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上海研谨生物
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2×100ml
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文献和实验Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
复红溶于100ml蒸馏水中。 (3)C液 0.2g台盼蓝溶于100ml 蒸馏水中。 染色液由40份A溶液,2.5份B溶液和2份C溶液组成。每40分A溶液加入,0.4ml浓盐酸。 [染色方法] (1)石蜡切片,脱蜡至水 (2)在Weigert铁苏木素中5ml。 (3)自来水洗。 (4)在染色液中染l0min。 (5)在水中迅速洗一下即经过50%、70%与95%乙醇,无水乙醇两次。 (6)二甲苯透明,中性树胶封固。 [结果] 核-蓝黑色;胞质-黄色,胶原纤维-粗纤维
临用时,取甲、乙液等量混合即可应用。混合时应将乙液加人甲液内,染液呈紫黑色。铁苏木素不能象明矾苏木素一样配制后可放置贮存备用,因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀,所以铁作媒染液时,必须与染液分别配制和分别保存,染片时临时混合应用。 由于这是一种铁苏木素,它将胞核染成黑色。能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用,且不会被光线退色,因此比钾矾苏木素染色较为持久。 8.Mallory氏磷钨酸苏木素液(PTAH) 配方: 苏木素 0.1g
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