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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT,避光,有效期6个月
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- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- 规格:
3*100ml
磷脂铁苏木素(FeH)染色液
货号:G3250
规格:3×100ml
保存: RT 避光,有效期6个月。
产品简介:
磷脂(Phospholipid)是指含有磷酸的脂类,属于复合脂。磷脂是生物膜的成分,分为甘油磷脂和鞘磷脂两类。磷脂为两性分子,一端为亲水的含氮或磷的头,另一端为疏水(亲油)的长烃基链。Elleder发现磷脂可通过三价铁苏木素显示出来,该法比DAH更简便、快速、敏感。其缺点是只有组织用bing
酮脱脂后染色效果才好,而且有时细胞核和脂质会被同时染色呈黑蓝色。
产品组成:
| 名称 | 3×100ml | Storage | |
| 试剂(A): FeH 固定液 | 100ml | RT 避光 | |
| 试剂(B): FeH stain | B1: FeH 苏木素 | 5×0.1g | RT 避光 |
| B2: 苏木素溶剂 | 25ml | RT | |
| B3: FeH buffer | 75ml | RT 避光 | |
| 试剂(C): FeH 分化液 | 100ml | RT | |
1、 氯仿
2、 丙tong
3、蒸馏水
操作步骤(仅供参考):
1、 室温下用氯仿:甲醇溶液(1:1)浸泡1张切片1h作为对照,4℃条件下用无水ping酮浸泡另外1张切片15min。
2、 入FeH 固定液固定30min。
3、 蒸馏水冲洗。
4、 提前配制FeH stain:每取5ml苏木素溶剂,加入一支FeH 苏木素0.1g。充分溶解后,加入25ml FeH buffer,即为FeH stain。
5、 入FeH stain染色7~10min。
6、 蒸馏水冲洗。
7、 用蒸馏水等量稀释FeH 分化液后,切片入稀释后的FeH分化液浸泡数次。
8、 自来水冲洗。
9、 ping酮脱水,二甲苯透明,DPX封片剂封固。
染色结果:
| 磷脂 | 蓝色 |
| 细胞核 | 蓝色 |
1、 磷脂容易溶解,所以组织取出后应立即固定,否则难以着色。
2、 本染色液对冰冻切片的染色效果较好。
3、 染色后的标本务必避光保存,否则容易褪色。
4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
复红溶于100ml蒸馏水中。 (3)C液 0.2g台盼蓝溶于100ml 蒸馏水中。 染色液由40份A溶液,2.5份B溶液和2份C溶液组成。每40分A溶液加入,0.4ml浓盐酸。 [染色方法] (1)石蜡切片,脱蜡至水 (2)在Weigert铁苏木素中5ml。 (3)自来水洗。 (4)在染色液中染l0min。 (5)在水中迅速洗一下即经过50%、70%与95%乙醇,无水乙醇两次。 (6)二甲苯透明,中性树胶封固。 [结果] 核-蓝黑色;胞质-黄色,胶原纤维-粗纤维
临用时,取甲、乙液等量混合即可应用。混合时应将乙液加人甲液内,染液呈紫黑色。铁苏木素不能象明矾苏木素一样配制后可放置贮存备用,因铁与染色剂的色素根会化合生成不溶性沉淀,所以铁作媒染液时,必须与染液分别配制和分别保存,染片时临时混合应用。 由于这是一种铁苏木素,它将胞核染成黑色。能抵抗在对比染色液中所含分色剂的脱色作用,且不会被光线退色,因此比钾矾苏木素染色较为持久。 8.Mallory氏磷钨酸苏木素液(PTAH) 配方: 苏木素 0.1g
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