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上海研谨生物
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500ml
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文献和实验或碎裂并损伤切片刀刃。脱去钙盐的过程――称为脱钙。脱钙时应注意: 1.骨组织固定24小时后,锯下不超过0.5mm厚的薄骨片,再以10%福尔马林固定后进行脱钙。(未固定的组织在酸性脱钙液中受到的损伤比已固定的组织约大三倍)。骨组织过厚则需延长脱钙时间,长时间浸于强酸影响切片染色效果。 2.在不影响诊断的条件下,应将骨组织周围的软组织全部剥去。如果切片目的在于观察骨髓病变或骨组织肿瘤,最好除去一部分正常的致密的骨组织,以利于脱钙和制片。 3.脱钙前最好先将骨组
样本采集和快速冷冻的时间。 2. 即时加入 RNA 稳定剂,使组织内的 RNase 失活及保护组织中的 RNA。 3. 快速匀浆,加入裂解液若粘稠至不能有效分层,可继续加入更多裂解液。 4. 采用 RNeasy Mini Kit(货号:74104)提取时,可将缓冲液 RLT 中加入的巯基乙醇含量提高至 3%-5%,能够有效改善结果。 血液样本 提取得到的 RNA 量少;由于 RNase 得到的 RNA 完整性较差,有降解;污染物包括抗凝剂-肝素和 EDTA,以及天然酶抑制剂影响下游 RNA
组化染色常不能到达理想结果或不成功。组织同样不能长时间放置在70%的乙醇中,酒精固定后的组织形态不如福尔马林固定的组织。脱钙液对抗原破坏较为严重,因此在组织脱钙前最好在福尔马林液中固定48小时,若组织没有固定透则酸会破坏抗原,脱钙液中酸的浓度与脱钙时间都必须尽量控制在最低的限度。3、浸蜡:我们认为浸蜡温度应控制在58~60℃左右,浸蜡用的石蜡应经常更换,以减少石蜡中二甲苯的含量。高温下的二甲苯容易使组织发脆,细胞收缩,更容易掉片。4、切片厚度:用于免疫组织化学染色的切片厚度为3-4微米。为防止在染色过程
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