Set II 或 1mL 的蛋白酶抑制剂 Cocktail Set III（选做）； 5) 10000
填料 根据亲和层析的几种应用方向，亲和层析的填料主要分为标签蛋白纯化填料、抗体及抗体片段纯化填料、族特异性亲和填料以及预活化填料四种。 1. 标签蛋白纯化填料 为了简化纯化流程以及方便后期的检测，在进行重组蛋白表达时往往会加入标签。常用的标签包括His标签、GST标签、Strep标签及MBP标签等 （表8)。His标签由于分子量很小，几乎不会影响靶蛋白结构和功能而被广泛使用。GST和MBP标签常用于促进蛋白的可溶表达，尤其对于难表达的真核细胞蛋白和病毒蛋白有很好的促溶表达能力。Strep
检测实验，或用相应激酶（见注释 3 ) 的已知底物在溶液中对激酶的活性进行检测。如果在文献中未查到激酶的最佳活化条件，那么每种激酶的最优活化条件（如最佳缓冲液条件、激酶的浓度、激酶的孵育时间）要通过实验来确定。 ( 3 ) 建议使用一种阳性对照（如该激酶的一个已知底物）。在研究大麦 CK2α 实验中 [22]，我们用阳性对照来区别大麦蛋白，它们和不同植物 HMG ( 高迁移率群）的蛋白质具有很高的同源性，这些蛋白质就是众所周知的 CK2α 靶蛋白 [28，29] 。在另一项研究实验中
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