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- YOYOBIO
- 上海
- yjto0696
- 2025年07月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温,3个月
- 库存：
大量供应
- 供应商：
上海研谨生物
- 规格：
100ml
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文献和实验1． 临用之前制备羟胺溶液，置冰上待用。 2． 将用氯化铯纯化的 10 μ g 质粒 DNA 加到含 500 μ l 羟胺溶液的微型离心管。 3． 在 37 ℃下培养 20 小时。 4． 加入 10 μ l 的 5mol/L NaCl 、 50 μ g 1mg/ml 的牛血清蛋白（ BSA ）和 1ml 无水乙醇终止反应，置－ 70 ℃沉淀 DNA10 分钟。 5． 离心 10 分钟，小心弃去所有上清液，收集 DNA 。
质粒 DNA 的羟基突变 1． 临用之前制备羟胺溶液，置冰上待用。 2． 将用氯化铯纯化的 10 μ g 质粒 DNA 加到含 500 μ l 羟胺溶液的微型离心管。 3． 在 37 ℃下培养 20 小时。 4． 加入 10 μ l 的 5mol/L NaCl 、 50 μ g 1mg/ml 的牛血清蛋白（ BSA ）和 1ml 无水乙醇终止反应，置－ 70 ℃沉淀 DNA10 分钟。
】1. 消化缓冲液：100 mM NaCl，10 mM Tris.Cl (pH8.0) 25 mM EDTA (pH8.0)，0.5% (w/v) SDS，0.1 mg/mL 蛋白酶 K。2. 7.5mol/L 乙酸铵。3. 100% 乙醇。4. 酚/氯仿/异戊醇。【实验方法与步骤】1. 将新鲜组织剪成小块并立即置于液氮中冻存；2. 将 200 mg～1 g 的组织用预冷的研钵研碎，或用锤子将其捣为细粉末，每 100 mg 组织用 1.2 mL 消化缓冲液悬浮，然后于 50℃ 摇荡温育 12~18 h
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